染色体印迹的方法介绍

中文名称染色体印迹英文名称chromosome blotting定 义研究染色体DNA上某些基因位置的方法。先用适当的方法(如脉冲场电泳)分离染色体DNA,转移印迹到杂交膜上,再用待研究的基因探针杂交。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

染色体印迹的方法介绍

中文名称染色体印迹英文名称chromosome blotting定  义研究染色体DNA上某些基因位置的方法。先用适当的方法(如脉冲场电泳)分离染色体DNA,转移印迹到杂交膜上,再用待研究的基因探针杂交。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

电印迹法的技术方法介绍

中文名称电印迹法英文名称electroblotting定  义将经凝胶电泳分离的蛋白质、DNA或RNA条带通过电泳按原位转移到另外的固体支持物上形成印迹的方法。此法比靠毛细管作用的印迹法效率高,速度快。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

Southern印迹法的技术方法介绍

Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤膜或

反向免疫印迹的方法介绍

中文名称反向免疫印迹英文名称reverse immunoblotting定  义一种用于分析抗体反应克隆性质的技术。即用等电聚焦法分离待测样品中各组分,再以电泳法转印至硝酸纤维素薄膜或其他材料上,加入同位素标记的抗原共温育,反应后用酶标记抗体与之结合,从而判定与之起反应的克隆性质和数量。应用学科免疫

斑点印迹法的技术方法介绍

中文名称斑点印迹法英文名称dot blotting定  义将点状样品吸印到特定的膜上进行检测的方法。如用硝酸纤维素膜吸印固体培养基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌体后,与特定的标记探针杂交,从而直接从转化的DNA文库或噬菌体文库中筛选所需要的克隆;将不同稀释度的蛋白质吸附在膜上进行显色反应,

临床化学检查方法介绍免疫印迹技术

免疫印迹技术介绍:  免疫印迹法是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测, 具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量

染色体步移的方法介绍

染色体步移(Chromosome walking)是用于鉴定已经克隆的特定DNA片段侧翼顺序的方法。从第一个重组克隆插入片段的一端分离出一个片段作为探针从文库中筛选第二个重组克隆,该克隆插入片段含有与探针重叠顺序和染色体的其他顺序。从第二个重组克隆的插入片段再分离出末端小片段筛选第三个重组克隆,如此

蛋白质印迹法的显色的方法介绍

Western Blot显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理

蛋白质印迹法的方法和原理介绍

蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

临床化学检查方法介绍染色体介绍

染色体介绍:  常用的正常和异常染色体的命名、缩写和符号(ISCN,1978)如下:  A-G成     染色体组;  1-22      常染色体序号;  X,Y      性染色体;  /         用于分开嵌合体不同的细胞系;  +,二     放在常染色体号或组的符号之前时,表示整个染

染色体核型分析的分析方法介绍

  镜下选择染色体分散适度(不过于分散和相互重叠),染色体长短合适,染色清晰的分裂相,在油镜下观察。  1、计数  将一个细胞中的全部染色体按其自然位置划成几个小区,为了防止重数或漏数,可按其镜下形态画出简图然后计数,确定有无数目异常。人类正常体细胞2n=46,其中常染色体22对,性染色体1对,正常

southern印迹杂交的方法步骤

以哺乳动物基因组DNA为例,介绍Southern印迹杂交的基本步骤。一、 待测核酸样品的制备(一)制备待测DNA基因组DNA是从动物组织(或)细胞制备。1.采用适当的化学试剂裂解细胞,或者用组织匀浆器研磨破碎组织中的细胞;2.用蛋白酶和RNA酶消化大部分蛋白质和RNA;3.用有机试剂(酚/氯仿)抽提

关于染色体易位检测的检测方法介绍

  1.系谱分析法  系谱分析法不仅可以确定患者是否有基因病,而且对确定遗传方式也有一定作用。该分析法以已被确认的患者为线索,对系谱作回顾性调查,追踪各个家族成员的情况,包括亲属间相互关系、性别、年龄、健康状况、婚育史、生育史等,综合所有信息运用国际通用的系谱符号绘制成系谱图。根据绘制出的图解和各种

Northern印迹的制备和Northern印迹

Northern印迹的制备 预备: 1.按下述步骤,每泳道加10~20μg总RNA或 0.5~1μgpoly(A)+RNA进行甲醛/ 琼脂糖凝胶电泳,将凝胶放在紫外线透照仪上,旁边置一标尺进行拍照。 a. 总RNA(10~20μg)用下列溶液在65℃温育5min:

关于蛋白印迹仪的应用介绍

  传统蛋白分析的实验技术主要是蛋白印迹,由于操作步骤多,操作繁琐,每一步的失误都会造成全盘失败,从而重复实验,对于珍贵样品,更是要倍加小心。另外,试验流程长,结果重复性差,要达到好的实验结果,成本也会很高。自动蛋白印迹仪能将蛋白印迹处理中的所有关键步骤自动化,尤其是繁琐的清洗和孵育步骤。

分子印迹技术的分类相关介绍

  目前,根据模板分子和聚合物单体之间形成多重作用点方式的不同,分子印迹技术可以分为两类:  1.共价键法(预组装方式)  聚合前印迹分子与功能单体反应形成硼酸酷、西夫碱、亚胺、缩醛等衍生物,通过交联剂聚合产生高分子聚合物,用水解等方法除去印迹分子即得到共价结合型分子印迹聚合物。  2.非共价键法(

关于DNA印迹法的基本介绍

  Southern印迹法(Southern Blot)是将基因组 DNA经限制性内切酶酶解、琼脂糖凝胶电泳分离,使DNA片段按分子量大小排列在琼脂糖凝胶上。经碱处理凝胶使DNA变性(使双链DNA变成单链),通过具有一定盐离子浓度溶液的毛细管作用,将凝胶中变性的单链DNA片段原位地吸印到硝酸纤维素滤

免疫印迹实验的原理和方法

免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术,在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,然后利用抗原-抗体的特异性反应,从蛋白混合物中检测出目标蛋白,从而定量或定性的确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。Western blotting还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-

Southern-印迹实验——印迹法

Southern印迹法是将DNA片段从电泳凝胶中转移至膜支持物上,使DNA片段固定,因此该膜半永久性地重现出凝胶电泳的带型。实验方法原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的,稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。实验材料DNA试剂、试剂盒HClNaClTrisNaOH

分子印迹技术和基本介绍

  将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术(blotting)。  Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链,然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜放在凝胶上,上面放上吸水纸巾

染色体的提取方法

1)取30ml蓝藻溶液于10000rpm离心15分钟,将沉淀小心转至1.5mlEppendorf管中;2)用1 mlTE(PH8.0)洗沉淀,12000rpm离心10分钟,弃上清;加240μL BufferA和60μL的5M NaCl,每管加Sarkosyl(原浓度是10%)至终浓度为0.1%。3)

等位基因特异性寡核苷酸印迹的方法介绍

中文名称等位基因特异性寡核苷酸印迹英文名称allele specific oligonucleotide blot定  义一种测定基因突变的方法。即应用等位基因特异性寡核苷酸(ASO)仅与完全互补的序列结合,故1个碱基错配即足以阻止ASO探针与目的基因片段杂交;将ASO探针连接dT多聚尾巴,结合于固

DNA印迹法所需的仪器试剂介绍

1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶

DNA印迹法实验膜处理的介绍

  1)剪下一张与凝胶面积相同的硝酸纤维素膜(NCP)或尼龙膜,NL,。注意NCP也要剪去一角且不可用手触摸,粘有油腻的膜不能被湿润,也不能结合DNA。同时剪8,10张与NCP等大的干净滤纸  2)将NCP与3,4张滤纸依次漂浮于盛有双蒸馏水的带盖方盘中,使水自然从NCP的下面向上浸润,待其完全浸湿

DNA印迹法的注意事项介绍

  1、操作时戴手套,严禁用手接触凝胶和硝酸纤维素膜,  2、转移时,滤纸与膜、膜与凝胶、凝胶与滤纸桥之间均不能有气泡,否则影响DNA转移,  3、凝胶易碎,操作时应格外小心,  4、硝酸纤维素膜上的DNA固定非常重要,固定不好时DNA·在杂交过程中会脱落下来,烤膜温度过高,膜脆性增加,易碎,  5

关于分子印迹技术的应用相关介绍

  1.用于化学仿生传感器  由于MIPS对于印迹分子的高选择性,故可以作为仿生传感器的分子识别元件;这种分子识别作用可以通过信号转化器(压电晶体、电极、电阻等)输出,然后通过各种电、热、光等手段转换成可测信号,可定量分析各种小分子有机化合物。  2.色谱分离  MIPS最广泛的应用之一是利用其特异

免疫印迹法的各个阶段介绍

  免疫印迹法分三个阶段进行.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快.此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带).第二阶段为电转移:将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤

蛋白印迹仪的维护和保养介绍

  1、每次实验结束  (1)清洁管道系统,在仪器运行的最后,系统也会提示你清洁管道。  (2)清洗所有瓶子以确保下次分析可用上清洁溶液。  (3)用异丙基乙醇擦拭吸引臂和分配臂相互接触的表面。如果分析操作时有任何液体溅到两者的表面,两者将粘到一起。擦拭可确保分析操作的顺利进行。  (4)用酒精棉签

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜?

硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交最常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的应用。目

如何选择蛋白印迹实验中的印迹膜

  硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白和核酸杂交zui常用的印迹膜,是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,虽然这其中的机制还不是十分清楚,但由于硝酸纤维素膜的这个特性,而且易于封闭非特异性结合,从而得到了广泛的