蛋白质分离提纯方法

1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。3、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。4、聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。......阅读全文

鸡胚分离实验

实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培

血细胞分离技术

实验概要血细胞是免疫学研究或临床检验常用的检测对象或试验材料,分离和纯化血细胞是实验室中的基本技术。目前分离血细胞的技术大多是根据各种细胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等设计而成。实验原理外周血液中的红细胞与白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,红细胞

分离纯化总RNA

1)      用酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取纯化组织和细胞中的RNA1.      选取从组织细胞或细胞中提取RNA的适宜方法组织a.       分离组织并立即置于液氮中。b.      将约100 mg冰冻组织含液氮的研钵中,用研棒研磨。研磨过程中可加入液氮使组织保持冰冻状态。c.       

蔓荆子黄素的分离

   蔓荆子为常用中药材,中国药典收载蔓荆子商品为马鞭草科植物单叶蔓荆Vitex trifolia L.var.simplicifolia Cham.或三叶蔓荆V.trifolia L.的干燥成熟果实。单叶蔓荆分布广,产量大,在我国主要分布在山东、江西一带。蔓荆子作为中药,具有疏散风热、清利头目的功

激光分离技术介绍

激光分离技术主要指激光切割技术和激光打孔技术。激光分离技术是将能量聚焦到微小的空间,可获得105~1015W/cm2极高的辐照功率密度,利用这一高密度的能量进行非接触、高速度、高精度的加工方法。在如此高的光功率密度照射下,几乎可以对任何材料实现激光切割和打孔。激光切割技术是一种摆脱传统的机械切割、热

解析多肽分离实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 多肽混合物

ELISA血清如何分离

一般用凝胶促凝管采集志愿者全血,采集完成后,将采血管在37℃温箱中静置30分钟,待血块凝集后,将采血管在离心机上离心,1000g(转速要看具体机型),15分钟,用移液器分离血清。如没有凝胶促凝管可用普通促凝管,不要使用抗凝管。

菌体的分离原理

菌种分离原理:就是用无菌操作的方法将所需要的菌从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。培养基与菌种分离是指从含有多种微生物的样品中获得纯种微生物的操作技术。菌种分离主要在培养皿上进行,常用的方法是稀释法和划线法。使用这两种方法的目的是微生物的一个个体通过繁殖,在固体培养基上长出肉眼能见的群体,然后根

植物病毒分离方案

方案一:带病毒的植物叶、茎、果实、根等粉碎后—20℃冰冻后制成匀浆→用0.5M,PH7.0柠檬酸缓冲液抽提→双层纱布过滤→滤液加入6%PEG(MW6,000)及3%Nacl,充分搅拌40分钟,置冰箱4℃过夜→高速冷冻离心机8×50ml转头,7000rpm,4℃离心20分钟,弃上清,取沉淀→沉淀是浮于

色谱柱分离经验

柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂

血细胞分离技术

采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是

分离分析技术电泳

 带电粒子在直流电场作用下于一定介质中所发生的定向运动,利用这一现象对化学或生物化学组分进行分离分析的技术称之为电泳。我公司根据这一原理生产的毛细管电泳仪选配的国产紫外检测器,是一种可变波长的光吸收型检测器。该检测器具有自动波长定位调整,自动调零,多量程输出选择(用于数据处理的计算机工作站或积分仪输

原代细胞分离技术

取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基

分离小鼠胚胎实验

实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠(已知怀孕时间)子宫,分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配,雌鼠 3 天后可进入动情期,此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行,使胚胎在适宜的时间

中药提取分离方法

为提高中药质量、改变传统中药剂型“大、黑、粗”的状态、让中药步入国际市场,一些现代高新工程技术正在不断地被借鉴到中药生产中来,一方面使中药生产加符合传统的中医药理论,确保用药的质量要求,另一方面也提高了现有中草药资源的利用率。笔者拟对几种研究和应用较多且发展前景广阔的中药提取分离技术作一综述。1 中

核酸的分离方法

核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以

常用膜分离过程

根据被分离物(溶质)粒子的大小及所用膜的结构。可以将压力差为推动力的膜分离过程分为四类:微滤、超滤、纳滤和反渗透。它们构成了一个可分离固态微粒到离子的四级分离过程。(1)超滤与微滤超滤和微滤都是成熟的膜分离技术,已广泛应用于化工、医药、轻工、机械电子和环保等领域。其中微滤是目前应最广泛的膜分离过程。

原代细胞分离技术

  1. 悬浮细胞的分离方法  1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。  2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。  3) 用培养基重悬,调整适当细胞浓度后分瓶培养。  4) 如选用悬液中某种细胞,

蛋白分离纯化步骤

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性.所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎.常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎.常用设备有

单细胞分离技术

单细胞测序日趋火爆的原因很大程度上得益于单细胞分离技术的不断完善。这一讲,我们将跟大家一起回顾传统的单细胞分离技术,并重点介绍单细胞分离技术的新宠微孔芯片技术及微流控技术。图1为目前常见单细胞分离设备。图1:目前常见单细胞分离设备传统单细胞分离技术相信许多实验人员,都见过下面我们要介绍的传统的单细胞

什么是分离度

又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比. 相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R越大,表明相邻两组分分离越好。一般说当R<1时,两峰有部分重叠;当

什么是耐受分离?

耐受分离:口服抗原,经胃肠道诱导派氏集合淋巴结及小肠固有层B细胞,产生分泌型IgA,形成局部粘膜免疫,但却致全身免疫耐受。

什么是色谱分离

色谱分离技术又称层析分离技术或色层分离技术,是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法。它是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。

什么是分离度

分离度(resolution,又称为解析度、分辨率)是色谱图中相邻两峰分离程度的量度。两峰间的分离程度受两峰尖的距离和两峰各自峰宽的制约。若保持峰宽不变,加大峰间的距离则分离程度加大,即分离度与两峰的保留时间之差成正比;若保持两峰间距离不变,使峰的宽度减小,两峰分离程度亦将增大,即分离程度与峰宽成反

mRNA提取、分离纯化

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之

病毒的分离实验

实验步骤 标本的采集:病毒分离常用的标本有血液,脑脊液,粪便,直肠拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取粪便,直肠拭子;神经系统疾病取脑脊液,粪便等。采取标本时应避免污染,有些标本如粪便,咽喉洗液,虽本身含有大量杂菌,但为保

什么是优先分离?

中文名称优先分离英文名称preferential segregation定  义减数分裂中产生四个子细胞时,染色体或染色体片段非随机分配,结果某条染色体或染色体片段优先进入卵细胞,而其同源部分则进入不参加合子形成的极体。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

鸡胚分离实验

实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮

膜蛋白分离方法

1 细胞质膜资料1895 年 ,Overton 从研究细胞透性得出 " 细胞膜由连续的脂类物质组成 " 。1925 年 Gorter&Grendel: 用脂单分子膜技术测定细胞膜中脂分子的总面积,提出: "细胞膜是由双层脂分子组成 " 。1935 年 Danielli&Davson :从测定膜的表面

分离方法的分类

分离方法的分类有多种方式,但是有些分类方式并不十分严格,这是由于有些分离方法涉及两种以上的机制;每一种分离方式无非是以下三个过程的单独、同时或依次进行的过程:①化学转化;②两相中的分配;③相的物理分离。按照分配和相分离之间的关系来研究分离就产生多种分离模式。1、间歇分离 这是最简单的分离模式。它只涉