原生质体的细胞膜相关介绍
细胞膜又称质膜，是指细胞质与细胞壁相接触的一层生物膜，在光学显微镜下不可见，须采用高渗溶液处理后发生质壁分离时，能在是原生质体表面看到一层光滑的薄膜。细胞膜的主要功能包括选择透性和调节代谢等。选择透性表现在能阻止可溶性蛋白质和糖等多种有机物从细胞内渗出，同时又能使水、无机盐和其他的必需营养物质进入细胞，使细胞有一个稳定的内环境。细胞识别功能和细胞膜密不可分，对外界因素的识别过程主要通过与细胞膜上的特异受体结合而起作用，进而调节细胞内的多种代谢途径。......阅读全文
原生质体的收集、纯化与活力测定介绍
经酶解处理后，得到的混合物是一个由原生质体、细胞团与细胞碎片等组成的混合液，只有将杂质和酶液去掉，使原生质体纯化，才能进行培养。（1）收集：原生质体混合液用滤网（40-100 µm）去掉没有降解的细胞及组织，收集滤液。（2）洗涤：将网下物低速离心，去掉上清液,再加无酶液的CPW液悬起原生质体，再离心
原生质体内质网的基本介绍
内质网（endoplasmic reticulum）是细胞质内由膜组成的一系列片状的囊腔和管状的腔，彼此相通形成一个隔离细胞基质的管道系统。内质网可分粗糙内质网和光滑内质网两种类型，前者主要功能是合成输出蛋白质（即分泌蛋白），还能产生构成新膜的脂蛋白和初级溶酶体所含的酸性磷酸酶；后者主要功能是合
酵母原生质体制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 将酵母菌接种于YPD培养基（100 ml 到20 L），剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期（OD600≈1~5）。培养物在预称重的离心瓶中于4℃， 1 500 g 离
什么叫原生质体融合
原生质体是去掉细胞壁的植物细胞，原生质体融合就是植物细胞的融合。常用的方法有振动，电击，离心，聚乙二醇（PEG）处理等。先用纤维素酶和果胶酶处理原植物细胞，得到原生质体再在培养液中使用上述方法进行融合。这种方法的原理是细胞的流动性。当细胞核完成融合，并且重组细胞重生出细胞壁后，就表明杂种细胞已成功得
原生质体分离的分离方法
（1）机械法分离：缺点：产量极低；应用的材料受限制；操作极费力（2）酶法分离：Cocking最早开展这方面研究，克服了机械法分离的缺陷，可分为直接法和顺序法两种。酶法可在短时间内获得大量原生质体，缺点是：不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
原生质体培养技术的概念
原生质体（protoplast）：脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体，是一生物工程学概念。原生质体是由质膜所包围的具有生活力的”裸露细胞“。原生质体培养：对离体植物的原生质体进行培养，形成完整植株的培养技术。
简述原生质体融合的过程
将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 杂交时间：植物细胞杂交是从细胞融合开始，到培育成的新植物体结束。 a.原生质体制备：用酶解法去除细胞壁（
简述原生质体融合的原理
植物体细胞杂交（plant somatic hybridization）,又称原生质体融合（Protoplast fusion ）是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有
原生质体融合的技术分类
根据融合时细胞的完整程度，原生质体融合可分为两大类：对称融合（symmetric fusion）－即两个完整的细胞原生质体融合。非对称融合（asymmetric fusion）－利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合，它可以分为几种：用于细胞核或细胞质失活的方法分为物理和化学两大
PEG介导的原生质体转化
PEG介导的原生质体转化法是通过PEG的介导作用将遗传因子转入受体细胞原生质体中的一种方法，原生质体的制备与再生是转化的关键，此外CaCl2也是不可或缺的成分。目前，多数丝状真菌的转化以原生质体作为感受态细胞，在一定浓度的CaCl2和PEG等条件下和需转化的外源DNA混合完成的。因此，PEG介导的原
诱导原生质体融合的方法
诱导原生质体融合的过程中可用的方法有三种：物理法、化学法、生物法。将不同植物体细胞放在一起培养，必须通过一定的技术手段进行人工诱导。诱导方法有物理法和化学法两大类。物理法就是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合；化学法是用聚乙二醇等试剂作为诱导剂诱导细胞的原生质体融合，聚乙二醇简称为PEG；诱导
原生质体制备的菌体的预处理介绍
在使用脱壁酶处理前，先用化合物对菌体进行预处理，有利于原生质体制备。例如用乙二胺四乙酸（elhylene diamine tetraacetic acid，EDTA）、甘氨酸、青霉素等处理细菌，可使菌体的细胞壁对脱壁酶的敏感性增加。EDTA能与金属离子形成络合物，避免金属离子对酶的抑制作用而提高
原生质体融合的发展趋势
1、 诱导融合及杂种细胞的各种生理、生化、遗传机理的研 究2、电融合的程序化控制研究3、 各种类型原生质体（胞质体、核质体、细胞器）的制备技术研究4、 杂种细胞培养技术的程序化研究
影响原生质体融合技术的因素
首先，原生质体质量对细胞的融合起着至关重要的作用，高质量的原生质体是细胞融合的首要条件。其次，融合方法其三是融合参数，包括各种融合液都应选择适当。c.方法：物理方法（离心、振动、电激）、化学方法（聚乙二醇）。d.杂种细胞的筛选和培养：机械法、生理法、遗传法。e.杂种细胞的再生和鉴定：由愈伤组织再培养
原生质体融合的发展与研究
1960年，Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功；1970年，Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合；1971年，Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株；1972年，Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，这也是
原生质体分离常用的酶制剂
常用的酶制剂有：纤维素酶有Cellulase Onozuka R-10，Cellulase Onozuka RS，Cellulase。果胶酶有Pectolyase Y23，Macerozyme，Pectinase等。半纤维素酶有Rhozyme Hp-150，大多数植物分离原生质体时，纤维素酶浓度在1
关于原生质体黏菌的简介
原生质体黏菌的特色是没有单一细胞，而形成一整团的原生质。其生活史可分为二倍体时期与单倍体时期。 二倍体时期从两个单倍体细胞经由配子生殖形成合子开始，之后合子进行有丝分裂之后，会形成拥有许多细胞核，但是只有一团原生质的原生质团，称为变形体（plasmodium）。变形体发展成熟之后，会形成网状型
关于玉米原生质体的提取方法
一、酶解液的组成：1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8二、漂洗液的组成：山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5 mmol•L-1,硫酸铜0.01 µmol•L-1三、材料预处理： 取黄化叶片
植物原生质体的分离和融合
实验概要本实验介绍了原生质体分离的方法及利用PEG原生质体融合的原理和方法。实验原理植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降
原生质体融合的原理是什么？
原生质体融合即植物体细胞杂交，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 根据融合时细胞的完整程
原生质体的再生有哪些过程
原生质体再生过程是指分离、纯化的原生质体在适当的培养方法和良好的培养条件下，很快恢复细胞壁，再生细胞持续分裂形成细胞团，最后或通过愈伤组织或通过胚状体分化出完整植株的过程。
真菌原生质体（protoplast）制备技术
1． 灭菌物品： （1） 大滤纸: （2） 灭菌针筒（含脱脂棉和玻璃钎维） （3） 脱脂棉 （4） 离心管 （5） 无菌ddH2O （6） 0.6M MgSO4 （7） 培养基： A. 等渗培养基（RCM）：麦芽汁 1%，酵母膏 1%，蛋白胨 0.4%，葡
酵母原生质体制备实验
原生质体由原生质分化形成，具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等，而细菌如核糖体、拟核等。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 将酵母菌接种于YPD培养基（
什么是原生质体融合技术
原生质体融合(protoplast fusion)指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。意义：打破了微生物的种界界限，可实现远缘菌株的基因重组。可使遗传物质传递更为完整、获得更多基因重组的机会。可与其他育种方法相结合，如把常规诱变和
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天，将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养过夜（如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养）。2. 转化前一天晚上，从5 ml 过夜培养
阳性脂质体的相关介绍
阳性脂质体（cationic liposome）又称阳离子脂质体，正电荷脂质体（Positiveiy charged liposome）是一种本身带有正电荷的脂质囊泡。 1、阳性脂质体的组成 大多数阳性脂质体是由一种中性磷脂和一种或多种阳性成分组成。 中性磷脂成分：阳性脂质体中使用的中性磷脂
原生质的发展相关介绍
原生质是构成细胞的生活物质。1839年J．E．浦金野（Purkinje）把植物细胞中物质称为原生质。同年，冯·莫尔（von·Mohl）等指出，动物细胞中的肉样质和植物细胞中的原生质具有共性。他还观察到植物细胞中的原生质流动。1856年雷弟（Loydig）提出，细胞是含核的原生质小块。此后，对原生
原生质体分离的基本原则
原生质体分离的最基本原则是保证原生质体不受伤害及不损害它的再生能力。
原生质体培养技术的主要来源
主要来源：植物的叶片，根尖，花粉，愈伤组织细胞等。
原生质体培养技术的定义和特征
定义是指用特殊方法脱去了植物细胞壁的、裸露的、 有生活力的原生质团。没有细胞壁，但具有活细胞的一切特征。特征①无细胞壁障碍，可以方便地进行有关遗传操作，并可以对膜，细胞器等进行基础研究。②具有全能性，并能进行人工培养发育成完整植株。③原生质体适合进行诱导融合形成杂种细胞。