吉姆萨染液的染色步骤

根据需要量,配好工作液,此工作液常温可保存两周。按常规方法制备血涂片,待血膜干后,用甲醇固定 2 ~ 3 分钟;将血涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加稀释好的染色液,使覆盖全部血膜,室温染色15~30分钟。用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗),凉干后镜检。......阅读全文

干细胞成骨诱导后的染色方法和步骤

本文来自Cyagen赛业:http://www.cyagen.com.cn  碱性磷酸酶(ALP)是成熟成骨细胞的标志性酶,同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。   以ALP为目标物的检测方法:  1 Gomori钙钴法  【染色原理】   ALP在pH值9.4的环境下,以镁离子作为激活剂

活性染料-台盼蓝染色的原理和步骤

  在高中生物中,用血细胞计数板对酵母菌的计数不能专门计数活细胞,但也有染色试剂专门染色活细胞的,结合计数就可以知道活细胞的数目,如台盼蓝就是一种细胞活性染料。   台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,检测细胞是否存活。分子式:C34H24N6O14S4Na4。  一、台盼蓝染色的原理 

免疫荧光染色的详细步骤及应注意的细节

免疫荧光染色方法快捷,灵敏.标本是冰冻切片,还是石蜡切片?切片的厚薄?影响到一抗孵育的时间.选用较佳的一抗的工作浓度.二抗需A液B液在室温混合15分钟后再用.标本需保存在-20度.

免疫荧光染色的详细步骤及应注意的细节

  免疫荧光染色方法快捷,灵敏.  标本是冰冻切片,还是石蜡切片?切片的厚薄?影响到一抗孵育的时间.  选用较佳的一抗的工作浓度.  二抗需A液B液在室温混合15分钟后再用.  标本需保存在-20度.

免疫荧光染色的详细步骤及应注意的细节

免疫荧光染色方法快捷,灵敏.标本是冰冻切片,还是石蜡切片?切片的厚薄?影响到一抗孵育的时间.选用较佳的一抗的工作浓度.二抗需A液B液在室温混合15分钟后再用.标本需保存在-20度.

免疫组化染色具体操作步骤

  免疫组化染色具体操作步骤介绍    (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例)    1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。    5、 5~10%正

免疫组化染色具体操作步骤

   免疫组化染色具体操作步骤介绍    (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例)    1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。    5、 5~10%正常山羊血

石蜡切片(paraffin-sections)免疫组化染色步骤

1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:(1)APES:现用现配。将洗净的玻片

贴壁/悬浮细胞及组织切片进行Hoechst染色的方法步骤

Hoechst染色方法1.贴壁细胞1)   取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。2)   刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0

拟南芥花粉管苯胺蓝染色的仪器和步骤

一、仪器1. 紫外显微镜二、步骤1. 在1.5 ml 离心管里加入250 μl 冰醋酸,将雄蕊浸泡到冰醋酸里至少固定1.5小时。如果需要可将组织过夜固定。2. 将固定完的组织浸泡在1 M 氢氧化钠溶液里过夜处理,是组织软化。3. 用偏磷酸钾洗植物组织三次。(在这个阶段植物组织是易碎的)4. 用200

吉姆萨染色法

吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更不清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min.或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Sorense

姬姆萨染液使用说明(工作液,即用型)

产品简介:姬姆萨染液是由天青与伊红组成。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,被染成粉红色;嗜碱性颗粒如细胞核蛋白或淋巴细胞胞浆为酸性物质,与碱性染料美蓝或天青结合,被染成紫蓝色;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色。各类成分由

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法!

在加入或不加入代谢活化系统的条件下,使培养的哺乳动物细胞暴露于受试样品中。用中期分裂象阻断剂(如秋水仙素)处理,使细胞停止在中期分裂象,随后收获细胞、制片、染色、分析染色体畸变。通过检测受试样品诱发体外培养的哺乳动物细胞染色体畸变的能力,从而评价受试样品的致突变性及其强度。 一、材料⒈受试样品固体受

传代培养细胞染色体显示法步骤

1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12 小时后,再于37℃温箱继续培养6~10小时处理(加秋水仙素)。 3.

人类外周血染色体制备原理和操作步骤

一、原理人外周血小淋巴细胞,通常都处在G1期(或G0期),一般情况下不进行分裂。如在培养液中加入植物血凝素(PHA),这种小淋巴细胞受到刺激可转化为淋巴母细胞,进入有丝分裂。短期培养后,经秋水仙素处理,低渗和固定,即可得到大量的有丝分裂细胞。人体的1ml外周血内一般含有约1×106~3×106个小淋

原代贴壁细胞吉姆萨染色法

原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Soreen缓

光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验

光学显微镜检测肿瘤细胞形态可以:(1)辅助判断肿瘤细胞是否凋亡;(2)用于病理检查;(3)提取肿瘤细胞微细结构信息。吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;2)细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性

人类染色体核型分析实验原理及操作步骤

实验原理核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染色体分散良好,便于观察;二是秋水仙素的应用便于富集中期细胞分裂相;三是植

DNA测序方法非同位素银染色法的操作步骤

一、试剂准备1. SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。2. 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95 g丙烯酰胺,5 g甲叉双丙烯酰胺溶于140 ml 双蒸水中,定容至250 ml,0.45 mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃

罗氏染液的概念

中文名称罗氏染液英文名称Romanowsky stain定  义由伊红Y、氧化亚甲蓝、天青A和天青B溶于甲醇配成的一种最早的复合染色剂。吉姆萨染液、瑞特染液等染液配方即是在此基础上改进而成。用于染血细胞及血液寄生虫等。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

罗氏染液的染色功能介绍

中文名称罗氏染液英文名称Romanowsky stain定  义由伊红Y、氧化亚甲蓝、天青A和天青B溶于甲醇配成的一种最早的复合染色剂。吉姆萨染液、瑞特染液等染液配方即是在此基础上改进而成。用于染血细胞及血液寄生虫等。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

四种染色方法中是否都需要有加热步骤

还原染料的吸尽法用隐色体染色。各种染料的隐色体在染浴中有不同程度的聚集。聚集倾向较大的染料需要在烧碱浓度较高的染液中才能较好地分散;聚集倾向较小的染料,则需要适当降低碱浓度。并且由于它们的扩散速率较高,上染温度应该降低。所以这种染料染色,如果在常规的染色时间内升温,反而会导致上染百分率的降低。由于各

PI单染色法原理、试剂、操作步骤和注意事项

PI单染色法原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。PI介绍荧光染料PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测,英文全称是Propidi

疟原虫镜检技术经验交流

疟疾是由疟原虫寄生于人体所发生的一种寄生虫性传染病,俗称“打摆子”,属于我国《传染病防治法》规定的乙类传染病,近年来随着国内人口的流动、外出非洲等国家务工或旅游人员的增多,输入性疟疾病例也有增多的风险,但原发性病例在减少,几乎每年都有输入性疟疾的报告,这就给临床医生和实验室检验人员带来更大的挑战,对

血细胞染色—吉姆萨染色法

吉姆萨(Giemsa)染色法吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为

应用-APAAP-免疫染色和原位杂交进行序列的-MAC-分析实验

实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜

血细胞化学染色的染色方法—-糖原染色(PAS)的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。  (2)血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色(PAS)的操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液

血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理:人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素,这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应,生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀(普鲁士蓝),定位于含铁的部位。  (2)血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法:将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上,室温20~30

肥大细胞(甲苯胺蓝Toluidine-Blue-O)染色液的操作步骤

肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞,常成群的沿着小血管和淋巴管分布,也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围,一般细胞较大,直径约为20-30μm,呈圆形或椭圆形,胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组