qRTPCR中SYBRGreen酶的选择
高质量的酶是保证高质量结果的前提。现在市售的酶多为2 X MIX的形式。在市售酶的选用方面，我们首先应该选择稳定、扩增效率高的酶，其次还应注意解冻后的MIX粘性不宜过大（粘性过大的MIX会导致加样时枪头出现挂液），最后应注意同一板qRT-PCR体系不宜用两管MIX，即加完一管发现不够用，继续开一管新的MIX接着加。正确的做法应为先估算总体系，将两管MIX预先加到一起，混匀后离心，用混匀的MIX配置体系。......阅读全文
qPCR和qRTPCR各有什么优缺点
QRT PCR一般指以RNA为模板，先逆转成cDNA，再进行qPCR。更容易突变，因此种类更多，更难研制有效疫苗，难以预防。RNA病毒的抵抗力普遍比DNA病毒弱，治愈也更容易。但也有例外，例如双链RNA病毒的抵抗力就很强，逆转录病毒的治愈就极其困难。植物病毒，除少数例外（如花椰菜花叶病毒Caulif
浅谈实验中BSA的选择
牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为66.446KDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。按照等级从低到高分为：牛血清白蛋白，牛血清白蛋白第五组分，牛血清白蛋白（无必须脂肪酸），牛血清白蛋白（无蛋白酶），牛血清白蛋白（细胞培养级），金标级
Western－Blot中抗体的选择
Western Blot又称为蛋白质印迹，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。基本原理：聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离，分离后的蛋白被转移到固相支撑物（杂交膜）上，抗体特异性识别目标蛋白，通过酶促反应或者化学发光等
耐热DNA聚合酶的选择指南
耐热DNA聚合酶特点：合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。TIANGEN公司生产的耐热DNA聚
耐热DNA聚合酶的选择指南
一、耐热DNA聚合酶特点合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热 DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。TIANGEN公司生产的耐热DN
酶活性测定条件的选择和限定
仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么？这些条件之间有无主次关系？如何选择合适的测定条件？这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下： 式中Kp可看成为ES的
酶标记抗体技术的工作浓度的选择
在免疫酶技术中，首先要确定的变异因素就是酶标记物的工作浓度。因为酶标记物浓度的很小变化，便可导致试验结果产生很大的波动。另外，由于浓度过高，可使非特异性反应增加，而浓度过低又可影响测定的敏感性。因此，正式试验前必须准确滴定其工作浓度。 酶标记抗体的滴定方法是：将抗原(或抗体)物理吸附于固相载体
自然界中首例exo选择性的分子间DielsAlder反应酶
药物中间体、农药和精细化学品在国计民生中占据重要地位。传统的化学合成工艺存在效率低和污染严重等瓶颈问题；基于酶催化的生物合成工艺具有过程绿色、选择性好等优势，目前特别在创新药物工业化生产中得到广泛应用。然而，目前酶催化反应的工具箱还非常有限，能够催化新颖化学转化的酶亟待被发现，从而推动酶催化在工
如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶
培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢？在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基
qRTPCR－计算公式2–ΔΔCT－(Livak)－方法
当我们做到荧光定量实验时候，普遍采用操作简便的2–ΔΔCT 法。前提条件：1. 使用2–ΔΔCT 法之前，必须验证目标基因和参照基因的扩增效率。目标基因和参照基因扩增效率都接近100%， 且相互间效率偏差在5% 以内。计算方法：首先，对所有的测试样和校准样本，用内参基因的CT 值归一目标基因的CT
酶免疫技术中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物（一）酶的要求： 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检
酶活性测定条件的选择和限定2
曲线A：V对pH作图曲线B：酶先在pH5及pH8预孵育后，在pH6.8测活性 氢离子可以通过多种途径影响酶催化反应。如在脱氢酶反应中往往需要氢离子参加，也可能产生氢离子，从理论上可以将氢离子看成是该反应的底物和产物之一。此外，当pH变化时，可影响到底物、酶、酶-底物复合物的解离状态和构型，甚至还
关于酶标板的选择和分类介绍
要根据您的酶标仪进行选择。 另外，又分可拆和不可拆的，对于不可拆的，就是一整块板上的板条都是连在一起的，那么可拆的就是板子上面的板条是分开的，分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般现在用的较多的是可拆的酶标板，如果你之前买了一些这样的板子，那么现在完全可以只买些酶标板条就可以了。不同的厂家做出
TLC中展开剂的选择
展开剂的选择TLC与HPLC相比，一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性，流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1－0.7之间并达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大，溶质Rf值越大，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相
果汁中酶制剂的选择原则
1.存在问题 果汁生产中，果汁的澄清处理是关键工序。制造果汁的果实中含有一定量的果 胶质、纤维质和淀粉，这些物质使汁液黏稠、混浊，失之清亮，各种杂质以其为依托，难以在短时间内沉淀去除。 (1)皂土加冷冻的方法或自然澄清法澄清果汁，存在的问题： ①澄清效果不佳，经澄清的果汁未达到要求的清亮程度;
T细胞在胸腺中的选择
成熟的、有功能的T细胞必须经过在胸腺中阳性选择和阴性选择。主要组织兼容性复合体（MHC）抗原在这两种选择中起着关键的作用。1.假如一个双阳性细胞表面能与胸腺皮质上皮细胞表面MHCI类或Ⅱ类分子发生有效结合，就可能被选择而继续发育，否则会发生程序性的细胞死亡（apoptosis）。MHCI类分子选择C
果汁中应用酶制剂的选择
1.存在问题 果汁生产中，果汁的澄清处理是关键工序。制造果汁的果实中含有一定量的果 胶质、纤维质和淀粉，这些物质使汁液黏稠、混浊，失之清亮，各种杂质以其为依托，难以在短时间内沉淀去除。 (1)皂土加冷冻的方法或自然澄清法澄清果汁，存在的问题： ①澄清效果不佳，经澄清的果汁未达到要求的清亮程度;
食品中脂肪提取剂的选择
食品中脂肪的存在形式有游离态的，也有结合态的。游离态的脂如动物性脂肪和植物性脂肪。结合态的脂如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等中的脂肪与蛋白质或碳水化合物等成分形成的结合态。对大多数食品来说，游离态的脂肪是主要的，结合态的脂肪含量较少。一、 提取剂的选择脂类的结构比较复杂，到现在没有一种溶剂能将纯脂肪
细胞组织消化常用的几种酶的选择
直接从生物体获取的组织，一般需要将其消化成单个细胞才能进行体外培养。这种直接从离体组织获得的细胞，更接近于生物体内的生活状态，且生物性状尚未发生很大改变，因此在药物筛选、细胞移植、类器官培养、肿瘤研究等众多领域备受欢迎。但组织消化过程中常遇到多种问题，例如消化不完全、细胞死亡率高等。如何克服这些问题
食品加工中酶的作用
与食品加工有关的酶，根据其来源可分为内源酶和外源酶两大类。 一、内源酶的作用 内源酶是指作为食品加工原料的动植物体内所含有的各种酶类。内源酶是使这些食品原料在屠宰或采收后成熟或变质的重要原因，对食品的贮藏和加工都有着重要的影响。 （一）动物性食物原料中内源酶的主要作用 畜禽在屠宰后，生命即告终止。但
豆粕中尿素酶活性的测定_尿素酶解法
将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30min后，尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨，再用氢氧化标准溶液回滴。实验材料大豆试剂、试剂盒尿素缓冲溶液盐酸氢氧化钠蒸馏水仪器、耗材样品筛酸度计恒温水浴锅试管精密计时器粉碎机分析天平移液管一、实验目的掌握测定尿素酶
western－blot中的一抗如何选择
一般选择的原则是去文献中找，看看别人做和你一样的目的蛋白的时候用的都是哪家得抗体，都有介绍的，看看图片效果怎么样。多找出一些文献，然后根据你掌握的信息选择一种最便宜，最高效，特异性最好的抗体。一般做科研的人都是这么选择抗体的，不能蒙着买，毕竟不便宜的。
有机合成中展开剂的选择
选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷
络合滴定中酸度的选择与控制
三、络合滴定中酸度的选择与控制：1）、缓冲溶液和辅助络合剂的作用：M + H2Y ===MY + 2H随着滴定剂与金属离子反应生成相应的络合物，溶液的酸度会逐渐增高，减小了MY的条件常数，降低滴定反应的完全程度；而且还可能影响指示剂的变色点和自身的颜色，导致终点误差变大，因此酸度对络合滴定的影响是多
甘油二酯的研究方向和酶的选择
研究方向 生产DAG的传统方法各有优缺点和局限性，研究DAG的工业化生产需比较已有方法并对其进行进一步优化和组合，其中决定工业化生产DAG的成功与否的重要的研究内容和方向有： 酶的选择 脂肪酶由于成本较高，生产上多采用固定化形式。商品化脂肪酶主要是丹麦诺威信公司(Novozyme)、日本天
qRTPCR中标准曲线制作及浓度梯度问题
要做qRT-PCR，但是不太清楚，1：浓度梯度是用来制作标准曲线的吗？2：是不是内参和每个目的基因都要制作各自的标准曲线？也就是说如果我要作10个基因的话，就要制作内参加目的基因共11个标准曲线？3：怎么确定最适合的cDNA模板浓度呢？4：有说作3个生物学重复，是怎么做？是的，标准曲线法是绝对定量法
豆粕中尿素酶活性的测定
实验材料 大豆 试剂、试剂盒 尿素缓冲溶液 盐酸 氢氧化钠 蒸馏水
豆粕中尿素酶活性的测定
一、实验目的掌握测定尿素酶活性的各种方法的基本原理及方法步骤。 二、实验原理将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30min后，尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨，再用氢氧化标准溶液回滴。 三、实验设备1、样品筛：孔径200μm；2、酸度计：精度0.02pH
酶在细胞代谢中的作用
酶在细胞代谢中的作用是至关重要的。 它们是一种生物催化剂，能够在体内催化化学反应，从而调节和加速新陈代谢过程。具体来说，酶在以下几个方面发挥作用： 代谢调节：酶参与调节和促进身体的新陈代谢过程，包括糖代谢、脂肪代谢、蛋白质代谢等。这些反应通过酶的催化作用，使得体内的代谢反应能够高效进行。 消
酶在食品分析中的作用
酶已经越来越多地用于食品分析，分析过程高度专一，并能快速进行。在现代酶分析方面，光吸收试验极为普遍，因为反应底物与产物的光吸收变化很容易进行测定。这些试验基于某些脱氢酶的作用，例如葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、乳酸脱氨酶、醇脱氢酶等，因为它们的辅因子NADH在340 nm处的特征光谱吸收可以进行测量，所以