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荧光定量PCR几个基础概念

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荧光定量PCR标准曲线有几个梯度

  相对定量  相对定量得到的结果为特定样本中目的基因相对于另一参照样本的量的变化。  在某些不需要对基因进行绝对定量,只需要确定基因相对表达差异的情况下,如某样品在经过某种处理后目的基因表达量是增加了还是减少了,用相对定量的方法就可以得到结果,相对定量是一种更普遍、更简单的方法。  内参基因  实

实时荧光定量PCR无需内标的基础

  实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:  1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,

荧光定量PCR实验中的内标概念

内标是指在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子。内标有两种形式,一种是使用天然样品中含有的内参基因作为内标,另一种是人工添加的内标。内标的最大特点是与靶序列共同扩增,而其他的对照都是独立扩增。

荧光定量PCR实验中人工内标的概念

添加一种不会干扰靶序列扩增的人工合成的内标。现在国外的诊断试剂盒大部分都会将内标直接添加在反应液中与模板一起扩增,但是这样的内标不能监控采样,运输和核酸提取的过程。还有另一种形式的内标,使用人工合成的假病毒,在核酸提取前在每一份样品中加入等量的内标,这样就可以监控样品的提取到扩增的过程。但是由于是人

荧光定量PCR

  荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结

实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】

  【FT-PCR】实时荧光定量PCR仪【实时荧光定量PCR仪】_风途厂家_Kgaoletšo ya dikarolo tše bopago seswantšho tša kgole ya PCR  具体来讲扑杀无害化处理染疫动物,禁止泔水饲喂生猪,加强生猪养殖运输屠宰等各个环节的清洗和消毒,包括养

选购荧光定量PCR仪需要注意的几个关键参数

 选购荧光定量PCR仪时,需要注意的几个关键参数:1.仪器的检测通量(Throughput)首先要考虑实验室目前需要使用定量PCR仪的频率。加州大学旧金山分校癌症中心的基因组分析设备负责人David Ginzinger检测过市面上绝大多数的定量PCR仪。他表示,如果不是大规模批量使用,比如说主要是用

荧光定量PCR技术

荧光定量pcr(也称taqmanpcr,以下简称fq-pcr)是美国pe(perkinelmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规pcr基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通pcr相比,fq-pcr具有许多优点。

实时荧光定量PCR

  实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:  1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,

实时荧光定量 PCR

Thomas D. SchmittgenDepartment of Pharmaceutical Sciences, College of Pharmacy,Washington State University, Pullman, WA 99164.      对于从 90 年代初就开始接触定