真菌原生质体（protoplast）制备技术
1． 灭菌物品： （1） 大滤纸: （2） 灭菌针筒（含脱脂棉和玻璃钎维） （3） 脱脂棉 （4） 离心管 （5） 无菌ddH2O （6） 0.6M MgSO4 （7） 培养基： A. 等渗培养基（RCM）：麦芽汁 1%，酵母膏 1%，蛋白胨 0.4%，葡萄糖 0.4%，pH自然，用0.6M蔗糖配制。 B. 破膜培养基：麦芽汁 1%，酵母膏 1%，蛋白胨 0.4%，葡萄糖 0.4%，pH自然，用水配制。也可以采用含有0.6M蔗糖的PDA作为等渗培养基，破膜培养基不加0.6M蔗糖即可。 （8） 溶壁酶酶液：1.5%，用0.6MMgSO4配制，过滤除菌； （9） 培养皿：根据样品个数 2． 制备方法： （1） 称取离心管重量并记录； （2） 用接种针挑出菌丝，并用灭菌双蒸水冲洗一次，然后用无菌的0.6M MgSO4冲洗两次，用灭菌的滤纸吸干，放入已......阅读全文
真菌原生质体（protoplast）制备技术
1． 灭菌物品： （1） 大滤纸: （2） 灭菌针筒（含脱脂棉和玻璃钎维） （3） 脱脂棉 （4） 离心管 （5） 无菌ddH2O （6） 0.6M MgSO4 （7） 培养基： A. 等渗培养基（RCM）：麦芽汁 1%，酵母膏 1%，蛋白胨 0.4%，葡
植物原生质体的制备
植物原生质体的制备可以用于：（1）由于其具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；（2）具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；（3）通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。实验方法原理去掉植物细胞
植物原生质体的制备
原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理
概述原生质体的制备
原生质体是植物或微生物细胞去掉壁以后的内含物。原生质体的制备主要是在高渗压溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的原生质体，它保持原细胞的一切活性。 制备原生质体首先需要选择供融合的两个亲株。要求亲株的性能稳定并带有遗传标记，一般以营养缺陷型和抗药性等遗传性状为
植物原生质体的制备
实验材料 油菜或菠菜或烟草试剂、试剂盒 氯化钙、蒸馏水、2蔗糖、酶解液仪器、耗材 显微镜、离心机、离心管、剪刀、镊子、吸管、培养皿、载玻片、盖玻片
酵母原生质体制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 将酵母菌接种于YPD培养基（100 ml 到20 L），剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期（OD600≈1~5）。培养物在预称重的离心瓶中于4℃， 1 500 g 离
植物学技术：植物原生质体的制备
原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理去
酵母原生质体制备实验
原生质体由原生质分化形成，具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等，而细菌如核糖体、拟核等。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 将酵母菌接种于YPD培养基（
拟南芥原生质体制备转化方法
实验概要本实验介绍了拟南芥原生质体制备转化操作流程。主要试剂1. 纤维素酶解液：试剂15ml酶液体系11-1.5﹪ Cellulase R10 (YaKult Honsha)0.225g干粉20.2-0.4﹪ Mecerozyme R10 (YaKult Honsha)0.045g干粉30.4M m
原生质体培养技术的概念
原生质体（protoplast）：脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体，是一生物工程学概念。原生质体是由质膜所包围的具有生活力的”裸露细胞“。原生质体培养：对离体植物的原生质体进行培养，形成完整植株的培养技术。
什么是原生质体融合技术
原生质体融合(protoplast fusion)指通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。意义：打破了微生物的种界界限，可实现远缘菌株的基因重组。可使遗传物质传递更为完整、获得更多基因重组的机会。可与其他育种方法相结合，如把常规诱变和
原生质体融合的技术分类
根据融合时细胞的完整程度，原生质体融合可分为两大类：对称融合（symmetric fusion）－即两个完整的细胞原生质体融合。非对称融合（asymmetric fusion）－利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合，它可以分为几种：用于细胞核或细胞质失活的方法分为物理和化学两大
G.灵芝原生质体的制备与再生
实验概要G.灵芝原生质体的制备与再生，对G.灵芝原生质体单核化十分重要。本实验主要介绍G.灵芝原生质体的制备与再生方法。灵芝有两种不同类型的菌丝（单倍体菌丝和二倍体菌丝）。利用原生质体再生的方法可以分离成一个单细胞，也许只含一套染色体。首先，我们把菌丝体消化成单个原生质体。然后，稀释成适当浓度的原生
为什么制备原生质体时全是细胞碎片
制备原生质体由于细胞壁的解除和壁压的消失将引起细胞破碎，因而在酶液、原生质体洗涤液及培养液中必须调整渗透压，维持细胞内外渗透压平衡，防止细胞涨破或过分收缩而破坏内部结构。渗透压稳定剂还可促进分离的原生质体再生细胞壁并继续分裂。
原生质体融合技术有哪些原理
多年来，都用有性杂交方式改良作物品种，但多数情况下，有性杂交种局限于栽培品种或是一些近缘野生种同栽培品种间的杂交。因此，种间隔离限制了作物改良上有性杂交的应用。20世纪70年代兴起的一项新技术——原生质体融合，是使分离下来的不同亲本的原生质体在人工控制条件下，像性细胞受精作用那样相互融合成一体。它使
原生质体融合技术有哪些原理
多年来，都用有性杂交方式改良作物品种，但多数情况下，有性杂交种局限于栽培品种或是一些近缘野生种同栽培品种间的杂交。因此，种间隔离限制了作物改良上有性杂交的应用。20世纪70年代兴起的一项新技术——原生质体融合，是使分离下来的不同亲本的原生质体在人工控制条件下，像性细胞受精作用那样相互融合成一体。它使
影响原生质体融合技术的因素
首先，原生质体质量对细胞的融合起着至关重要的作用，高质量的原生质体是细胞融合的首要条件。其次，融合方法其三是融合参数，包括各种融合液都应选择适当。c.方法：物理方法（离心、振动、电激）、化学方法（聚乙二醇）。d.杂种细胞的筛选和培养：机械法、生理法、遗传法。e.杂种细胞的再生和鉴定：由愈伤组织再培养
原生质体制备的菌体的预处理介绍
在使用脱壁酶处理前，先用化合物对菌体进行预处理，有利于原生质体制备。例如用乙二胺四乙酸（elhylene diamine tetraacetic acid，EDTA）、甘氨酸、青霉素等处理细菌，可使菌体的细胞壁对脱壁酶的敏感性增加。EDTA能与金属离子形成络合物，避免金属离子对酶的抑制作用而提高
原生质体制备的脱壁酶的简介
细菌和放线菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，可以用溶菌酶来水解细胞壁。 真菌细胞壁组成较复杂，常用蜗牛酶、纤维素酶、口一葡聚糖酶等来水解细胞壁。酶浓度过低，不利于原生质体的形成，酶浓度增加，原生质体的形成率亦增大，酶浓度过高，则导致原生质体再生率降低。所以，有必要兼顾原生质体形成率和再生率选择最适的
简述原生质体制备的时间和温度内容
反应温度 温度会影响酶的活性，温度升高，酶活性增加，温度过高，酶失活而影响原生质体的形成，一般温度在20~ 40℃。 [3] 酶解时间 原生质体的形成与酶解时间密切相关，酶解时间过短，原生质体形成不完全，会影响原生质体间的融合；酶解时间过长，原生质体的质膜也易受到损伤，从而影响原生质体的再
原生质体培养技术的主要来源
主要来源：植物的叶片，根尖，花粉，愈伤组织细胞等。
原生质体培养技术的定义和特征
定义是指用特殊方法脱去了植物细胞壁的、裸露的、 有生活力的原生质团。没有细胞壁，但具有活细胞的一切特征。特征①无细胞壁障碍，可以方便地进行有关遗传操作，并可以对膜，细胞器等进行基础研究。②具有全能性，并能进行人工培养发育成完整植株。③原生质体适合进行诱导融合形成杂种细胞。
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出
原生质体的概念
原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
原生质体的培养
原生质体（Protoplast）：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用 由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出微
植物原生质体融合技术的研究进展
01 — 原生质体制备 1.材料的选择及预处理 许多研究表明，在原生质体分离之前，先对植物材料进行预处理能够有效提高原生质体的游离效率，在同等材料用量下可以分离出较多的原生质体。柳玉晶等[1]的研究表明，在分离百合叶片原生质体前对其进行13%甘露醇预处理和黑暗处理能显著提高原生质体产量。
原生质体培养的意义
①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源；②植物原生质体是细胞融合工作的基础；③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料；④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。
原生质体融合的原理
两个具有不同遗传性状的细胞，采用适宜的水解酶溶解细胞壁后，在自发情况或融合剂作用下，两个原生质体接触，融合成为异核体，经过繁殖复制进一步核融合，形成杂合二倍体，再经过染色体交换产生重组体，达到基因重组的目的，并在适宜的条件下再生出细胞壁，对重组体进行生产性能、生理生化和遗传特性分析获得所需重组子。其
原生质体的应用介绍
由于没有细胞壁，原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选突变体5. 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究6. 用于分离细胞器和大分子7. 种质资源保存