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纯化细胞的方法较多，一般有差速贴壁，化学药物法，梯度离心法，免疫亲和吸附法。以后者纯化效果最好，其纯度可达99%以上，是目前普遍采用的方法之一。但是此法步骤较为繁琐，费用高，同时细胞经过反复清洗，活性下降，于是给下一步培养带来了一定的困难。 主要影响纯化的是成纤维细胞，在培养24-48h加入阿糖胞苷，可以有效抑制和杀灭进入分裂期的成纤维细胞，但OECs也受到一定程度的抑制。使用BPE来促进OECs增殖，第8-16d得到生长状态良好的OECs，纯度可达80%。OECs细胞表面具有特异性的低亲和神经营养因子受体（L-NGFR），可以特异性的与LNGFR抗体结合，为免疫纯化提供了基础，免疫纯化后纯度可以提高到98%。为进一步的实验研究奠定了基础。......阅读全文
纯化细胞的方法较多，一般有差速贴壁，化学药物法，梯度离心法，免疫亲和吸附法。以后者纯化效果最好，其纯度可达99%以上，是目前普遍采用的方法之一。但是此法步骤较为繁琐，费用高，同时细胞经过反复清洗，活性下降，于是给下一步培养带来了一定的困难。 主要影响纯化的是成纤维细胞，在培养24-48h加入阿
嗅鞘细胞（olfactoryensheathingcells，OECs）是在功能上介于施旺细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊的胶质细胞,具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘作用等。为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移的特性，使其成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。 嗅鞘细胞是目前所
OECs表达胶质纤维酸性蛋白（GFAP），在血管壁形成终足，以及参与形成胶质界膜，此界膜大致勾勒出了嗅神经轴突与嗅球颗粒层嗅小球的交界线，OECs在免疫细胞化学超微结构特征以及与轴突的功能联系方面与星形胶质细胞存在明显不同。OECs对神经生长因子受体（P75NGR）Laminin细胞粘附分子L1
嗅鞘细胞分离有传统分离法：嗅球置于少量ACSF（人工脑脊液）中(4℃冰浴)，在解剖显微镜下，将位于嗅球最外层的嗅神经层、嗅神经及包被的脑膜轻轻剥下，用ACSF洗2次，组织块用0.125%胰酶(Sigma)37℃消化20min，经胰酶消化的组织块再移至完全培养液(DMEM：胎牛血清=9：1美国GI
OECs和嗅上皮均来源于嗅基板，而嗅球与其它中枢神经系统结构均起源于神经管，因此在胚胎发育过程中嗅上皮与嗅球发育是两种不同的方向，原始嗅觉神经元伴随大量基板细胞从嗅上皮传出轴突向端脑泡方向迁移，其中嗅鞘细胞引导嗅神经轴突到达端脑泡，这些细胞形成早期的嗅球，接着嗅球发生外翻，迁移细胞覆在其表面形成
实验材料 L-多聚赖氨酸 I型胶原蛋白酶
实验材料 L-多聚赖氨酸I型胶原蛋白酶HBSSDMEM FBSDMEM BS单克隆抗体第二抗体Sprague-Dawley大鼠 试剂、试剂盒 Leibowitz L-15 培养液70%乙醇 仪器、耗材 培养瓶培养皿盖玻片Petri培养皿15ml带盖聚丙烯锥形管7号弯镊和直镊带盖圆底聚苯乙稀管弯
实验材料L-多聚赖氨酸I型胶原蛋白酶HBSSDMEM FBSDMEM BS单克隆抗体第二抗体Sprague-Dawley大鼠试剂、试剂盒Leibowitz L-15 培养液70%乙醇仪器、耗材培养瓶培养皿盖玻片Petri培养皿15ml带盖聚丙烯锥形管7号弯镊和直镊带盖圆底聚苯乙稀管弯解剖剪手术刀切除
从第一次嗅鞘细胞的生物学文章发表已经有二十余年历史了。1994年RamonCueto和Nieto-Sampedrol发表了第一篇关于嗅鞘细胞有助于感觉轴突长入脊神经切断术的文章，在此之前Doucette实验室发表了嗅鞘细胞移植人脑后存活的文章，Raisman小组发现皮质脊髓束损伤后行嗅鞘细胞移植
基本方案实验方法原理嗅鞘细胞是在功能上介于施万细胞和少突胶质细胞之间的一种特殊胶质细胞，是决定嗅神经元轴突终生再生的关键因素。它具有神经营养、抑制胶质增生、瘢痕形成、成鞘等作用，为轴突生长提供了适宜的微环境及较强的迁移特性，已成为促进中枢神经再生的理想候选细胞之一。基于其与成纤维细胞贴壁能力的不同，