微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的实验步骤

实验前准备:4个培养皿,2支移液管,1支涂布棒,并将培养皿包好灭菌,取一定的蒸馏水灭菌制成无菌水.1、配制营养琼脂培养基:称取营养琼脂9.6g,加入300ml蒸馏水,加热煮沸后将培养基导入锥形瓶,然后包扎灭菌(121°C,20min).2、倒平板:在无菌环境操作下,将上述培养基倒入4个平板,并编号1,2,3,4.3、制菌悬液:用5ml无菌移液管在无菌操作下,吸取3ml无菌水到菌种斜面,用接种环轻刮下菌苔,捣碎,塞上棉塞,振荡片刻.4、将抗生素稀释成10-3,10-4,10-5,10-6四种不同稀释度的梯度液.5、取直径1cm圆形滤纸若干,取4个圆形滤纸分别放入10-3,10-4,10-5,10-6的抗生素溶液中浸泡一会.6、待平板凝固后接种,各取0.2ml菌悬液倒入平板中,用涂布棒抹匀.7、在1,2,3,4,号已接种的平板中分别放入4个浸泡在10-3,10-4,10-5,10-6抗生素溶液中的滤纸片,并注意个纸片间的距离应较大.......阅读全文

微生物实验纸片法测定测定抗生素效价方法的实验步骤

实验前准备:4个培养皿,2支移液管,1支涂布棒,并将培养皿包好灭菌,取一定的蒸馏水灭菌制成无菌水.1、配制营养琼脂培养基:称取营养琼脂9.6g,加入300ml蒸馏水,加热煮沸后将培养基导入锥形瓶,然后包扎灭菌(121°C,20min).2、倒平板:在无菌环境操作下,将上述培养基倒入4个平板,并编号1

管碟法测定抗生素效价

  一、目的和要求   1、了解管碟法的原理。   2、掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。 二、原理   抗生素的生物检定是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的衡量标准,具有与应用原理相一致、用量少和灵敏度高等优点。管碟法是琼脂  扩散法中的一种,已被各国药典广泛采用,作为法定的抗生素

抗生素效价生物测定实验——管碟法

实验方法原理管碟法是扩散法中的一种,是将已知浓度的标准抗生素溶液与未知浓度的样品溶液分别加到一种标准的不锈钢小管(即牛津小杯)中,在含有敏感试验菌的琼脂表面进行扩散渗透。比较两者对被试菌的抑制作用,测量出抑菌圈的大小,以计算抗生素的浓度。在一定的浓度范围内,抗生素的浓度与抑菌圈直径在双周半对数表上(

关于抗生素效价的实验方法介绍

  (1)抗生素效价实验—取无菌平皿,加入20ml底层培养基,凝固后作为底层。  (2)抗生素效价实验—用灭菌生理盐水将短小芽胞杆菌的芽胞悬液稀释至一定浓度以能得到清晰的抑菌圈,且标准品高浓度所得抑菌圈直径在18~22mm为基准。用无菌吸管吸取1ml芽胞悬液,加入到200ml恒温于50℃的上层培养基

两种测定抗体效价方法的实验原理和操作步骤

酶联免疫吸附实验法一、实验目的1. 深入了解ELISA法测定抗体效价的原理。2. 掌握ELISA法测定单克隆抗体效价的方法。二、实验原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上,形成酶

噬菌体效价的测定实验

实验方法原理噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法,一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上,噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑,因此,能进行噬菌体的计数,但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100%(—般偏低,因为有少数活噬菌体可能未引起感染),所以为了

抗生素效价生物测定

实验方法原理 管碟法是扩散法中的一种,是将已知浓度的标准抗生素溶液与未知浓度的样品溶液分别加到一种标准的不锈钢小管(即牛津小杯)中,在含有敏感试验菌的琼脂表面进行扩散渗透。比较两者对被试菌的抑制作用,测量出抑菌圈的大小,以计算抗生素的浓度。在一定的浓度范围内,抗生素的浓度与抑菌圈直径在双周半对数表上

简述抗生素效价实验的材料和仪器

  (1)抗生素效价—细菌:短小芽胞杆菌[CMCC(B)63202]的芽胞悬液。  (2)抗生素效价—培养基:效价检定用培养基(上层、底层)。  (3)抗生素效价—抗生素:抗生素检品及标准品(高剂量、低剂量,高剂量与低剂量之比为2:1)。  (4)抗生素效价—试剂与器材:灭菌生理盐水,无菌平皿,牛津

纸片法和管碟法测定微生物对抗菌药物敏感性试验的原理

纸片法和管碟法测定微生物对抗菌药物敏感性试验的原理:将菌制成菌悬液用无菌棉签蘸取菌液在管壁上挤去多余菌液,涂布整个M2H平板表面,反复3次,每次将平板旋转60度,保证涂布均匀,35℃培养后菌落呈半融合状态,否则影响药敏结果。纸片取出后须放室温10min后方可打开,否则空气中的水份冷凝在纸片上易潮解,

抗生素效价测定的方法—牛津杯法的简介

  牛津杯法,是抗生素效价测定的一种方法,通常可以分为二剂量法和三剂量法。  将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。此外,将融化的PDA培养基冷却到50℃左右混入试验菌,将混有菌的培养基5 ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。  以无菌操作在培养基表面

抗生素效价测定的方法有哪两类

抗生素的效价常采用微生物学方法测定,它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法,如管碟法(cylinderplatemethod)。管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。管碟法的基本原理是在含有高度敏

双向免疫扩散法测定抗血清效价实验—双向免疫扩散法

双向免疫扩散法可用于:(1)诊断疾病;(2)测定抗体的效价。实验方法原理将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此

ELISA测定抗体效价方法

我用的是间接ELISA,以下copy自我的毕业论文:将抗原用包被液稀释至约10 ?g/mL;分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释,稀释梯度从1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450),计算阳

芽鞘伸长法测定生长素类物质的浓度和效价实验

实验方法原理生长素(吲哚乙酸)能促进燕麦胚芽鞘细胞的伸长。在切去顶端的芽鞘切段断绝了生长素来源的情况下,切段的伸长在一定范围内与外加生长素浓度的对数呈线性关系,因此,可以用一系列已知浓度的生长素溶液培养芽鞘切段,绘制成生长素浓度与芽鞘伸长的关系曲线,以鉴定末知样品的生长素含量。实验材料小麦燕麦种子试

芽鞘伸长法测定生长素类物质的浓度和效价实验

实验方法原理 生长素(吲哚乙酸)能促进燕麦胚芽鞘细胞的伸长。在切去顶端的芽鞘切段断绝了生长素来源的情况下,切段的伸长在一定范围内与外加生长素浓度的对数呈线性关系,因此,可以用一系列已知浓度的生长素溶液培养芽鞘切段,绘制成生长素浓度与芽鞘伸长的关系曲线,以鉴定末知样品的生长素含量。实验材料 小麦燕麦种

芽鞘伸长法测定生长素类物质的浓度和效价实验

实验方法原理:生长素(吲哚乙酸)能促进燕麦胚芽鞘细胞的伸长。在切去顶端的芽鞘切段断绝了生长素来源的情况下,切段的伸长在一定范围内与外加生长素浓度的对数呈线性关系,因此,可以用一系列已知浓度的生长素溶液培养芽鞘切段,绘制成生长素浓度与芽鞘伸长的关系曲线,以鉴定末知样品的生长素含量。实验材料:小麦、燕麦

关于抗生素效价的基本方法介绍

  抗生素的效价常采用微生物学方法测定,它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法,如管碟法(cylinder plate method)。管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。管碟法的基本原理是在含

肝素钙的效价测定方法

照肝素钠项下的方法测定抗Ⅱa因子效价应为标示值的90%~110%,抗Xa因子效价与抗Ⅱa因子的效价比应符合规定。

抑肽酶的效价测定方法

底物溶液取N-苯甲酰-L精氨酸乙酯盐酸盐171.3mg,加水溶解并稀释至25ml。临用新制。胰蛋白酶溶液取胰蛋白酶对照品适量,精密称定,加盐酸滴定液(0.01mol/L)溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.8单位(每1ml中约含1mg)的溶液,临用新制并置冰浴中。胰蛋白酶稀释液精密量取胰蛋白酶溶液1

用萝卜子叶增重法测定细胞分裂素类物质浓度或效价实验

实验方法原理细胞分裂素有促进萝卜子叶增大的效应,其主要原因是促进细胞分裂和扩大。在一定浓度范围内(6-BA激动素为0.05到50pp M ),子叶增重与浓度成线性关系。实验材料萝卜种子试剂、试剂盒次氯酸钠溶液仪器、耗材培养皿滤纸镊子搪瓷盘移液管实验步骤一、材料与设备大小均匀的萝卜种子9cm 培养皿,

抗生素效价测定的牛津杯法的操作方法介绍

  将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。此外,将融化的PDA培养基冷却到50℃左右混入试验菌,将混有菌的培养基5 ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。  以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10 mm的圆形小管,管的两

双向免疫扩散法测定抗血清效价

实验方法原理 将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。此外,根据沉淀融合的情况,还可以

常用抗生素的理论效价

链霉素碱 1000单位/mg链霉素硫酸盐 798单位/mg土霉素碱 1000单位/mg土霉素碱(含二分子结晶水) 927单位/mg土霉素盐酸盐 927单位/mg红霉素碱 1000单位/mg红霉素碱(含二分子结晶水) 953单位/mg红霉素乳糖酸盐 672单位/mg金霉素盐酸盐 1000单位/mg四环

胰激肽原酶的效价测定方法

酶活力照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1ml中约含10单位的溶液。标准品溶液取胰激肽原酶标准品,按标示单位,加上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1m中含10单位的溶液。底物

垂体后叶粉的效价测定方法

升压素照升压素生物测定法(通则1205)测定,即得。缩宫素照缩宫素生物测定法(通则1210)测定,并将测得结果与升压素效价进行比较,即得。

替考拉宁的效价测定方法

效价测定取本品适量,精密称定,用灭菌水溶解并定量稀释制成每1ml中约含1000单位的溶液,照抗生素微生物检定法(通则1201第一法)测定。1000替考拉宁单位相当于lng的替考拉宁。

肝素钠的效价测定方法

抗Xa因子照肝素生物测定法(通则208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法),即得抗Ⅱa因子照肝素生物测定法(通则1208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法),即得。抗Ⅱa因子效价应为标示值的90%~110%,抗Xa因子效价与抗Ⅱa因子的效价比应符合规定。

肝素钠的效价测定方法

抗Xa因子照肝素生物测定法(通则208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法),即得抗Ⅱa因子照肝素生物测定法(通则1208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效价测定法),即得。抗Ⅱa因子效价应为标示值的90%~110%,抗Xa因子效价与抗Ⅱa因子的效价比应符合规定。

尿促性素的效价测定方法

卵泡刺激素照卵泡刺激素生物测定法通则1216)测定,应符合规定,测定的结果应为标示值的%~125%黄体生成素照黄体生成素生物测定法(通则1217)测定,应符合规定,测定的结果应为标示值的80%~125%。

乌司他丁的效价测定方法

照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.2mol/L三乙醇胺缓冲液(pH7.8)使溶解并定量稀释制成每1ml中约含50单位的溶液。胰蛋白酶溶液、底物溶液、标准品溶液与测定法见乌司他丁溶液效价测定中效价项下。