显微注射法的方法过程

一、采集受精卵(1)超数排卵:选取6~8周龄的雌性小鼠,先后腹腔注射5U孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonactotropin,PMSG)和2.5~5.0U人绒毛膜促性腺激素(humar chorionic gonactotropin,HCG),以促进排卵,然后与鼠龄为12周~l年的雄性小鼠按1:1交配。交配成功的标志是在雌性小鼠的阴道口发现白色的阴道栓。(2)取受精卵:与雄性小鼠合笼的次日上午,将确认有阴道栓的雌性小鼠用颈椎脱臼法剖杀,取出输卵管,置于培养液中,在体视显微镜下小心的切开输卵管膨大的壶腹部,用透明质酸酶溶液稍用力冲洗,使受精卵与输卵管分离,并流到培养液中,在体视显微镜下选择原核清晰的受精卵,移人装有培养液的胚胎培养皿中,然后在培养皿滴加矿物油使之覆盖在培养液表面,在CO2孵箱(37℃,5%CO2,95%空气)中培养5h左右(一般在上午10时左右取受精卵,培养至l3时可见雌、雄性原核......阅读全文

PCR测序的方法过程

PCR测序根据标记的方式不同和循环的次数不同可分为直接测序法和循环测序法。

概述透析的方法过程

  自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。  透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大

光学显微镜的石蜡切片制作过程

    I.将组织块放入带标记的盒子内,光学显微镜置于200m1液体中;    2.按选定的温度加热;测定温度。    3.光学显微镜3%戊二醛预固定15秒钟;缓冲液冲洗3次,光学显微镜每次3分钟;1 %OsO;固定15秒钟。如中断操作,预固定后仍需在4℃下保存.    用微波脱水、浸透每一步骤只需

关于读数显微镜的工作过程介绍

  首先进行调零,调节旋转螺母使标线对准X轴的整刻度线。旋转螺母共分为50格,每格0.01mm。标线在玻璃片A上,X轴在玻璃片B上。调零结束后,用硬度计给工件打上压痕,硬度计施加的力F和钢球的直径D。调节旋转螺母,使与螺母相连的触头推动玻璃片A在X轴方向上移动,两次分别与压痕相切,玻璃片A与触头间有

电缆故障定位仪弧反射法

  (二次脉冲法)在电缆故障定位中的应用的工作原理:首先使用一定电压等级、一定能量的高压脉冲在电缆的测试端施加给故障电缆,让电缆的高阻故障点发生击穿燃弧。同时,在测试端加入测量用的低压脉冲,测量脉冲到达电缆的高阻故障点时,遇到电弧,在电弧的表面发生反射。由于燃弧时,高阻故障变成了瞬间的短路故障,低压

电缆故障定位仪电弧反射法

  由于电弧反射法十分复杂,使得锤击法仍然是最通用的应用技术。这种技术比较简单,无需非凡的仪器,也不要求熟练的分析人员。而新仪器具有多功能性,用于锤击法可以使电缆的潜在损坏减少到最小。  在电缆上使用脉冲的时间尽量短,且能提高故障探测效率,是许多电力公司共同追求的目标。在地下直埋电缆和简单的地下住宅

使用后向散射法测定烟尘

1、原理当一束光照射到烟气中的颗粒物上,颗粒物在所有方向散射光,其中向后散射的光被聚焦经测尘仪的检测器检测,由仪器的放大器放大输出电压或电流信号,在一定范围内,输出信号与烟气中烟尘浓度成正比。2、仪器①后向散射颗粒物CEMS。②其余同不透明度法。3、测量方法①将后向散射颗粒物CEMS安装在烟道(或管

详细了解动物皮内注射法

  动物皮内注射法是用于牛、羊、犬结核菌素变态反应试验、绵羊痘预防接种及马鼻疽菌素皮内试验等。  该方法是用于牛、羊、犬结核菌素变态反应试验、绵羊痘预防接种及马鼻疽菌素皮内试验等。  注射部位:在肩胛部或颈侧中部三分之一处。大耳朵犬也可在耳背部。绵羊痘接种在尾根、腋下或股内侧。马鼻疽菌素皮内反应在眼

光散射法对仪器的一般要求

  散射仪 光源发出的激光强度应稳定,并且能够自动扣除电子背景和光学背景等的干扰。  采用粒径分布特征值[d(0.1)、d(0.5)、d(0.9)]已知的“标准粒子”对仪器进行评价。通常用相对标准偏差(RSD)表征“标准粒子”的粒径分布范围,当RSD小于50%(最大粒径与最小粒径的比率约为10:1)

关于细胞凋亡检测—光散射法的基本介绍

  在FCM 系统中,被检细胞在液流中通过仪器测量区时,经激光照射,细胞向空间360°立体角的所有方向散射光线,其中前向散射光( FSC) 的强度与细胞大小有关,而侧向散射光(SSC) 的强度与质膜和细胞内部的折射率有关。细胞凋亡时,细胞固缩,体积变小,核碎裂形成,细胞内颗粒往往增多,故凋亡细胞FS

“注胶”食品何以流向餐桌?

  日前温州市民郑女士在市场买了3只大虾,发现大虾体内竟被注射了不明胶状物。    之所以各种“注”法层出不穷,且大有后浪推前浪之势,不外乎指向一个“利”字。不可否认,经“注胶美容”的食品,提升了卖相,消费者被表象所迷惑。这并非食品“美容伎俩”的第一次大显身手,类似工业双氧水美白法、硫磺熏蒸法、

血小板输注指南(二)

4.2 质量监控一些红细胞血清学试验和微生物学筛查试验(包括 NAT 测试 HCV)必须进行,试验结果直接决定最终分离的成分是否可以发放。每一袋成分在制备的每一个步骤和发放前必须进行目视检查。如果血袋有渗漏、破损或缺陷,袋内空气过多,疑有细菌污染或其他的不良征象,例如血小板凝块、浑浊或颜色有不正常的

血小板输注无效(三)

     4 治疗与预防     血小板无效输注的治疗,可针对不同病因采用不同的方法,非免疫因素以治疗原发病为主,如抗感染,脾切除术,以及增加血小板的输入量来提高输注效果。免疫因素则以预防为主,可用去除白细胞制品,治疗方面可静脉输注免疫球蛋白,选择配合性血小板输注。     4.1 去除白细胞

血小板输注指南(一)

尽管此指南中的建议和相关信息在印刷出版时被认为是真实准确的,但是不论作者或发行机构都对任何可能的错误或遗漏没有任何法律责任或义务。1. 方法经使用合适的关键词在数据库中进行文献检索,并对现有的专家组出版的指南(BCSH1992;Schfffer 等,2001)包括由英国血液学标准委员会在 M

血小板输注指南(四)

5.2 推荐根据以上的研究,本指南有以下建议;这些建议与目前血小板输注标准委员会(1998)和美国临床肿瘤学会指南(Schiffer 等 2001)的规定一致:在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x10109/l 这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时

血小板输注指南(五)

7.4 肝移植手术肝衰患者由于合并凝血因子减少,纤维蛋白溶解增强及血小板减少症导致止血功能降低。这种情况在肝移植中由于大量输血及供者肝在重灌注时的纤溶亢进而放大。当前的实践是使用 TEG 指导血小板及其他成分输血(MalleStt&Cox,1992;Hunt,1998),这将使成分输血更为经济与有效

血小板输注指南(六)

8. 血小板输注禁忌症8.1 血栓性血小板减少性紫癜(TTP)BCSH 正在准备血栓性微血管病溶血性贫血的诊断与治疗指南。血小板输注短暂地与 TTP 加重有关,因此除非有威胁生命的出血,否则是禁忌使用的(Gordon 等,1987;Harkness 等,1981)。8.2 肝素诱导血小板减少症(HI

血小板输注指南(七)

10.3 血小板选择下述建议是在上一期关于 ABO 和 RhD 不相容血小板输注指南(BCSH,1992;国家血液署输血医学临床政策组,2000)及最近的临床实践(Menitove,2002)基础上进一步发展的。10.3.1 ABO 配合选择与患者 ABO 血型相同供者浓缩血小板,且只要可能即使用

临床指南:血小板输注

血小板输注的指征:骨髓功能衰竭(由于疾病、有细胞毒性的治疗和照射)在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x109/l ,这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时使用抗生素或其他不规则出血(A 等,Ⅰb 级)。对没有任何危险因素的病人,如果担心同种免疫产生血

血小板输注无效(二)

    2.4 药物抗体 当患者输注血小板而出现不明原因的PTR时,在排除其它影响因素外,应考虑药物致敏产生抗体的可能,一般患者在血小板减少症前有用相关药物史,停药后,即可得到改善,再次使用该药可出现血小板减少症状。可以引起药物过敏性血小板减少症的常见药物见表1。药物致敏引起的免疫性血小板减

血小板输注适应证

1、由疾病、化疗或放疗引起的骨髓抑制或衰竭病人,凡血小板数低于20X109/L伴自发性出血者应输血小板。血小板数低于50X109/L,某些病人也可发生小量出血,一般止血措施无效也可输注血小板。2、血小板功能异常:如血小板无力症、尿毒症、严重肝病某些药物等引起血小板功能异常伴有出血者。3、大量输血所致

血小板输注适应征

骨髓功能衰竭(由于疾病、有细胞毒性的治疗和照射) 在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x109/l ,这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时使用抗生素或其他不规则出血(A 等,Ⅰb 级)。 对没有任何危险因素的病人,如果担心同种免疫产生血小板抗体,其临

血小板输注指南(三)

4.5 新生儿用血小板除前面的要求外还应外加:成分应当不含具有临床意义的不规则血型抗体,包括高滴度的抗 A 和抗 B。成分必须为 CMV 阴性。成分由一袋单采血小板用密闭系统分装而成(通常分成 4 份)。成分血小板含量 >40x109/l。在标签上额外注明“新生儿使用血小板”。4.6 宫内输注(IU

血小板输注指南(九)

13. 血小板输注无效血小板输注无效的特征是多次输血小板均未取得满意效果。有些病人可能有一次输血小板效果不好,而以后几次效果不错。只有在 2 次及 2 次以上输血小板效果都不好,才能诊断为血小板输注无效。14. 血小板输注无效的原因有多种原因可以导致血小板输注效果不佳,可以分为免疫和非免疫两类。主要

浅谈血小板无效输注

作为血液科医生,工作中几乎每日都会有病人输血,而输血后患者是否就一定能达到理想输注效果,缓解燃眉之急呢?近段时间我们就遇上不少此类输血后,尤其是输血小板后,血小板计数仍然不升,出血仍不能有效停止的情况。“血小板无效输注”这个结论也成了近来我们反复与病人及家属交代的内容。那么就让我们一起来学习了解下关

血小板输注无效(一)

    血小板输注适用于预防和治疗血小板减少或血小板功能缺陷患者的出血,并已成为各种血液病及肿瘤患者放﹑化疗的有效支持疗法,但患者在多次输血(全血﹑红细胞﹑白细胞﹑血小板), 妊娠及器官移植后,易产生血小板相关抗体,导致血小板输注无效(PTR)。我们结合近几年国内外研究进展,对血小板

血小板输注指南(八)

11. 输注给成人预防性输注血小板时,推荐使用 1 个单位的成人治疗剂量。如果不出现血小板输注无效,这将使体内血小板水平增加 20x109/l。当血小板用于治疗活动性出血,可能需要更大剂量;血小板输注的剂量和频率取决于个体情况,无法提供通用建议。以下推荐均为 C 等,Ⅳ级:11.1 对血小板的检查医

洗涤红细胞输注建议

洗涤红细胞(washed red blood cells)是采用特定的方法将保存期内的全血、悬浮红细胞用大量等渗溶液洗涤,去除几乎所有血浆成分和大部分非红细胞成分,并将红细胞悬浮在氯化钠注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血。制备洗涤红细胞时的血浆清除率≥98%,白细胞清除率应≥80%,红细胞回

临床新鲜全血的合理输注

我国输血事业的发展各地差异较大,与发达国家相比,仍处于比较落后的状态。具体表现是不少地区成分输血的比例不高,个别医生还习惯于输全血。有些医生认为全血内含有各种血液成分,凡有输血指征者输全血比较好;有些医生认为新鲜血比保存血好,并认为越是新鲜的血越好;有些医生认为急性失血失掉的是全血,只有输全血才合理

纳米材料的粒度分析(二)

3、粒度分析的种类和适用范围 材料颗粒度分析的方法以有很多,现已研制并生产了200多种基于各种工作原理的分析测量装置,并且不断有新的颗粒粒度测量方法和测量仪器研制成功。虽然粒度分析的方法多种多样,基本上可归纳为以下几中方法。传统的颗粒测量方法有筛分法、显微镜法、沉降法、电感应法等,近年来发展的方法有