关于引物序列碱基随机分布的介绍
引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，因为这样会使引物在GC富集序列区错误引发。......阅读全文
关于引物序列碱基随机分布的介绍
引物序列在模板内应当没有相似性较高，尤其是3’端相似性较高的序列，否则容易导致错误引发（False priming）。降低引物与模板相似性的一种方法是，引物中四种碱基的分布最好是随机的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不应超过3个连续的G或C，因为这样会使引物在GC富集序列区错误引发。
随机引物法
此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983，1984)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1
随机引物标记的方法原理介绍
中文名称随机引物标记英文名称random primer labeling定 义在克列诺(Klenow)酶催化下利用随机引物引导放射性或荧光等标记的脱氧核苷三磷酸(dNTP)参入合成DNA新链的一种能够得到高比度标记的DNA探针的方法。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
快速了解反转录引物随机引物
随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体这一非特异的引物来拷贝全长mRNA。 1.特异性引物一般在增低丰度目的基因才选择使用，用得比较少。一般都推荐用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物。由于rna的二级结构破坏不完全，导致特异性
随机引物法标记－DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物，DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成（Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一，它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸（5' 端的核苷酸除外）的互补物将以同样
随机引物法标记－DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物，DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成（Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一，它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸（5' 端的核苷酸除外）的互补物将以同样的频率掺入产物。实验材料 大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Kl
随机引物法标记探针
实验概要本实验探针标记采用TAKARA公司的随机引物标记试剂盒Ver.2。实验步骤1．于1.5ml离心管中加入5μl H2O，2μl引物(N6)，5μl DNA(0.1μg-1μg)。2．充分混匀，98°C 3分钟。3．离心1秒钟，将离心管盖上的汽化水甩下。4．加入2.5μl dNTPs(各2.5m
随机引物法标记－DNA
利用寡核苷酸作引物，DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成（Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一，它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸（5' 端的核苷酸除外）的互补物将以同样的频率掺入产物。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法
随机引物法介绍DNA探针的标记方法
变性的探针溶液加入6个核苷酸的随机DNA小片段，作为引物，当后者与单链DNA多个部位互补结合后，按碱基互补原则不断在其3'-OH端添加同位素标记的单核苷酸，这样也可以获得放射性比活性很高的DNA探针。
随机引物和oligodt的区别
一般来讲，在做反转录时选用引物Oligo dt与选用随机引物Random 9mers是有差别的：1、Random 9mers ： 适用于具有HAIRPIN构造的所有RNA（rRNA、mRNA及tRNA）的反转录反应。并且合成的cDNA，任何特异型Primer Pair都可以用于PCR反应。2、Oli
随机引物的概念和用途
随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体这一不特异的引物来拷贝全长mRNA。用此种方法时，体系中所有RNA分子全部充当了cDNA第一链模板，PCR引物在扩增过程中所需要的特异性通常用此引物合成的cDNA。
随机序列库的纯化实验
实验方法原理实验材料DNA 库试剂、试剂盒氢氧化铵正丁醇TE 缓冲液尿素上样缓冲液NaCl乙醇仪器、耗材荧光薄层层析板（VWR）紫外灯剃刀刀片小孔注射器能耐受极端温度的 13 ml 离心管（Sarstedt）90℃水浴旋转混合器实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 寡核苷酸
随机序列库的纯化实验
实验方法原理 实验材料 DNA 库试剂、试剂盒 氢氧化铵正丁醇TE 缓冲液 尿素上样缓冲液NaCl 乙醇仪器、耗材 荧光薄层层析板（VWR）紫外灯剃刀刀片小孔注射器能耐受极端温度的 13 ml 离心管（Sarstedt） 90℃水浴旋转混合器实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他
随机序列库的纯化实验
实验方法原理 实验材料 DNA 库 试剂、试剂盒 氢氧化铵
常用的βactin－引物序列
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常用的βactin－引物序列
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常用DAN探针制备的方法介绍随机引物标记
随机引物标记(random primer labeling)是利用单链 DNA 与六核苷酸(hexamer)退火结合,以六核苷酸为引物,加入4种 dNTP,其中1种标有同位素或生物素,用 Klenow 片段催化合成带有标记的互补 DNA 链,标记率高而且不受琼脂糖影响。该法不适于标记 RNA。Fei
如何设定PCR引物的保护碱基？
如果您想直接对PCR产物酶切，同时想获得理想的酶切效果，一般情况下需要在酶切位点序列5’端方向增加额外的保护碱基。保护碱基的数目随酶的种类不同而不同，根据文献资料汇总，一般保护碱基有3-4个就可以了。不提倡提供过多的保护碱基，因为太多的额外碱基会增加PCR扩增的难度，同时增加合成费用。
通用引物和随机引物是一个意思吗
不是一回事。随机引物：我们在不知道研究目标任何信息情况下，利用合成好了的任意序列的引物（可以买得到），可能扩增出来的产物条带数目不定;随机引物可能会在全基因组范围内有结合位点。通用引物：一般是指某基因外围保守序列。虽然这个基因可能是序列多变的，（如同功酶），但两侧翼序列则是保守的。利用俩侧翼保守序列
分子杂交技术随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是：(1)Klenow片段没有5'→3'外切
随机引物与oligodT有哪些区别
一般来讲，在做反转录时选用引物Oligo dt与选用随机引物Random 9mers是有差别的：1、Random 9mers ： 适用于具有HAIRPIN构造的所有RNA（rRNA、mRNA及tRNA）的反转录反应。并且合成的cDNA，任何特异型Primer Pair都可以用于PCR反应。2、Oli
分子遗传学词汇随机引物
中文名称：随机引物外文名称：random primer定义：随机引物是指当特定mRNA由于含有使逆转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时，可采用随机六聚体这一非特异的引物来拷贝全长mRNA。
设计引物用cds序列和cdna序列的区别
cDNA和mRNA的序列是互补的，如果用两个引物，最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段。由于引物方向从5‘至3’，所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可。
pcr反应体系包括哪几个组分
PCR反应体系由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA聚合酶、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。设计PCR引物时的一般原则：(1)引物长度一般15~ 30碱基，过短则特异性低; 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。(2) 避免内部二级结构，避免序列内有较长的回文结构，使引物自身不
pcr反应体系包括哪几个组分
PCR反应体系由寡核苷酸(引物)、4 种dNTP、Taq DNA聚合酶、靶序列DNA和PCR反应缓冲液体系组成。设计PCR引物时的一般原则：(1)引物长度一般15~ 30碱基，过短则特异性低; 过长则会引起引物间的退火而影响有效扩增。(2) 避免内部二级结构，避免序列内有较长的回文结构，使引物自身不
序列特异性引物的作用
序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物（C）组成引物系统；在引物延伸时，A与B同时竞争靶序列上同一复性位点，扩增反应后，经凝胶电泳及放射自显影，胶片上的显带是标记同位素的引物所扩增的产物。
序列特异性引物的概念
中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定 义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统；在引物延伸时，A与B同时竞争靶序列上同一复性位点，扩增反应后，经凝胶电泳
序列特异性引物的概念
中文名称序列特异性引物英文名称sequence specific primer;SSP定 义一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物(C)组成引物系统；在引物延伸时，A与B同时竞争靶序列上同一复性位点，扩增反应后，经凝胶电泳
双链DNA探针随机引物合成法
随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是：(1)Klenow片段没有5'→3'外切
PCR技术中引物设计有哪些注意事项？
（1）碱基要随机分布，且与模板内部序列没有较高的相似性。（2）引物自身及两引物之间不应存在互补序列（少于5个相同的碱基连续排列）。（3）引物长度一般在15-30个碱基之间。过长会导致延伸温度大于74℃，不适于Taq酶进行反应。