免疫组化的细胞凋亡检测
细胞凋亡原理：正常凋亡细胞通过检测凋亡细胞DNA片段进行染色，正常的、人为造成凋亡的细胞很少能够被染色。以甲基绿复染，便于从形态学上分辨评估正常细胞和凋亡细胞。 首先确定目标凋亡细胞的组织部位（如眼球组织，由于玻璃体结构内没有细胞核，因此看不到凋亡，在整个组织的最外面有单层视网膜细胞，因此只能在最边缘查看凋亡细胞的阳性产物）......阅读全文
细胞凋亡的早期检测方法
1、PS（磷脂酰丝氨酸）在胞外膜分布的检测PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS，使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白（如Annexin V-FITC）即可检测细胞凋亡。由于这是一种凋亡早
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整
ELISA法检测细胞凋亡
（一） 原理细胞凋亡的发生，是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特
细胞凋亡检测方法介绍
细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中，会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生，因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分
细胞凋亡晚期检测技术
晚期检测： 细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1.TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d
细胞凋亡检测方法简介
细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中，会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程，会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生，因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
细胞凋亡检测操作流程2——BrdU检测凋亡细胞DNA断裂片段
凋亡检测操作流程二、 BrdU检测凋亡细胞DNA断裂片段相关试剂及组分：一步法: APO-DIRECT试剂盒（货号：556381）： PartA（4°C保存）PartB（-20°C保存）PI/RNase A SolutionFITC-dUTPReaction BufferTdT EnzymeRins
细胞凋亡检测：生化特征的检测方法
根据调亡的生化特征的检测方法一、琼脂糖凝胶电泳1）常规的琼脂糖凝胶电泳方法一：1．收集细胞（5×106）1000r/min，离心5min，去上清。2．PBS洗一次，1000r/min，离心5min，去上清。3．加细胞核裂解液500μl重悬细胞，50℃水浴，3～5h，不时振摇或37℃过夜。4．加0.5
流式细胞术检测细胞凋亡
实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis. 实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part o
细胞凋亡检测操作流程三JC1检测凋亡细胞线粒体膜电...
细胞凋亡检测操作流程三--JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变凋亡检测操作流程 三、JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变BD™ MitoScreen (JC-1)线粒体膜电位检测试剂盒（551302）：组分描述JC-1(染料)4瓶，每瓶用于25个样本。冻干粉，使用前稀释至储存液（Stock Sol
细胞凋亡及其检测技术的进展
细胞凋亡是多细胞生物体内一个重要的生命现象，它已成为当前生命科学和医学领域的研究热点。根据细胞凋亡时的形态学改变和生化改变，通过显微镜和流式细胞仪等仪器设备，采用凝胶电泳及原位标记法等方法对凋亡细胞进行检测。随着研究的深入，许多新的指标逐渐被采纳，同时先进仪器的使用，原有指标的灵敏度和准确性也得到提
细胞凋亡的检测方法综述4
DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移（ISNT）切片常规脱蜡，梯度乙醇复水化。将切片组织浸入2×SSC液中，80℃，20min，然后蒸馏水冲尽。0.5%胃蛋白酶（pH2.0）37℃消化0～20min，PBS洗尽。用滤纸擦干组织块周边液体放入湿盒组织切片上滴加缓冲液A，5min。缓冲液A
细胞凋亡的检测方法综述3
4、DNA 5’末端32P标记（1）将脱磷酸样品DNA置冰浴上，再加双蒸水10μl，10×缓冲液2μl，T4多核苷酸激酶10U，32P-ATP 740kBq（20μCi），双蒸水加至20μl。（2）混合后，37℃水浴60min。（3）加入1μl的0.5mol/L EDTA，90℃灭活5min。5、观
细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1．光学显微镜和倒置显微镜1． 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。2． 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化
细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边
细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。1．光学显微镜和倒置显微镜1． 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。2． 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化
细胞凋亡的检测方法综述1
一、形态学检测（一）光学显微镜和倒置显微镜 1、未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 2、染色细胞常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。
细胞凋亡的晚期检测方法介绍
细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法：1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-
细胞凋亡的检测方法综述5
4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理：磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine， PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中（图3）。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂
细胞凋亡的检测方法综述2
方法三（1）收集细胞悬液（106细胞），低速离心（1000r/min，离心5min）。（2）去上清，沉淀加0.4ml低渗缓冲液作用1h。（3）13 000r/min，离心10min，将上清转移至另一Eppendorf管中，加等量50％异丙醇和0.5mol/L NaCl混匀，置液氮5min。（4）12
细胞凋亡的早期检测方法介绍
1) PS（磷脂酰丝氨酸）在细胞外膜上的检测：PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生，可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV，一个钙依赖性的磷脂结合蛋白，能专一性的结合暴露在膜外侧的PS，再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测（悬浮细胞和贴壁细胞都
关于细胞凋亡的晚期检测介绍
细胞凋亡晚期中，核酸内切酶（某些Caspase的底物）在核小体之间剪切核DNA，产生大量长度在180-200 bp 的DNA片段。对于这一现象的检测通常有以下两种方法： 1) TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP n
关于细胞凋亡的mRNA检测介绍
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，
细胞凋亡的形态学检测
1 光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。2 荧光显微镜和
细胞凋亡的几种检测方法介绍
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核 呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜 不
常用细胞凋亡检测方法集锦
细胞凋亡的形态学检测1 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形
常用细胞凋亡检测方法（二）
二、磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） 磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，
常用细胞凋亡检测方法集锦
细胞凋亡的形态学检测1 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形