T细胞及B细胞的分离
将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的多少,视分离细胞的多少而定。......阅读全文
T细胞和B细胞活化的双信号分别是什么
T细胞:TCR-抗原肽MHC分子复合物通过CD3传递第一信号,CD28和APC上的B7结合传递第二信号。B细胞:BCR-抗原肽通过lgα和lgβ传递第一信号,CD40/CD40L传递第二信号。B细胞表面有多种膜表面分子,籍以识别抗原、 与免疫细胞和免疫分子相互作用,也是分离和鉴别B细胞的重要依据。B
小鼠CD4+T细胞外泌体分离及鉴定
目的:探讨CD4+T细胞是否具有分泌外泌体的能力,以及CD4+T细胞外泌体参与炎症及肿瘤免疫过程的可能。 方法:应用断颈处死的方法取出小鼠的脾脏,用磁珠分选的方法从小鼠脾脏细胞中分选出CD4+T细胞,并尝试从培养基上清液中提取CD4+T细胞的外泌体,在透射电镜下观察,后用PCR技术分
小鼠CD4+T细胞外泌体分离及鉴定
目的:探讨CD4+T细胞是否具有分泌外泌体的能力,以及CD4+T细胞外泌体参与炎症及肿瘤免疫过程的可能。方法:应用断颈处死的方法取出小鼠的脾脏,用磁珠分选的方法从小鼠脾脏细胞中分选出CD4+T细胞,并尝试从培养基上清液中提取CD4+T细胞的外泌体,在透射电镜下观察,后用PCR技术分析miR-23a、
研究揭示2019nCoV的潜在T细胞和B细胞表位
截至2020年2月26日,2019-nCoV已经感染了超过26个国家的超过77000人,夺走了超过2000条生命。2019-nCoV是一种引起COVID-19的新型冠状病毒,与SARS-CoV有很高的相似性。目前还没有针对2019-nCoV或任何形式的冠状病毒的疫苗被批准。 图片来源:bioR
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位实验步骤 基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂材 料肽或蛋白质抗原目的抗原的单克隆抗体(M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白实验步骤基 本 方 案 使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白材 料家兔肽-载体的连接体(单 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 剂(F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐剂1 . 收 集 血 样(
人类T细胞白血病与其病毒的分离
1980年美国国立癌症研究所的Gallo实验室首先报道从蕈样霉菌病(mycosisfun-goides)病人(C、R、)的淋巴结和外周血液在体外建立了HUT102和CTCL-3细胞系。1981年又报道从1例皮肤型T细胞白血病(Sezary综合征)病人(M.B.)的外周血液建成了CTCL-2细胞系
T淋巴细胞的分离技术尼龙毛法
(一)原理 混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛( Nylon Wool Fiber)。2.烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。3.装填尼龙毛柱,一次性注射
T淋巴细胞分离技术的注意事项
1.此种分离法,T淋巴细胞也常有一部分被吸附,吸附的多少与尼龙毛的质量有关,与装柱的松紧也有关系。 2.此法的T淋巴细胞的回收率约20%~30%。 3.用过的尼龙毛可回收,以盐水洗涤,然后浸入0.1Mol/L的HCl中过夜,然后再同前法清洗。
T和B细胞联合免疫缺陷病的临床特征
因T和B细胞发育异常引起体液和细胞免疫均缺陷,约占原发性免疫缺陷病的10%~25%。其中因骨髓造血干细胞缺损所致的严重联合免疫缺陷病最为典型和严重。
评价疫苗有效性的金标准T细胞和B细胞ELISPOT技术
事实:能使人生病的细菌、病毒等病原体几乎无处不在,我们的身体无时无刻不处在病原体的包围之中,但是通常情况下,我们并没有感到不适。这是因为我们有着强大的免疫系统。 人体的免疫系统是一个复杂又神奇的存在,既能帮助人体有效抵御病原体的侵害,又能维持平衡不攻击正常的人体细胞,人体免疫包括非特异性免疫和特异
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约 5~6cm。此柱可分离约2
用尼龙毛法分离B细胞方法步骤
一、尼龙毛柱的制备1.取直接3D,长度约10cm的尼龙毛,用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl,置37℃烘干备用。2.称取50mg尼龙毛,均匀分散,置Hanks液中浸泡。取1ml注射器,出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中,排净空气,柱高约 5~6cm。此柱可分离约2
外周血B细胞的检测_活性B细胞检测
实验步骤展开
细胞毒性T细胞的细胞试验
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床
细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测
基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H
T细胞尼龙毛柱分离法的操作使用
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所
T细胞受体结合的方向决定T细胞免疫
最近的一项研究发现,T细胞需要以特定的方向识别病原体,以接收到强大的激活信号。 这项由犹他大学、新加坡国立大学、新南威尔士大学和莫纳什大学的研究人员合作完成的研究成果发表在《科学》杂志上,题为“Canonical T-cell receptor docking on peptide–MHC i
浅析-γδ-T-细胞——T细胞中的“特种部队”
Hello, 小伙伴们大家下午好啊~又到了一周一度涨知识时间了哈~ 要说目前最火热的细胞疗法,都知道非CAR-T莫属,而这个T,指的是αβ T细胞,那么问题来了,另一类T细胞-γδ T作何用处呢?今天呢,咱们就来好好扒一扒这类不太热门的T细胞。 γδ T细胞简介
将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞研究(三)
重编程的机制研究:Hoxb5将B细胞转化为ETP那么,B细胞重编程为T细胞过程中Hoxb5是从哪开始起作用的呢?研究人员进一步探索重编程中否将pro-pre-B细胞直接重编程为ETP(iETP, early T cell progenitors )。他们分析了retro-Hoxb5小鼠中BM和胸
将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞研究(一)
来一个关于B细胞重新编程为T细胞的精彩故事^_^且听我慢慢讲来[1] ……目前已经有很多研究证明通过特定转录因子的表达可以将多能或多能细胞导向分化成特定类型的细胞或从一个谱系转变为另一个谱系。比如Gata1的表达将单核细胞前体转化为红系-巨核细胞和嗜酸性粒细胞[2-4] ,Cebpα将B细胞转化为巨
疫苗开发新策略!记忆辅助T细胞让记忆B细胞持续存在
在一项新的研究中,来自瑞士巴塞尔大学的研究人员发现这些细胞需要其他记忆细胞的帮助才能有效地保护身体免受慢性感染病毒的侵害。这是疫苗设计中的一个重要发现。相关研究结果近期发表在PNAS期刊上。 像HIV或丙肝病毒(HCV)这样的病毒可以摧毁免疫系统。迄今为止,针对这些慢性感染开发疫苗的一种方法是
将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞研究(二)
Hoxb5诱导的T细胞在功能上等同于野生型T细胞好了,我们已经确定了Hoxb5确实在B细胞向T细胞转化的过程中起关键的作用,那么我们得到再生的T细胞是否是有功能的呢?带着这一问题,我们看看科研人员又做了哪些工作?为了评估成熟再生的T细胞(iT)的功能,研究者将retro-Hoxb5 pro-pr
磁-珠-法-分-离T-细-胞-和-B-细胞
实验步骤基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 统 进行 总 T 细胞、 CD4 +细 胞 或 CD8+T细胞的自动分离材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 统 进 行 B 细胞的自动分选材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液MACS 缓冲液CD45R (B2
哮喘大鼠模型的制作和T淋巴细胞的分离
大鼠哮喘模型的分组及建立实验大鼠分组:根据随机化原则,将24只雄性Wistar大鼠(体重190-250g) 按体重编号,采取随机排列表法分为以下4组:(1)正常对照组、(2)哮喘一周组(激发一周)、(3)哮喘两周组(激发二周)和(4)哮喘四周组(激发四周及以上)。哮喘模型的建立:第一天三组哮喘组大鼠
从PBMC中进一步分离T.B淋巴细胞可采用哪些方法
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。如果精确的话得用专门仪器了,要后续培养干扰小建议磁珠分,这个操作比较简单,对设备要求不高,如果是要纯度高推荐流式细胞术了,这个需要有分选的仪器,一般分析仪器只能分析比例。
从PBMC中进一步分离T.B淋巴细胞可采用哪些方法
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。如果精确的话得用专门仪器了,要后续培养干扰小建议磁珠分,这个操作比较简单,对设备要求不高,如果是要纯度高推荐流式细胞术了,这个需要有分选的仪器,一般分析仪器只能分析比例。
T细胞的起源
所有的T细胞都来源于造血干细胞(HSC),造血干细胞之后会分化为多能祖细胞(MPP),多能祖细胞又会分化为共同淋巴祖细胞(CLP),CLP接下来只有三种分化路径,即T细胞、B细胞和NK细胞。 那些分化为T细胞的CLP将会随着血流到达胸腺,并成为早期胸腺祖细胞(ETP),现在这些细胞既不表达CD也不表
T细胞的分类
T细胞根据功能的差异被分为几个亚型。虽然在胸腺中就分化出了CD+和CD+两者,但是在外周T细胞还会发生进一步的分化。常规适应性T细胞辅助CD+ T细胞辅助T细胞(TH细胞)对其他淋巴细胞的活动起辅助作用,包括B细胞向浆细胞和记忆B细胞的发育,以及细胞毒性T细胞和巨噬细胞的激活。它们也被称为CD+ T
T细胞的定义
T细胞(英语:T cell、T lymphocyte)是淋巴细胞的一种,在免疫反应中扮演着重要的角色。T是胸腺(thymus)的英文缩写。T细胞在骨髓被制造出来之后,在胸腺内进行“新兵训练”分化成熟为不同亚型的效应T细胞,成熟后就移居于周围淋巴组织中开始工作。T细胞膜表面分子有两大类:T细胞受体(T