发根农杆菌用于生产次生代谢产物
利用植物细胞培养技术生产次生代谢物真正实现商品化生产的还为数甚少,其主要原因在于植物细胞生长缓慢,有些还需要激素维持,次生代谢物含量太低,以及生产能力不稳定等,因而工业化生产的成本太高。发根能合成植物特征的次生代谢产物,而且其含量往往比植物的含量还高,尤其是它的稳定性和生长迅速的特点是工业化生产所梦寐以求的,因此发根培养技术将成为次生代谢产物生产的一条可靠和有效途径。国外在这方面的研究较为深入,大都从大规模生产及其生产工艺入手,国内这方面的研究起步较晚,但也取得了一些成就。 人参悬浮培养细胞及再生根中人参皂甙含量较高,但由于其生长需激素维持,因而不能作为药品上市,Yoshikawa和Furuya通过人参愈伤组织诱导出发根,在无外源激素的条件下,人参皂甙(Rb和Rg)含量高达干重的0.95%,高于再生根(0.91%)和天然栽培根(0.4%)。Shimomura等诱导紫草再生植株产生的发根在2L气升式反应器中生长迅速,每天可回......阅读全文
细菌代谢产物的观察实验
实验方法原理 由于各种细菌具有不同的酶,故分解糖类的能力不同,分解糖类后的终末产物亦不一致,例如肠道非致病菌一般均有乳糖酶,能分解乳糖产酸(乳酸,甲酸,乙酸等),尚有甲酸脱氢酶。能将甲酸进一步分解产生气体( CO2,H2),而肠道致病菌一般无乳糖酶,不能分解乳糖,因此,细菌的糖发酵试验,可用于鉴
农杆菌转化法培养抗虫棉
(1)图中A为基因表达载体;农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.根据农杆菌的这一特点,在构建基因表达载体时,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上.(2)①过程是将基因表达载
农杆菌转化法的原理
选择一种特制的空质粒载体(如PBI121质粒载体),其上要求含有T-DNA边界序列(此处可参见词条双元表达载体系统),在序列之间含有复制原点、抗性基因、GUS报告基因、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点(以上这些构成了一个T-DNA区)。先通过双酶切反应酶切空质粒载体和目的基因,再通过酶连反应连
转基因技术农杆菌介导转化方法的介绍
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒,其上有一段T-DNA,农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后,可将T-DNA插入到植物基因组中。 因此,农杆菌是一
大丽轮枝菌通过调控脂质代谢和次生代谢的机制
微生物,特别是土壤中的细菌和真菌,在生长发育过程中会分泌大量小分子化合物——次生代谢物,该物质和初生代谢物不同,其非微生物生长所必需,但对微生物适应外界环境具有重要意义,无论是应对非生物胁迫还是生物胁迫。大丽轮枝菌是棉花黄萎病的致病原,影响棉花纤维的产量和品质。在侵染宿主时,大丽轮枝菌会分泌大量
黏细菌的代谢产物有哪些?
次生代谢产物:这些是由黏细菌的次生代谢途径产生的化合物,如抗生素、抗真菌素、抗病毒素、抗肿瘤素等。例如,链霉菌属的一些种类可以产生链霉素、土霉素、红霉素等抗生素。 酶:黏细菌可以产生各种酶,如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等,这些酶在工业上有很多应用,如食品工业、制酒工业等。 生物表面活性剂:黏细
关于鞘磷脂的代谢产物介绍
鞘磷脂是细胞膜的主要组成成分,其代谢产物如神经酰胺(ceramide, Cer)、鞘氨醇(sphingosine, Sph)、1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate, S1P)是具有生物活性的信号分子,可作为第一和(或)第二信使调控细胞的生命活动,如细胞的生长、分化、衰老
细菌合成代谢产物及其意义
(1)热原质:大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。(2)毒素:◇内毒素:G-菌的脂多糖。◇外毒素:G+菌产生的蛋白质,毒性强且有高度的选择性。(3)侵袭性酶:有些细菌还能产生具有侵袭性的酶,如卵磷脂酶、透明质酸酶等。注:毒素和侵袭性酶在细菌致病性中甚为重要。(4)色素:◇水溶性色素◇脂溶性色素注:有
细菌的合成代谢产物及意义
细菌的合成代谢产物及意义是临床检验技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: (1)热原质:大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。注入人体或动物体内能引起发热反应,故称热原质。 注:热原质耐高温,121℃20min不被破坏,蒸馏法去除热原质较好。 (2)毒
毛状根创新发力,西瓜基因编辑效能显著跃升
中国农业科学院郑州果树研究所西瓜遗传育种与栽培创新团队使用了一种被称为“发根农杆菌”的微生物,帮助西瓜快速生出许多小小的毛状根,通过这些毛状根快速稳定地提升西瓜的基因编辑效率。相关研究成果日前发表在国际期刊《园艺植物杂志》上。基因编辑是一种对目的基因进行特定修饰的技术,被广泛应用于生物育种、基因功能
微生物发酵代谢产物途径中间产物的测定方法
先经分离纯化得到你测纯物质(≥95%),再进行质谱、核磁、同位素等的检测,打出图谱,然后再进行解谱,空间结构的话还需要一些的反应!很复杂!
关于香豆酸合成的现状及存在的问题分析介绍
获取大多数次生代谢产物的途径有两条,一是由植物自身进行提取,二是利用化学合成法进行合成。植物提取的方法受植物生长的季节及环境限制,提取过程得率低,不易进行大规模的工业化生产;而化学合成方法又存在着成本高、耗能高、易对环境产生污染等缺点。 近年来,利用微生物发酵生产植物次生代谢产物因其成本低、可
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。 【内容】:1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物遗传转化 【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。 【内容】:1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养
农杆菌介导的植物遗传转化
实验概要以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基:LB培养基100ml;MS 盐溶液(pH 7.0)100ml,
农杆菌介导的遗传转化程序
实验概要农杆菌侵染实验实验步骤(1) 农杆菌菌液的制备 将农杆菌接种于附加50mg/L Km、50mg/L Sm、50mg/L Rif的YEB固体培养基上,28℃暗培养,至长出单菌落。用接菌环挑取单菌落,接种在5mL含相应抗生素的YEB液体培养基中,于28℃,200r/min 培养过夜。待
农杆菌的生存形状相关介绍
根癌农杆菌生活在土壤,特别是耕种过的田地里,因为经过耕种的土壤疏松,适宜根癌农杆菌生长。根癌农杆菌的菌体为棒状,有两三个微米长,靠几根鞭毛运动,鞭毛一般生在侧边。用显微镜放大到1000倍时,人们就能把它看得很清楚了。 在许多双子叶植物靠近地面的根茎交界处,根癌农杆菌能诱发一种帽状肿瘤,人们称之
农杆菌介导法的过程介绍
根癌农杆菌的Ti质粒上有一段转移DNA(T-DNA),具有向植物细胞传递外源基因的能力,而细菌本身并不进入受体细胞。农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应,主要包括:①受伤的植物细胞为修复创伤部位,释放一些糖类、酚类等信号分子。 ②在信号分子的诱导下,农杆菌向受伤组织集中,并吸附在细胞表面。
自然界中的转基因
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起,使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
自然界中的转基因现象
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起,使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
自然界中的转基因现象
转基因现象在自然界广泛存在。植物界的异花授粉、天然杂交以及农杆菌天然转基因系统等等。异花授粉植物的群体是来源不同、遗传性不同的两性细胞结合而产生异质结合子所繁衍的后代。异花授粉普遍发生于高等植物所有的科。天然杂种优势的应用是把已选出的个体或系统在隔离的田间种在一起,使之相互自由进行杂交。一般应用于紫
藻类及其代谢产物对水质的影响
受城市污水排放和农田径流的影响,大量氮、磷等营养成分排入水体,致使水体富营养化,藻类过量繁殖。特别是我国南方地区的一些湖泊和水库水,由于阳光充足、温度较高,藻类成为主要问题。 水中藻类严重影响给水处理效果,主要表现在以下几方面:藻类一般带负电,具有较高的稳定性,难于混凝;藻类比重小,沉
细菌的分解代谢产物有哪些
细菌除能分解糖和蛋白质外,对一些有机物和无机物也可分解利用。各种细菌产生的酶不同,其代谢的基质不同,代谢的产物也不一样。(1)对其他有机物的分解:如变形杆菌具有尿素酶,可以水解尿素,产生氨。乙型副伤寒沙门菌和变形杆菌都具有脱硫氢基作用,使含硫氨基酸(胱氨酸)分解成氨和H2S。(2)对其他无机物的分解
计算机辅助鉴定药物代谢产物
随着分析仪器的发展,单个代谢样品中即可检测到成千甚至上万个化合物,如此庞大的数据亟需无监督的自动化鉴定过程。计算机的引入有效解决了大数据处理难题,同时加速了无标准谱图化合物的解析过程,在一定程度上实现了药物代谢产物的自动化鉴定。计算机辅助鉴定方法多种多样,根据其工作原理,现分为化学结构数据库基础上的
关于农杆菌介导法的特点介绍
转基因技术的飞速发展为生物定向改良和分子育种提供了一种较佳的方法,并使其成为基因工程和育种的最有效途径,应用较广泛的转基因技术有农杆菌介导法、花粉通道法、显微注射法、基因枪法、离子束介导法等等,其中农杆菌介导法以其费用低、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少、转育周期短及能转化较大片段等独特优点而
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒 利福平卡那霉素仪器、耗材 MG L 培养基实验步骤 1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀
梨树农杆菌转化体系的建立
实验概要 以西洋梨丰产为试材建立农杆菌转化体系,将抗真菌γ-硫堇蛋白Rs-afp1基因转入梨离体叶片获得了抗病的转化植株。 主要试剂1. YEB(5.0g/L牛肉胨,5.0g/LDifco Bacto提取物,1.0g/L酵母提取物,5.0g/L蔗糖,15g/L琼脂,50mg/L卡那霉素,pH值
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,调到合适的
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料:植物凝胶 pBract 质粒
农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法
制备转化用的农杆菌菌液准备:1.灭菌 试管 400毫升细长烧杯2瓶,离心瓶4-6个(250ml)。2.试剂:YEP 1200ml(每瓶300ml 共4瓶)+Kan 1;1000,Rif1:500。 1/2MS+2%蔗糖(灭菌115度20分钟),Silwet在-20℃贮存。3.步骤:共转化农杆菌: