荧光定量PCR仪的三个常用概念

扩增曲线、荧光阈值、Ct值 (1).扩增曲线:反映PCR循环次数和荧光强度的曲线,定量PCR仪每次轮PCR扩增都会自动录荧光强度的变化 (2).荧光阈值:样本的荧光背景值和阴性对照的荧光值,手动 设置的原则要大于样本的荧光背景值和阴性对照的荧光最高值,同时要尽量选择进入指数期的最初阶 段,并且保证回归系数大于0.99。 (3).CT值:PCR扩增过程中,扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环 次数。......阅读全文

荧光定量PCR仪的三个常用概念

  扩增曲线、荧光阈值、Ct值        (1).扩增曲线:反映PCR循环次数和荧光强度的曲线,定量PCR仪每次轮PCR扩增都会自动录荧光强度的变化    (2).荧光阈值:样本的荧光背景值和阴性对照的荧光值,手动 设置的原则要大于样本的荧光背景值和阴性对照的荧光最高值,同时要尽量选择进入指数期

荧光定量PCR常用术语

基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量或者靶标基因的表达水平高则循环数量需要减少。设置基线需要查看线性度扩增曲线的荧光数据。设置基线,使得扩增曲线的增长所开始的循环圈数大

荧光定量PCR常用术语

荧光定量PCR原理和过程已经非常清楚,为方便初学者更加清晰的学习,QIAGEN为大家汇总了荧光定量PCR常用术语,供您查阅参考使用。基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量

解析荧光定量PCR常用术语

 基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量或者靶标基因的表达水平高则循环数量需要减少。设置基线需要查看线性度扩增曲线的荧光数据。设置基线,使得扩增曲线的增长所开始的循环圈数

荧光定量PCR几个基础概念

基线:是指扩增曲线的水平部分。是指在PCR扩增反应的最初数个循环里,荧光信号变化不大。接近一条直线,这样的直线即是基线。每个样品孔都设置独立基线。阈值:是一个荧光强度值,荧光域值必须设定在 PCR扩增的指数期。阈值线:穿过阈值与X轴平行的直线称为阈值线;Ct值:是阈值线与扩增曲线的交点对应在X轴上的

实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】

  【FT-PCR】实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】_风途厂家_Kgaoletšo ya dikarolo tše bopago seswantšho tša kgole ya PCR  具体来讲扑杀无害化处理染疫动物,禁止泔水饲喂生猪,加强生猪养殖运输屠宰等各个环节的清洗和消毒,包括养

荧光定量PCR实验中的内标概念

内标是指在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子。内标有两种形式,一种是使用天然样品中含有的内参基因作为内标,另一种是人工添加的内标。内标的最大特点是与靶序列共同扩增,而其他的对照都是独立扩增。

实时荧光定量PCR仪

  在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机

实时荧光定量PCR仪

在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析

荧光定量PCR仪原理

 荧光定量PCR仪技术原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实

荧光定量PCR仪原理

荧光定量PCR仪技术原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时

荧光定量PCR仪的应用

 荧光定量PCR仪可用于医疗,新药研发,诊断检验试剂研发等领域。 在医疗方面,具体可用于病原体检测;产前诊断以防止各类遗传性疾病的发生;药物疗效考核,例如对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析显示:病毒量与某些药物的疗效关系;肿瘤基因检测。 在新药开发研究中,实时荧光定量PC

荧光定量PCR仪的用途

  1. 定量/定性基因表达分析;  2. 熔解曲线分析;  3. SNP基因分型;  4. microRNA分析;  5. 基因突变分析;  6. 质控图形分析;  7. PCR扩展效率计算;  8. HBV、HCV、HIV、HPV、SARS、H1N1、 AIDS 、CSF等各种疾病检测;  9.

荧光定量PCR仪的应用

荧光定量PCR仪可用于医疗,新药研发,诊断检验试剂研发等领域。 在医疗方面,具体可用于病原体检测;产前诊断以防止各类遗传性疾病的发生;药物疗效考核,例如对乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析显示:病毒量与某些药物的疗效关系;肿瘤基因检测。 在新药开发研究中,实时荧光定量PCR

荧光定量PCR仪的选购

2003年非典型肺炎和2004年禽流感的爆发,使荧光定量PCR技术在临床检验中的应用前景大为提升。为了提升科研水平和检验水平,各单位争先恐后购人荧光定量PCR仪。如何选择更适合本单位实际情况的PCR仪,就摆在了许多科研人员的面前。针对上述疑问,结合各款PCR仪的特征,本人提出一些个人的看法。1 PC

实时荧光定量pcr仪的PCR优势

样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。

荧光定量PCR技术的荧光定量PCR的方法

接下来我们就来了解一下荧光定量的主要方法,我们如何选择合适的方法?荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而荧光定量 PCR 的方法相应的可分为特异类和非特异类两类,特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物;而非特异性检测方法是在在PCR反

荧光定量pcr仪定量方法之绝对定量

  在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。   使用标准曲线进行绝对定量   绝对定量是通

荧光定量PCR实验中人工内标的概念

添加一种不会干扰靶序列扩增的人工合成的内标。现在国外的诊断试剂盒大部分都会将内标直接添加在反应液中与模板一起扩增,但是这样的内标不能监控采样,运输和核酸提取的过程。还有另一种形式的内标,使用人工合成的假病毒,在核酸提取前在每一份样品中加入等量的内标,这样就可以监控样品的提取到扩增的过程。但是由于是人

荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别

    荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的

荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别

    荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的

荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别

 荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不

荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别

 荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别有哪些? 上海巴玖实业有限公司小编给您讲解如下  荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工

荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别

  荧光定量PCR仪与普通PCR仪的区别  荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,而反之就不行了,况且这样代价太大了,一般

荧光定量PCR

  荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结

实时荧光定量pcr仪优势

  样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。

荧光定量PCR分析仪

  荧光定量PCR分析仪是一种用于生物学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2006年11月15日启用。  技术指标  热循环系统:新型半导体,96个样品孔,可以升级到96孔快速热循环样品基座 光学系统:5色激发光源,5色荧光滤光片和超低温CCD成像系统(包括:FAM™/SYBR® Green

荧光定量PCR仪主要构造

qPCR仪包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件。常用的荧光激发方式有三种激光激光是纯粹的单色光,用来做荧光染料的激发光强度超级高而且基本上没有背景干扰,但激光光源的价格也和性能一样高高在上,市场上只有最高端的定量PCR设备才会使用激光光源,价格和性能都令我们绝大多数的普通用户高山仰止。卤钨灯相

如何选择荧光定量PCR仪?

荧光定量PCR 因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的今天,也许对你来说,最难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,更要详细研究各种极富诱惑力的宣传

荧光定量PCR仪工作原理

1 系统的组成和工作原理本系统由基本PCR部分、荧光检测部分和上位计算机部分等组成。基本PCR部分是该仪器的基础,包括加热丝、温度采集与处理等部分,它必须具有精确控温、快速升降温、温度场均一等PCR仪的基本要求,保证PCR过程的顺利完成。荧光检测部分包括激励光源、光电倍增管、信号采集与处理等部分。上