免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白的标志物介绍
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白,相对分子量为10x103~12x103,其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守,与钙调蛋白具有高度同源性。目前,共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位,可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白,包括S100A1~S100A13,S100B,S100P,钙粒蛋白C,钙结合蛋白3等。其中,S100B主要分布于中枢神经系统和外周神经系统的神经胶质细胞和Schwann细胞以及某些神经元细胞、黑色素细胞、软骨细胞和脂肪细胞中,而S100A4主要分布于成纤维细胞,S100A7则主要分布于上皮细胞。 ②神经节苷酯GD3:神经节苷脂(gangliosides,GLS)是一类含唾液酸的鞘糖脂,因其最早被发现于神经节细胞而得名。根据其所含的唾液酸残基数目的不同,可分成GM、GDGT和GQ等。每种神经节苷酯还可根据薄板层析迁移率Rf值的大小再分几个亚类,如GD1、GD2、GD3等。GM......阅读全文
免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白的标志物介绍
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白,相对分子量为10x103~12x103,其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守,与钙调蛋白具有高度同源性。目前,共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位,可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白,包括S100A1~S100A13,S100
免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白,相对分子量为10x103~12x103,其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守,与钙调蛋白具有高度同源性。目前,共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位,可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白,包括S100A1~S100A13,S100
免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白,相对分子量为10x103~12x103,其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守,与钙调蛋白具有高度同源性。目前,共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位,可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白,包括S100A1~S100A13,S100
表达蛋白检测实验_点印迹法
实验方法原理本方案用DNA点迹杂交检测噬斑以鉴定重组病毒。像点迹杂交一样,将感染细胞裂解物印迹在硝酸纤维素膜上(可参考「痘苗DNA检测实验」中「斑点杂交法」)。用可以识别外源基因表达蛋白的抗体与膜一起孵育,用125I 标记的蛋白 A 检测结合的抗体,还可应用化学发光检测系统,如 Amersham E
表达蛋白检测实验_免疫印迹法
实验方法原理当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒完全
表达蛋白检测实验_免疫印迹法
实验方法原理当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒完全
流式中检测细胞表面和细胞内蛋白表达水平的抗体有何...
流式中检测细胞表面和细胞内蛋白表达水平的抗体有何区别?抗体只是针对相应抗原的,至于是针对胞内还是胞膜对你检测来说并无明显影响,你只需要查清楚到底是针对哪一个部位的抗原的,应该是可以用同一种抗体进行检测的,在流式操作时只需注意:如果是针对胞内,则需要加破膜剂,让抗体能和相应抗原接触,否则就不需要了。
介绍一下细胞检测技术的应用案例
细胞检测技术是用于研究细胞的结构、功能、生理和病理状态的一系列方法和手段。以下为您介绍一些常见的细胞检测技术:光学显微镜技术:包括普通光学显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等。可用于观察细胞形态、结构和某些特定蛋白的分布。电子显微镜技术:如透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM),能够提供细胞
表达蛋白检测实验_免疫沉淀法
实验方法原理使用强大的晚期基因启动子表达的重组蛋白可以用放射性氨基酸标记,再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。当使用早期或晚期基因启动子时,利用标记蛋白免疫沉淀能提高灵敏性和特异性。试剂、试剂盒磷酸缓冲液(PBS)细胞裂解液[35S]蛋氨酸或[35S]半胱氨酸仪器、耗材完全 MEM-5 培养基(含和不含蛋氨
分析细胞内特定的细胞类型中表达的蛋白质
多色流式细胞术是一种强大的技术,用于分析细胞内特定的细胞类型中表达的蛋白质。对于许多类型的细胞,如Th17细胞,细胞表面和细胞内标记物的结合使用是必要的明确的表型鉴定。表征信号响应于特定的靶细胞的性质,可用于表面标志物的同时分析和信号转导蛋白。 细胞表面染色的技术是比较标准的,往往依赖于目标蛋白的
表达蛋白检测实验
实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒
表达蛋白检测实验
免疫印迹法 免疫沉淀法 点印迹法 实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是
介绍一下细胞检测技术的应用案例
以下为您介绍一些细胞检测技术的应用案例:案例一:肿瘤细胞研究在肿瘤研究中,常常使用流式细胞术检测肿瘤细胞表面的标志物,例如 CD44、CD133 等,以确定肿瘤干细胞的存在和比例。同时,通过免疫组化技术检测肿瘤组织中特定蛋白(如 Ki-67 )的表达,评估肿瘤细胞的增殖活性。利用细胞凋亡检测技术(如
关于蛋白表达系统—植物表达系统的介绍
植物能够表达来自动物、细菌、病毒以及植物本身的蛋白质易于大规模培养和生产,且在基因表达与修饰及安全性方面有特别的优势,因此利用植物生产外源蛋白质的研究展现了极其诱人的前景。多种抗体、酶、激紊、血浆蛋白和疫苗等都已通过基因工程的手段在植物的叶、茎、根、果实、种子以及植物细胞和器官中得到表达,然而提
关于蛋白表达系统—昆虫表达系统的介绍
昆虫表达系统是一类应用广泛的真核表达系统,它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。昆虫杆状病毒表达系统是国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表达。它具有真核表达系统的翻译后加
癌基因编码蛋白表达的检测
实验步骤展开
膜蛋白的表达相关介绍
常用于重组膜蛋白的表达系统有真核表达系统、原核表达系统和近些年来发展的无细胞表达系统。其中以大肠杆菌(E.coli)为代表的原核表达系统因为操作简单、成本相对低廉、遗传背景清楚、方便同位素标记,以及有大量可利用的表达载体和宿主菌株等原因,是当下获取重组膜蛋白的最主要途径。对于一些膜蛋白而言,采用
亚细胞定位的GFP融合蛋白表达法
GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白(GFP)是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。通过基因工程技术,绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组,在后代中持续表达,并且能根
肿瘤检测蛋白质类肿瘤标志物检测介绍
蛋白质类肿瘤标志物检测介绍: 大多数实体瘤是由上皮细胞衍生而来,当肿瘤细胞快速分化、增值时,一些在正常组织中不表现的细胞类型或组分大量出现,如作为细胞支架的角蛋白,成为肿瘤标志。化学本质属于蛋白质类的肿瘤标志包括:①酶;②蛋白类或肽类激素;③不属于前两者的其他蛋白质。蛋白质类肿瘤标志物检测正常值:
膜片钳法的各种模式介绍
细胞吸附模式 将膜片微电极吸附在细胞膜上对但离子通道电流进行记录的模式。其优点是在细胞内环境保持正常的条件下可以对离子通道活动进行观察记录。但是由于不能认为直接地控制细胞内环境条件也不能确切的潘明细胞内点位,所以其缺点是不清楚膜片上的实效点位。 膜内面向外模式 从细胞吸附模式将已形成巨阻抗
抑癌基因编码蛋白表达的检测
实验步骤展开
抑癌基因编码蛋白表达的检测
实验步骤 展开
抑癌基因编码蛋白表达的检测
实验步骤 展开
表达蛋白的生物学活性的检测
一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理 活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、 青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于10
表达蛋白的生物学活性的检测
一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2
表达蛋白的生物学活性的检测
一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2
异源蛋白表达的基本介绍
随着人类基因组计划的完成,蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明,利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。根据不同的表达要求,如表达量高低、目标蛋白的活性和表达产物的纯化方法,可选用适当的表达系统及相应的表达策略。
关于蛋白表达系统的基本介绍
蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。一般由以下几个部分组成: 1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表达蛋白的种类也不相同。 2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根
关于蛋白表达系统的分析介绍
原核蛋白表达系统既是最常用的表达系统,也是最经济实惠的蛋白表达系统。原核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。 酵母蛋
关于蛋白质类肿瘤标志物检测的基本介绍
大多数实体瘤是由上皮细胞衍生而来,当肿瘤细胞快速分化、增值时,一些在正常组织中不表现的细胞类型或组分大量出现,如作为细胞支架的角蛋白,成为肿瘤标志。化学本质属于蛋白质类的肿瘤标志包括: ①酶; ②蛋白类或肽类激素; ③不属于前两者的其他蛋白质。