关于iPS细胞建立的过程介绍

(1)分离和培养宿主细胞; (2)通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞; (3)将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程; (4)出现ES样克隆后进行iPS细胞的鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面)。......阅读全文

关于iPS细胞建立的过程介绍

  (1)分离和培养宿主细胞;  (2)通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞;  (3)将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程;  (4)出现ES样克隆后进行iPS细胞的鉴定(细胞形态、表

iPS细胞建立的过程介绍

(1)分离和培养宿主细胞;(2)通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞;(3)将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程;(4)出现ES样克隆后进行iPS细胞的鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分

iPS细胞建立的过程

(1)分离和培养宿主细胞;(2)通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞;(3)将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程;(4)出现ES样克隆后进行iPS细胞的鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分

关于iPS细胞的基本研究介绍

  iPS细胞的出现,在干细胞研究领域、表观遗传学研究领域以及生物医学研究领域都引起了强烈的反响,这不仅是因为它在基础研究方面的重要性,更是因为它为人们带来的光明的应用前景。  在基础研究方面,它的出现,已经让人们对多能性的调控机制有了突破性的新认识。细胞重编程是一个复杂的过程,除了受细胞内因子调控

IPS细胞培养过程

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells)最初是日本人山中申弥(Shinya Yamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚

iPS细胞的性质介绍

iPS细胞性质与胚胎干细胞相似,但在一些方面又存在差异。培养iPS细胞的环境与胚胎干细胞相似。传统的培养方法是将iPS细胞培养在经丝裂霉素或射线灭活的小鼠胚层成纤维细胞(MEF)组成的饲养层(feeder)上,并使用含有血清及白血病抑制因子(LIF)的培养基中。目前亦已有方法可以将iPS细胞培养在化

iPS细胞与胚胎干细胞的功能介绍

iPS细胞与胚胎干细胞拥有相似的再生能力,理论上可以分化为成体的所有器官、组织。而相比胚胎干细胞,iPS细胞面临的伦理道德争议较小,且应用该技术可以产生基因型与移植受体完全相同的干细胞,规避了排异反应的风险,因而iPS细胞在一定程度上冲击了胚胎干细胞在再生医学中的地位,被认为在再生医学及组织工程方面

关于细胞融合的过程介绍

  细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个

关于宿主细胞的感染过程介绍

  病毒通常由具有蛋白质外壳的遗传物质组成,它通过穿透细胞膜并向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。利用宿主细胞上特定的膜上病毒输送蛋白,进入感染的宿主细胞,向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。由于细胞为无性体,因此它们依赖复制蛋白质或宿主细胞的“机体”来复制自己的DNA物质。从而篡夺细胞功能

关于细胞克隆的取材过程介绍

  在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成

关于宿主细胞的感染过程介绍

  病毒通常由具有蛋白质外壳的遗传物质组成,它通过穿透细胞膜并向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。利用宿主细胞上特定的膜上病毒输送蛋白,进入感染的宿主细胞,向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。由于细胞为无性体,因此它们依赖复制蛋白质或宿主细胞的“机体”来复制自己的DNA物质。从而篡夺细胞功能

iPS细胞面临的问题

iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦,也带来了新的挑战,细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景,然而,未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题:第1,效率问题。目前,诱导产生iPS细胞的率仍然很低,这与基因导人的方式整合位点

iPS细胞的制备方法

最初由山中伸弥团队发现的iPS细胞制备(诱导)方法是以通过慢病毒载体转入数个转录因子为核心,在导入四种转录因子后,小鼠的成纤维细胞经过一定时间就会转变为状态类似于胚胎干细胞的iPS细胞。使用这种方法制备iPS细胞,首先需要一个特殊的转基因小鼠品系。这种转基因小鼠的Fbx15基因下游转入了一个βgeo

关于细胞培养的取材过程介绍

  在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成

关于细胞培养的培养过程介绍

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

关于胸腺细胞的变化-过程介绍

  淋巴干细胞迁入胸腺后,先发育为体积较大的早期胸腺细胞(约占3%)。它们经增殖后成为较小的普通胸腺细胞,其特点为开始出现T细胞抗原受体(TCR),且渐表达CD4和CD8抗原,此种细胞约占胸腺细胞总数的75%,它们对抗原尚无应答能力。  普通胸腺细胞正处于被选择期,凡能与机体自身抗原相结合或与自身M

-Nature:iPS细胞的活体生成

  Manuel Serrano 及同事首次发现,体细胞被经典“Yamanaka因子”Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc重新编程为具有多能性的过程可以在活体中实现。对从小鼠的胃、小肠、胰腺和肾脏细胞在活体中诱导生成的“诱导多能干”(iPS) 细胞所做分析显示,它们比在体外生成的iPS细

日本拟建iPS细胞库

日本京都大学教授山中伸弥5月11日在京都举行的诱导多功能干细胞(iPS细胞)国际研讨会上透露了日本建iPS细胞库的计划。 据日本《每日新闻》5月12日报道,日本规划中的细胞库将储存iPS细胞以及由其分化出来的各种脏器细胞。据山中伸弥介绍,培养iPS细胞相当耗费时日。比如,用于治疗脊髓损伤时,在患者受

iPS细胞缓步走向临床

  2006年,日本科学家山中伸弥用4种基因将小鼠体细胞在体外重编程为诱导多能干细胞(即iPS细胞)。从此,iPS细胞研究改变了基础研究的面貌,山中伸弥也因“在细胞核重新编程研究领域的杰出贡献”,成为2012年诺贝尔生理或医学奖共同得主。   iPS细胞与胚胎干细胞一样,在体内可分化为3个胚层来源

iPS细胞操作方法

操作规程一、复苏1、事先用Matrix进行培养皿/板的包被处理。平时Matrix保存在-20℃,使用之前放在4℃冰箱或冰上进行解冻。待Matrix解冻后,按1:100的比例迅速用PBS液体稀释。按6孔板每孔加1ml,150px皿加2ml,250px皿加3ml的量加入,加入后迅速摇动皿/板,使加入的M

关于动物细胞工程的过程介绍

  1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。  2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细

关于效应T细胞的作用过程介绍

  病毒在入侵人体后,在还未进入到人体细胞前,主要存在于人的体液中。在此时主要由B淋巴细胞起作用,这种方式叫体液免疫。B细胞在受到抗原直接或是间接的刺激分化成效应B细胞(即浆细胞)和记忆B细胞,浆细胞会产生抗体,抗体会与病毒或病菌进行特异性结合。但是有一部分的病毒还是可能进入到人体细胞中的,当病毒进

关于动物细胞工程的过程介绍

1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在

iPS细胞与胚胎干细胞的关系

众所周知,胚胎干细胞在所有干细胞中,拥有着独一无二的地位。胚胎干细胞是一种高度未分化细胞,它具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。但是同时也面临一些问题,对于胚胎干细胞来说,胚胎是人尚未成形时在子宫的生命形式,任何一个胚胎都是有机会发育成完整的个体,进行胚胎干细胞研究就必

简述诱导性多能干细胞的建立过程

  iPS细胞建立的过程主要包括:  (1)分离和培养宿主细胞;  (2)通过病毒介导或者其他的方式将若干多个多能性相关的基因导入宿主细胞;  (3)将病毒感染后的细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进重编程;  (4)出现ES样克隆后

中科院动物所建立高效快速的iPS重编程系统

  中科院动物研究所的科学家们,开发了一组改良版转录因子(OySyNyK),并由此建立了一个高效快速的iPS重编程系统。这项一研究于二月二十七日发表在Cell旗下的Stem Cell Reports杂志上,文章的通讯作者分别是中科院动物研究所的陈大华研究员、孙钦秒研究员以及Emory大学医学院的

iPS细胞抗癌新进展

  日本京都大学诱导多能干细胞(iPS细胞)研究所近日宣布,该所研究人员利用iPS细胞,培养出了可定向攻击癌细胞的“杀手T细胞”,朝着癌症免疫疗法实用化更进一步。  T细胞是一种免疫细胞,是免疫系统与病毒和癌细胞等作战的主力,也被称为“杀手T细胞”。京都大学研究人员早在几年前就成功利用iPS细胞培养

国际iPS细胞库正在筹建

  克隆羊多利的缔造者、英国科学家伊恩·维尔穆特日前在日本表示,英美日法等国正联合筹建一个国际iPS细胞库,推进iPS细胞在再生医疗领域的应用。   iPS细胞的全称是诱导多能干细胞,是通过对成熟细胞进行“重新编程”培育出的干细胞,拥有与胚胎干细胞相似的分化潜力,有望用于培育人体组织和器官,治疗多

PNAS:iPS细胞成功生成软骨

  Duke 大学医学院的研究人员利用诱导多能干细胞iPS生成了软骨,这种软骨能够成功生长并且可以进行分选,有望用于软骨组织修复。通过这一模式人们还可以得出患者个人的疾病研究模型,用于关节损伤和关节炎等疾病的研究。文章于十月二十九日提前发表在美国国家科学院院刊PNAS杂志的网站上。   诱导多

iPS细胞诱导中会出现细胞克隆

  记者近日从中科院广州生物医药与健康研究院获悉,该院研究员裴端卿、副研究员陈捷凯等准确定位了多能干细胞诱导过程中一个极为重要的障碍,破解了产生障碍的原因并找到了清除这个障碍的办法。该研究历时4年,成果12月2日在线发表在《自然―遗传学》上。   随着2012年度诺贝尔生理或医学奖的揭晓,iPSc