相差显微镜的基本原理

相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由于细胞各部分的折射率和厚度的不同,光线通过这种标本时,直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少,加快或落后的光波的相位会发生改变(产生相位差)。光的相位差人的肉眼感觉不到,但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板,利用光的干涉现象,将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差(明暗差),从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异,对比度增强,使我们能比较清楚的观察到普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构。相差显微镜的成像原理: 镜检时光源只能通过环状光阑的透明环,经聚光器后聚成光束,这束光线通过被检物体时,因各部分的光程不同......阅读全文

显微镜的七种观察方式

  一.明视野观察(Bright field BF)   明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式,广泛应用于病理、检验,用于观察被染色的切片,所有显微镜均能完成此功能。   明视野   二.暗视野观察(Dark field DF)   暗视野实际是暗场照明发。它的特点和

尿红细胞形态检查及意义

尿红细胞增加(血尿)是一个危险的信号,可能是泌尿系统恶性肿瘤的唯一临床表现。因此,对血尿患者必须及早诊断其基础疾病。而血尿的诊断首先要鉴别其是肾小球性血尿,还是非肾小球性血尿。肾小球性血尿常见于各种原发性或继发性肾小球肾炎,非肾小球性血尿则常见于肾结石、肾肿瘤等。如果是肾小球性血尿,我们需要做有关检

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞...

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验实验方法原理 实验材料 人关节软骨试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶(0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白(BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBS

用普通光学显微镜对尿中红细胞分类实用价值的探讨

吉林省图们市石岘医院(133101) 郭淑娟       血尿是许多疾病所伴随的临床症状之一,由于尿液中红细胞的形态与泌尿系统疾病的种类密切相关,因而观察尿中红细胞形态的变化可判定血尿的来源,可作为区别肾小球性疾患和非肾小球性疾患及了解肾组织损害程度的参考,因此对尿中红细胞的分类问题,已越来越引起人

从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞

从人关节软骨中分离软骨祖细胞 从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 人软骨祖细胞的分化             实验方法原理 实

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​超声法

实验方法原理输入高能超声波可以破碎细胞,其机理可能与强声波作用溶液时,气泡产生、长大和破碎的空化现象有关。空化现象引起的冲击波和剪切力使细胞裂解。超声破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度及细胞类型等。实验材料细胞混悬液试剂、试剂盒缓冲液仪器、耗材超声波细胞裂解仪实验步骤1. 清洗后的组织用

肾小球疾病血尿的相关介绍

  离心后尿沉渣镜检每高倍视野红细胞超过3个为血尿,1L尿含1毫升血即呈现肉眼血尿。肾小球源性血尿常为无痛、全程血尿,可呈镜下或肉眼血尿,无凝血,也可伴蛋白尿、管型尿。如伴较大量蛋白尿和(或)管型尿(特别是红细胞管型),提示肾小球源性血尿。  可用以下两项检查帮助区分血尿来源:  (1)新鲜尿沉渣相

对基于微管的运动蛋白进行性质鉴定实验

通过微管滑行来观察基于微管的运动蛋白活性实验材料微管试剂、试剂盒PME 缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 在一个培养皿里堆一些潮湿的滤纸片,放一块盖玻片到上面。加 50 μl 含运动蛋白的溶液到盖玻片的表面并涂开。盖上盖子在室温放 5~10 分钟,使蛋白黏附在玻璃上。2. 转移盖玻片,用室温的含

细胞技术专题:大鼠肝星状细胞原代培养实验

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠

不同类别显微镜简要介绍

在细菌的形态学检查中以光学显微镜为常用,借助显微镜放大至1000倍左右可以观察到细菌的一般形态和结构,至于细菌内部的超微结构,则需经电子显微镜放大数万倍以上才能看清。检查细菌常用的显微镜有以下几种:  1.普通光学显微镜:普通光学显微镜通常以自然光或灯光为光源,其波长约0.5μm.在最佳条件下,显微

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠肝星状细胞原代培养实验_胰酶消化法

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM酶消化液

大鼠肝星状细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

显微镜简介

  在细菌的形态学检查中以光学显微镜为常用,借助显微镜放大至1000倍左右可以观察到细菌的一般形态和结构,至于细菌内部的超微结构,则需经电子显微镜放大数万倍以上才能看清。检查细菌常用的显微镜有以下几种:1.普通光学显微镜:普通光学显微镜通常以自然光或灯光为光源,其波长约0.5μm.在理想的条件下,显

活细胞直接观察实验

相差观察和摄影方法             实验方法原理 培养的活细胞在一般显微镜下观察时,细胞是透明的,反差很小,难以观察到细胞清晰结构,只有应用附有相差装置的显微镜,才能使目的物

FISH-基本技术和问题解决

荧光原位杂交(FISH) 技术可以对染色体、细胞和组织中的特异核酸序列进行检测。明确检测到全染色体或染色体某个特定区域的结构或拷贝数发生改变是人类疾病重要的预兆因子。应用于染色体分析的 FISH 可以分为中期 FISH 和间期 FISH,两者的主要区别在预处理和杂交前的细胞制备工作。用于中期分析的细

腰痛血尿综合征的实验室检查

  1、尿液检查  (1)尿常规:可有镜下血尿,但无红细胞管型。  (2)红细胞相差显微镜检查:大多数为正常形态的红细胞,少数为异形红细胞。  (3)尿蛋白:部分患者尿蛋白的分泌会超过正常范围,但24h尿蛋白定量不会超过1、5g。  (4)尿细菌培养:LPHS患者中段尿培养无细菌生长。  2、血液检

支原体污染及检测

(1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。 目前通过对国内100余株/系细胞的检测,形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。

Aβ相关乙醇脱氢酶阻断肽可减轻神经细胞的氧化应激损伤

  倒置相差显微镜观察发现rAAV/ABAD-DP-6His能明显改善过氧化氢损伤的PC12细胞的形态   在阿尔茨海默病中,Aβ与Aβ相关乙醇脱氢酶结合损伤了线粒体功能,因此阻断Aβ与Aβ相关乙醇脱氢酶结合至关重要。来自中国吉林大学第一医院吴江博士所带领的团队构建了能够持续分泌表达Aβ相关乙醇脱

隐匿性肾小球肾炎的检查化验

  一、无症状血尿  显微镜下可见持续性肾小球源性血尿和(或)反复肉眼血尿,每100ml尿液中有0.5ml血或红细胞多于5×109/L呈持续性或反复发作。部分患者感染发热或剧烈运动后出现一过性肉眼血尿,并于短时间内迅速消失。有时尿常规、血常规、肾功能、血尿酸、血糖等检查正常。肾小球源性尿红细胞形态常

olympus显微镜使用中的注意事项

  olympus显微镜按照不同的功能分类可以分为:偏光显微镜、金相显微镜、荧光显微镜、生物显微镜、体视显微镜、相差显微镜、倒置显微镜等,在使用的时候需要注意使用方式,同时需要保养。   olympus显微镜注意事项:   1. 不要经常搬移.震动显微镜,保持显微镜室干燥.清洁;   2. 不要随意

PI3K/Akt/mTOR信号通路_样本比较法

实验方法原理分析人HCC组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化水平与p53的表达及HCC临床病理参数之间的关系,评估PI3K/Akt/mTOR信号通路在HCC诊断和预后评价中的作用。实验材料HCC组织样本试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材荧光倒置相差显微镜二氧化碳培养箱流式细胞仪培养板实验步骤一、

看微生物细胞形态用什么显微镜

微生物的解释:个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。 微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。(但有些微生物是肉眼可以看见的,像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”,但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为原核微生物、空间微生物、真菌微

活化剂裂解方法制备细胞核实验

实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液仪器、耗材 塑料离心瓶Corex 管实验步骤 1. 转瓶培养 4 升 HeLa 细胞,便细胞浓度达到 1.0x106 细胞/ml。2. 细胞在 1 L 的塑料离心瓶中,用 Sorvall 的 RC-3B 离心机,H-600A 转头,3000 r/

无症状性血尿或(和)蛋白尿的临床表现与鉴别诊断

  临床表现  对单纯性血尿患者(仅有血尿而无蛋白尿),需做相差显微镜尿红细胞形态检查和(或)尿红细胞容积分布曲线测定,以鉴别血尿来源。此外,应除外由于尿路疾病(如尿路结石、肿瘤或炎症)所致血尿。对确属肾小球源性血尿,又无水肿、高血压及肾功能减退时,即应考虑此病。以反复发作的单纯性血尿为表现者多为I

肌组织细胞培养实验——心肌细胞培养实验

实验方法原理心肌组织是最早利用的培养材料,Carrel曾长期培养过鸡胚心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物。最常用的是鸡胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎儿心肌等都可应用。心肌是比较容易培养和生长的组织,可应用多种方法进行培养,如悬滴培养、组织块培养和消化培养法等,主要取心室肌培养,均能获得良好的生长效果。

活化剂裂解方法制备细胞核实验

            实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液 仪器、耗材

简述隐匿型肾炎的检查方法

  一、实验室检查:  1.尿液检查  (1)无症状血尿:显微镜下可见持续性肾小球源性血尿和(或)反复肉眼血尿,每100ml尿液中有0.5ml血或红细胞多于5×109/L呈持续性或反复发作。部分患者感染发热或剧烈运动后出现一过性肉眼血尿,并于短时间内迅速消失。有时尿常规、血常规、肾功能、血尿酸、血糖

荚膜染色实验

实验方法原理 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。

换种方法看血尿

尿红细胞位相检查要求相差显微镜,实际工作中常常不能满足条件,而以普通光学显微镜代替,多数实验室在40倍物镜下观察,对于红细胞的细微结构观察不够清晰,影响判断,笔者在实践中以湿片油镜法分析尿红细胞形态,红细胞形态清晰,弥补了非相差显微镜的缺陷,值得推荐。本文就以实际工作中的病例讨论湿片油镜法尿红细胞形