镍柱纯化蛋白过程中流速过快或过慢有什么影响
因为NI柱靠金属螯合层析--NI与6个或者更多的咪唑环结合而把蛋白结合下来的，这种结合里相对较弱，一般来讲，在过柱子的过程中有很多NI只与组氨酸标签中的一部分咪唑环结合，所以在这种情况下如果流速过快会阻碍他们进一步的结合，另外，流速过快大大缩短了NI与咪唑环结合的时间，减低了结合几率,所以用镍柱纯化蛋白时流速不要太快......阅读全文
柱离心法纯化质粒DNA
实验概要本实验介绍了柱离心法纯化质粒DNA的原理及操作流程。实验原理1. 离心柱结构：特殊硅基质吸附材料，特异性吸附DNA，而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下，核酸表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜，以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了核酸表面亲水薄膜的相对有序排列，形成了疏水环境。在此环境中
蛋白纯化反相柱的选择
HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量，20kDa左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说，4.6mm的内径比较常见，250mm长的柱子比150
柱离心法纯化质粒DNA实验
实验原理1. 离心柱结构：特殊硅基质吸附材料，特异性吸附DNA，而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下，核酸表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜，以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了核酸表面亲水薄膜的相对有序排列，形成了疏水环境。在此环境中，核酸与硅胶膜能有效结合，而蛋白质、代谢产物和其他污染物则不
拜泰齐推出全新Flash快速纯化系统及配套纯化柱
分析测试百科网讯 近日，Biotage（拜泰齐）宣布推出新型Selek Flash快速纯化系统和新型Sfär系列Flash纯化柱。这两种新产品将共同为有机化学和多肽化学家提供了改善其分离的机会。 拜泰齐Selek Flash快速纯化系统设计非常紧凑，具有较小的占地面积，新发布的Sfär色谱柱可
ligatrap－IgG纯化树脂和色谱柱介绍
IgG纯化树脂和色谱柱免疫球蛋白G（IgG）代表人体中约75％的血清抗体，IgG是血液循环中常见的抗体类型。IgG分子由血浆B细胞产生和释放。每个IgG具有两个抗原结合位点。人IgG1和IgG3在引发抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC）方面具有很高的活性。相反，Ig
寡聚(dT)纤维素柱纯化mRNA
实验概要本实验介绍了寡聚(dT)-纤维素柱层析法纯化mRNA。此法利用mRNA 3’末端含有Poly(A )的特点，在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时，在高盐缓冲液的作用下，mRNA被特异地结合在柱上，当逐渐降低盐的浓度时或在低盐溶液和蒸馏水的情况下，mRNA被洗脱，经过两次寡聚(dT)纤维柱后，即
蛋白过镍柱binding有白色沉淀怎么办
蛋白结合在镍柱上后，镍柱就会由蓝色变为白色，那些白色沉淀其实就是镍柱，洗脱后就变回白色了。
纯水机纯化柱的更换步骤
实验室超纯水机停机保护操作是为了保证耗材性能不受影响，再次开机水质依然为标准状态。因实验室超纯水机纯化柱内的填充物为树脂，为保证期性能，应保证其始终处于半水化的状态，如果脱水了，交换能力就会大大降低，所以实验室超纯水机如果停用时间较长，应每三天更换纯化柱内的水，因为如果一旦连续20天不换水，树脂
蛋白纯化反相柱(reversed－phase－column)的选择
HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量，20kDa左右的一般用C4或C8，再小一点的可以用C18，太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好，但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对，可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说，4.6mm的内径比较常见，250mm长的柱子比150
何时使用－SPE－纯化柱或者－96－孔板形式
SPE 纯化柱（也称为 SPE 柱）是一次性使用的塑料柱管形式。纯化柱有各种尺寸可供选择。纯化柱形式用于一次处理有限数量的样品。3mL 纯化柱是常见的纯化柱尺寸，可作为许多应用的良好起点。 以下是确定最适宜的纯化柱尺寸时的一些注意事项： 选择纯化柱体积时，应与所使用溶剂的体积密切匹配 添加
阴离子交换色谱柱纯化步骤使用能力
阴离子交换色谱柱介质的选择 离子交换介质首先要考虑目的分子的大小，因为目的分子会影响其接近介质上的带电功能集团，因此也会影响介质对目的分子的动力载量，从而影响其分离。 对于大多数纯化步骤来说，建议从开始的阶段使用强离子交换柱，可在摸索方法的过程中有一个宽的pH范围。对于已知等电点的蛋
亲和偶联－－组氨酸标签（Histag）
亲和层析法（IMAC）是目前最广泛使用的纯化技术，该技术是基于蛋白表面残基（组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等）与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合，该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上，通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球，使
蛋白质的纯化
实验概要本实验介绍了用蛋白纯化试剂盒(HisTrap HP Kit)进行蛋白质纯化的过程。主要试剂高分子量蛋白Marker购自上海华舜生物工程有限公司蛋白纯化所用的试剂盒(HisTrap HP Kit)购自Amersham Biosciences ( USA)公司0.45 pm滤膜，磷酸缓冲液，咪唑
单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化
重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物，已在国内外广泛投入临床应用，并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高，美国NIH规定必须在90%以上，因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的McAb 3F1，
McAb(单克隆抗体)亲和层析柱纯化
重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物，已在国内外广泛投入临床应用，并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高，美国NIH规定必须在90%以上，因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的 McAb 3F1
如何挑选Flash纯化柱之选择合适的固定相
固定相也就是俗称的填料，是色谱中zui为核心的部分。要确定Flash纯化柱装填的固定相，就要依次确定固定相三个方面的信息：基质种类、表面修饰/键合相、基质参数。一、基质基质是固定相构成的基本材料，常用的基质材料分为三大类：无机材料、有机材料以及复合材料。无机材料有：硅胶、氧化铝等；有机材料主要是凝胶
如何挑选Flash纯化柱之选择合适的固定相
Flash纯化柱是Flash纯化体系的心脏，好比汽车里的发动机。工欲善其事，必先利其器，挑选正确的Flash纯化柱是整个纯化最为关键的一环。而挑选合适的Flash纯化柱就像茫茫的人海中挑选另一半一样，高矮胖瘦、外貌、内涵品质各方面都要细细斟酌考虑。今天我们就聊聊纯化柱的内涵——固定相。图1. 常州三
总镍（镍离子）在线分析仪－总镍在线分析仪
测量方法：丁二酮肟(二甲基乙二醛肟)分光光度法 测试量程：（0 -0.5）mg/l,（0-2）mg/l,（0-5）mg/l,（0-20）mg/l四档量程自动切换 检测下线：0.005mg/l 分辨率：
安捷伦科技推出AssayMAP－Bravo平台和蛋白质纯化柱
安捷伦科技用于蛋白质纯化的 AssayMAP Bravo 平台及色谱柱为高通量样品制备提供自动化解决方案 2011 年 1 月 31 日，北京——安捷伦科技公司（纽约证交所：A）今日推出 ，这是专为高通量的蛋白质样品制备和纯化设计的全自动解决方案。 蛋白质纯化
多功能DNA纯化回收试剂盒(离心柱型)说明
多功能DNA纯化回收试剂盒(离心柱型) 产品编号 包装 价格 DP1501 50次 询价
pritA蛋白纯化有杂带咋办
用肝素柱进一步纯化。如果结合核酸可以考虑用肝素柱进一步纯化。镍柱纯化的时候不用咪唑梯度浓度洗杂，一般用低浓度（10 mM）的溶液洗就可以了，如果有chaperone的话可以用高盐洗一下。
生化分析型超纯水机的超纯化柱介绍
超纯化柱是通过离子交换交换原理，即是水中的正离子与离子交换树脂中的H 离子交换，水中的负离子与离子交换树脂上的OH-离子交换，从而达到纯化水的目的。通过离子交换去除离子，理论上几乎能除去所有的离子物质，在25℃时，出水电阻率可达到18.25MΩ.cm。经超纯化柱的出水水质的高低主要取决于里面装填
蛋白质柱纯化过程中用的主要仪器有哪些
柱纯化是蛋白纯化最高效的方法.首先我们需要一个带有特定标签的柱子,也可能是阴离子柱,阳离子柱或者层析柱.然后要一台纯化仪,我们实验室的是bio-red,其实最好的纯化仪是AKTA的,很耐折腾,bio-red的太敏感,大量纯化是容易出问题.其他的仪器就是纯化后工作,比如纯化好的蛋白保存,可能会用到冷冻
反渗透水处理设备混床离子交换纯化柱
混床离子交换纯化柱由阴离子交换树脂和阳离子交换树脂按比例混合而成。阳离子交换树脂用其H+交换去除水中的阳离子，阴离子交换树脂用其OH－交换去除水中的阴离子，在混床树脂中被交换出来的H+和OH－结合生成H2O，因此混床离子交换纯化柱可用来深度去除RO纯水中尚存的微量离子。小型实验室超纯水器中的混床
DNA提取方法DNA－提取后纯化：将－DNA－与色谱柱结合
离液盐对于裂解至关重要,而且对于将 DNA(或 RNA)与色谱柱结合也是如此。此外,为了增强和影响核酸与二氧化硅的结合,还添加了酒精。大多数情况下这是乙醇,但有时可能是异丙醇。乙醇百分比和体积有很大的影响。太多,你会带入大量降解的核酸和小物种,这会影响 A260 读数并降低你的一些产量。太少,可能难
为什么建议在（超）纯水系统停用期间冷藏纯化柱？
离子交换树脂是纯化柱中最重要的填料成分之一，激活的离子交换树脂是一种半水化的形式。 如果不冷藏，离子交换树脂可能脱水。一旦离子交换柱脱水，其离子交换能力失效。在湿润的状态下，残留在树脂颗粒中的细菌可以迅速繁殖，在正常室温下残留下来的细菌会滋生扩散而堵塞整个柱子。控制微生物繁殖速度的一个办法就是冷藏法
蛋白质柱纯化过程中用的主要仪器有哪些
柱纯化是蛋白纯化最高效的方法.首先我们需要一个带有特定标签的柱子,也可能是阴离子柱,阳离子柱或者层析柱.然后要一台纯化仪,我们实验室的是bio-red,其实最好的纯化仪是AKTA的,很耐折腾,bio-red的太敏感,大量纯化是容易出问题.其他的仪器就是纯化后工作,比如纯化好的蛋白保存,可能会用到冷冻
使用NTAIDA填料纯化蛋白的常见问题解析
Ni Tanrose 6FF（NTA）亲和介质是将金属离子Ni2+螯合在以氨三乙酸（NTA）为配基的琼脂糖凝胶上形成的亲和层析介质，较 IDA 结合Ni2+牢固一些。具有吸附量大、选择好、易于再生、成本低等特点，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质和多肽的分离纯化，尤其是组氨酸标签蛋白质的高效纯化。
结合在镍柱上的蛋白可以放过夜第二天洗脱吗
一般情况下是不可以的，蛋白在柱上结合时间过长可能会影响其结构的稳定性。如果本身就是结构比较稳定的蛋白质，结合上镍柱后4度放置过夜第二天洗脱问题应该也不大，但是有可能洗脱收率会降低。
用层析柱纯化填料需要用酸碱进行前处理吗
从方法上来讲，主要是亲和层析、离子交换、分子排阻（分子筛）、疏水层析和反相层析这5种；但具体到每个实验，就会根据您的实验目的（蛋白的纯度、活性、量产以及用途的不同），以及蛋白本身的性质不同