病毒的MOI是什么意思
MOI :multiplicity of infection，感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。......阅读全文
慢病毒转染悬浮细胞效率低怎么办？
悬浮细胞是一类生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长的细胞。与贴壁细胞相比，悬浮细胞难培养，易死亡，且不易转染。对于这类难感染的细胞通常我们会优先选择病毒载体，而慢病毒载体具有可感染分裂与非分裂期细胞，表达时间长等优点，并已作为细胞治疗的理想载体得到广泛应用。然而，慢病毒感染悬浮细胞仍然会存
M13噬菌体衍生载体的制备实验——载体衍生法
M13噬菌体是一种丝状噬菌体，感染宿主后不裂解细菌细胞，只利用细胞内物质完成自身增殖，组装成完整病毒颗粒后被宿主细胞分泌而出，宿主细胞仍能继续生长分裂。为分子生物学中理想的质粒载体。基因间隔区的有些核苷酸序列即使发生突变、缺失活插入外源DNA片段，也不会影响M13DNA的复制，这为M13DNA构建克
Hematopoietic－Stem－Cell－Targeting－with－Surface1
Hematopoietic Stem Cell Targeting with Surface-Engineered Lentiviral VectorsEls Verhoeyen and François-Loïc CossetAdapted from Gene Transfer: Delivery
苏长青：miRNA治疗癌症？也许不是全能，但充满希望
在百度上输入“肝癌”二字，除了一些百科性质的内容，常常还能看到“肝癌晚期能活多久”，“家人得了肝癌怎么办”，或者是“肝癌真的没得救了吗”之类的检索项。作为最常见的恶性肿瘤，原发性肝癌也许对于其它国家来说只是恶性肿瘤排行榜的一个名字，但是对于占据了全球一半新发肝癌病例的中国来说，这种疾病好似触手
简述水疱性口炎病毒的培养特性
VSV在大多数脊椎动物、鸟类、爬行动物、鱼类及昆虫的细胞培养上可以生长。一般说来，VSV属的病毒在感染脊椎动物细胞后，可以很快引起明显的细胞病变，18～24 h即可引起细胞快速圆缩、脱落，在动物的原代肾细胞单层产生不同大小的蚀斑。而感染昆虫细胞则引起持续性感染，无细胞病变。 VSV繁殖的两个显
自由能的概念和表达式
自由能是指一个反应体系中能够做功的那一部分能量，如果体系不做功，则自由能转化为热能而散失。在25℃、1个大气压、反应物浓度为1mol/L时，这个反应体系的自由能变化称为标准自由能变化()。由于细胞内的反应常在pH=7的条件下进行，故pH=7为生物体的标准状态，以表示此时标准自由能的变化。自由能的变化
2.2.3－绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心，线粒体 RNA 沉淀下来。最
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心，线粒体 RNA 沉
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核
SARSCoV2蛋白互作网络图为老药新用提供新思路（二）
靶向SARS-CoV-2人源宿主因子的现有药物借助化学信息学工具，研究者们找到了靶向SARS-CoV-2人源宿主因子的16个批准药物，3个在研药物（临床实验阶段），以及18个临床前候选药物；另外，通过基于靶点和信号通路的文献搜索，他们还发现了13个批准药物，9个临床实验阶段的在研药物（INDs），和
pH电极保护液到底是为谁工作的？
众所周知，PH计|酸度计的电极在使用前都是被护套里的保护液保护着，是为了保持其原有的PH电势平衡不变，为了测量时会更加准确。这就是本文所说的主要名词PH电极的保护液，即3mol/L的KCI溶液。不过大多数客户买回去之后，有的没有保护液或者在运输过程中有泄漏，因为客观因素。所以要自己学会如何配置，使
痘苗病毒系统基因表达实验（二）
实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因（本实验「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录，并在感染细胞的细胞质完成
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA
钼蓝分光光度法测定合金中的砷
一、方法要点在pH0.15～1．25硫酸溶液中，As5+能与钼酸铵作用生成黄色砷钼酸，用正丁醇萃取而与其他元素分离。再以氯化亚锡还原所生成的砷钼蓝，以分光光度法测定。大量铁、镍、铬、锰、钴、铜、铝、铋、铅、锑、锡、铈无干扰。磷的干扰预先以乙酸异丁酯或异戊醇萃取而消除。硅的影响仅在溶液酸度较高时才产生
重组系统腺相关病毒产品说明
一．Cre-loxP重组系统作用原理Cre重组酶和loxP位点Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。LoxP（l
过氧化物酶体的分离和分析实验3
蛋白质及标志酶的分析试剂、试剂盒NaFMgCl2BSA棕榈酰辅酶A氯仿-甲醇液闪试剂仪器、耗材离心机实验步骤1. 准备分析试剂：缓冲液：可以采用 Tris-HCl（0.3 moI/L，pH7.5）或 MES（0.3 mol/L，pH 5.7）。0.1 mol/L NaF0.1 mol/L MgCl2
重组蛋白质的代谢标记实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用，并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育
分离核仁实验——高镁法分离核仁
实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液：0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0蔗糖 A
靛蓝二磺酸钠分光光度法测定臭氧含量所需试剂
试剂除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和重蒸馏水或同等纯度的水。①溴酸钾标准贮备溶液C(1/6KBrO3)- 0.1mol/L:称取1.3918g溴酸钾(优级纯,180℃烘2h)溶解于水,移入500ml容量瓶中,用水稀释至标线。②溴酸钾一溴化钾标准溶液C(1/6KBrO3)- 0.0
重组蛋白质的代谢标记实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
pH电极保护液到底是为谁工作的？
众所周知，PH计|酸度计的电极在使用前都是被护套里的保护液保护着，是为了保持其原有的PH电势平衡不变，为了测量时会更加准确。这就是本文所说的主要名词PH电极的保护液，即3mol/L的KCI溶液。不过大多数客户买回去之后，有的没有保护液或者在运输过程中有泄漏，因为客观因素。所以要自己学会如何配置
室外三网合一光纤配线柜应用在哪些方面？
众所周知，PH计|酸度计的电极在使用前都是被护套里的保护液保护着，是为了保持其原有的PH电势平衡不变，为了测量时会更加准确。这就是本文所说的主要名词PH电极的保护液，即3mol/L的KCI溶液。不过大多数客户买回去之后，有的没有保护液或者在运输过程中有泄漏，因为客观因素。所以要自己学会如何配置
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统 实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基
每次医生强调的血肌酐究竟有什么意义？
血肌酐一般是指内生血肌酐，是人体肌肉代谢的产物。在肌肉中，肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓地形成肌酐，再释放到血液中，随尿排泄。 因此血肌酐与体内肌肉总量关系密切，不易受饮食影响。 肌酐是小分子物质，可通过肾小球滤过，在肾小管内很少吸收，每日体内产生的肌酐，几乎全部随尿排出，一般不受尿量
重组蛋白质的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候，宿主蛋白质的合成基本终止，因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病
绝对定量滴度测定
慢病毒活性滴度用什么单位？看TU！看TU！看TU！TU=transducing units，即每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。其他的VG/mL，VP/mL都是所有病毒颗粒数，死的活的都算上，一片虚假繁荣，请自由玩儿去！慢病毒活性滴度怎么标定最准？绝对定量！绝对定量！绝对定量！又绝对又定量的方
底质样品的分解与浸提技术浸溶法
1.硝酸浸溶法称0.5000 g样品于50 ml校正过的硼酸玻璃管中,加4~5粒沸石(防止受热暴沸),加1 ml水润湿样品,加浓硝酸6 ml,待剧烈反应停止后,徐徐加热至沸并回流15 min。取下冷却,加水至50 ml,摇匀,放置过夜,令其澄清。取上清液进行分析。2. 0.1moI/L HCI浸提法
lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿瘤精准治疗
一箭N雕，lncRNAi实现肿瘤精准治疗 由于引起肿瘤的发生是一个复杂的网络，因此，是否可以通过一次靶向多个OncomiR进行肿瘤治疗呢？今天，小编通过一篇发表在《Molecular Cancer Therapeutics》上的研究，来看看科学家们怎么使用lncRNAi的方法，通过靶向多个
知识分享：维真－CreloxP－重组系统腺相关病毒产品说明
一．Cre-loxP重组系统作用原理 Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码，是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能够特异性识别loxP位点。
重组蛋白质的大规模生产实验
基本方案 碱处理法 实验材料 重组蛋白质 仪器、耗材