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qRTPCR中SYBRGreen酶的选择

高质量的酶是保证高质量结果的前提。现在市售的酶多为2 X MIX的形式。在市售酶的选用方面,我们首先应该选择稳定、扩增效率高的酶,其次还应注意解冻后的MIX粘性不宜过大(粘性过大的MIX会导致加样时枪头出现挂液),最后应注意同一板qRT-PCR体系不宜用两管MIX,即加完一管发现不够用,继续开一管新的MIX接着加。正确的做法应为先估算总体系,将两管MIX预先加到一起,混匀后离心,用混匀的MIX配置体系。......阅读全文

qRT-PCR中SYBRGreen酶的选择

高质量的酶是保证高质量结果的前提。现在市售的酶多为2 X MIX的形式。在市售酶的选用方面,我们首先应该选择稳定、扩增效率高的酶,其次还应注意解冻后的MIX粘性不宜过大(粘性过大的MIX会导致加样时枪头出现挂液),最后应注意同一板qRT-PCR体系不宜用两管MIX,即加完一管发现不够用,继续开一管新

SYBRGreen Q-PCR in the ABI 7700

MaterialsROX Passive Reference Dye 25 µM, 50x (Invitrogen, Cat. No. 12223-012)SYBR Green I, "10,000x" concentrate (Molecular Probes, Cat. No. S7563)Su

PCR反应中Taq酶的选择

随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入,PCR已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即Taq酶)的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种Taq酶,能够满足多方面的实验需要。那么,如何选择最合适的Taq酶?根据用户经常考虑的指标,如特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度、

如何看QRT-PCR 结果中的Cq值

这样算:你先把几次试验的对照组的平均值设为1, 再把每个单独试验对照组的数值算出和这个对照组平均值的差异,就可以计算标准差了。这么简单的统计分析,用不着SPSS吧, excel就可以解决了。追问 : 谢谢您,可是我还是有点不明白:如果我重复三次,每次3个复孔(即一共9个孔),您指的“把几次试验的对照

如何看QRT-PCR 结果中的Cq值

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QRT-PCR

Comparison of normalisation methodsThere is an ongoing debate what is the best way to normalise qPCR data. Reference genes are the most common method,