蛋白质分离提纯方法
1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。3、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。4、聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。......阅读全文
分离植物总RNA
实验概要认识真核生物RNA的组成及分离的原理;学习RNA提取过程中抑制RNA酶活性的方法。实验原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一个典型的真核细胞约含有10-5~10-6mg的RNA,其中80-85%为rRNA,其余15-20%主要由各种低分子量RNA组成(如tRNA、核内小分子
解析多肽分离实验
CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器(Beckman) 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作指南进行同样的分离。实验材料多肽混合物试剂、试剂盒0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(p
色谱分离条件选择
一. 减小柱内展宽,提高柱效 l. 固定相:①粒度小,均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力;②改进结构,尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体,减少滞留流动相传质阻力。 2. 流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm,减少传质阻力。
膜分离技术解析
膜分离是利用薄膜以分离水溶液中某些物质的方法的统称。废水处理中目前常用的方法有渗析法、电渗析法、反渗透法及超滤法等,其基本特性如表5-2。膜分离技术有以下共同特点:①分离过程不发生相变,因此能量转化效率高;②分离在常温下进行,特别适合于热敏性物料,如果汁、酶、药物等的分离、分级和浓缩;③适用范围广,
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
离心分离图解
离心分离图解
浅谈膜分离技术
浅谈膜分离技术 让压缩空气通过中空纤维膜,当空气通过膜的时候,空气中的氧气,二氧化碳,一氧化碳和水蒸汽 会通过中空纤维膜管道上的小孔,进而排到大气中去。在膜的出口,大尺寸的氮气分子和惰性气体氩气都收集起来,输送到应用设备。这种氮气分离提取技术简单有效,无需任何移动部件。分离提取出来的氮气zui高
膜分离技术简介
一、膜分离的概念: 膜分离是利用膜的选择性,以膜两侧存在的能量差作为推动力,将流体组分进行分离的方法。膜分离的核心是膜,膜必须是半透膜,即能透过一种物质,而阻碍另一种物质。膜分离常与离心机分离技术结合使用。二、膜的概念: 把流体分隔成两部分的一层薄的凝聚相物称为膜。
色谱柱分离经验
色谱柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的
胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活
细胞分离的定义
中文名称细胞分离英文名称cell separation定 义将组织材料分散制成细胞悬液后,从中获取目的细胞的过程。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
离子色谱分离原理
离子色谱是液相色谱的一种,又称离子色谱(HPIC)或现代离子色谱,与传统离子交换色谱柱色谱的主要是树脂具有很高的交联度和较低的交换容量,进样体积很小,用柱塞泵输送淋洗液通常对淋出液进行在线自动连续电导检测。分离的原理是基于离子交换树脂上可离解的离子,与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间,进行的可逆交
膜分离技术简介
一、膜分离的概念:膜分离是利用膜的选择性,以膜两侧存在的能量差作为推动力,将流体组分进行分离的方法。膜分离的核心是膜,膜必须是半透膜,即能透过一种物质,而阻碍另一种物质。膜分离常与离心机分离技术结合使用。二、膜的概念:把流体分隔成两部分的一层薄的凝聚相物称为膜。膜是均一的一相,或由两相以上凝聚物构成
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
巨噬细胞的分离
一、从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。2.如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从这一步
mRNA-的分离实验
oligo(dT)-纤维素亲和层析法 实验方法原理 哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以
蛋白分离纯化步骤
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有
色谱分离条件选择
一. 减小柱内展宽,提高柱效l. 固定相:①粒度小,均匀,以减小涡流扩散和流动相传质阻力;②改进结构,尽可能采用大孔径和浅孔道的表面多孔型载体或全多孔微粒型载体,减少滞留流动相传质阻力。2. 流动相:选用低粘度的流动相,有利于增大组分在溶剂中的扩散系数Dm,减少传质阻力。3. 流速:HPLC的最佳流
牙髓组织的分离
试剂和材料:1. 无镁和钙的PBS平衡盐溶液(PBSA);2. MSC培养基:含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM,添加15%胎牛血清,0.1mmol/L左旋抗坏血酸磷酸盐,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;3. 培养皿;4. 精细镊(小号和大号);5. 牙科碳化钻头;6. 牙挖器;7
组织的分离实验
机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法 试剂、试剂盒
组织的分离实验
试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1. 无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组
-色谱分离的概念
色谱分离指的是基于不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,在采用流动相洗脱过程中呈现不同保留时间,从而实现分离。
色谱分离的原理
在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相.谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的.含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱子或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面;当流动相中携带的
液泡的分离实验
仪器、耗材:紫洋葱 紫萝卜叶 蔗糖溶液
分离小鼠胚胎实验
实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
分离小鼠胚胎实验
分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神
解析多肽分离实验
实验方法原理 实验材料 多肽混合物试剂、试剂盒 0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器实验步骤 1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管:10 倍柱体积的 0.1 m
分离纯化的流程
粉碎:将样品进行破碎,研磨提取:这与我们的筛分差不多,就是在破碎之后,提取符合颗粒大小要求的样品,可以理解为取样。分离:这就要看你们所作的什么实验。大部分是分离样品中的杂质。就相当于提纯。鉴定:也就是分析了。分析样品成分呀,化学性质什么的。
核酸的分离方法
核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以