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从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验实验方法原理 实验材料 人关节软骨试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白（BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配制仪器、耗材 尼龙膜40μm筛孔（“细胞滤网”）离心管50ml 带圆锥底部便于细胞离心解剖刀片镊子 2对（1大1小）矿油凝胶（凡士林）克隆环 6 mm微量离心机分离软骨用的锁子甲手套记号笔实验步骤 A.组织收集和细胞分离(a)无菌条件下，用10号解剖刀片小心从软骨下骨下面解剖软骨（见本方案后的注解1)。将软骨薄片置于含PBSA的9cm Petri培养皿中。(b)用镊子和刀片仔细将软骨切成1 mm3小块。(C)将软骨小块转移至含18 mL链霉蛋白酶消化培养基的普通器皿或离心管中。(d)置于滚转机37℃处理1 h。(e)吸出消化液弃之......阅读全文
从人关节软骨中分离软骨祖细胞 从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 人软骨祖细胞的分化 实验方法原理
从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验 实验方法原理 实验材料 人关节软骨 试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白（BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清
从人关节软骨中分离软骨祖细胞 实验材料 人关节软骨 试剂、试剂盒 胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白（BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配
从人滑膜中分离软骨祖细胞、培养、分化 实验材料 骨关节炎患者全关节置换得到的胫骨滑膜；需要正常组织时使用新鲜的尸体组织 试剂、试剂盒 DMEM(包含4.5 g L葡萄糖和4 mmol L L-谷氨酰胺）黏附培养基：含100μg ml庆大霉素的DMEM克隆生长培养基：DM
人软骨祖细胞的分化 实验材料 人软骨 试剂、试剂盒 灭菌分化培养基PBSA胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53mmol L)PBSA配制 仪器、耗材 离心管 15ml圆锥底的离心管（50 ml)血细胞计数板微量离心器 实验步
试剂和材料： 1. 骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分； 2. 链霉蛋白酶消化培养基：DMEM/F12（1：1）、5%的FBS、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素（50mg/ml），0.2%（终浓度100μg/ml）、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mm
试剂和材料： 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分； 2.链霉蛋白酶消化培养基：DMEM/F12（1：1）、5%的F、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素（50mg/ml），0.2%（终浓度100μg/ml）、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10
实验材料： 1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，
实验材料： 1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用液配制，过滤除菌； 4
实验材料： 1. 软骨细胞来源：20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用液配制； 4. 消化液Ⅱ：0.5mg/