重组蛋白质的大规模生产实验
基本方案 碱处理法 实验材料 重组蛋白质 仪器、耗材 培养瓶 过滤器 实验步骤 1. 在悬浮培养液中培养Sf9细胞,并使之适应无血清培养液。 2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增Sf9细胞,将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂,另用一平盖接在另一侧臂。将一段短管(约6英寸或15 cm)装在通气孔中,末端连接一滤器,借助张力器用管索将管子与通......阅读全文
重组蛋白质的大规模生产实验
基本方案 碱处理法 实验材料 重组蛋白质 仪器、耗材
重组蛋白质的大规模生产实验——基本方案
蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。实验材料重组蛋白质仪器、耗材培养瓶过滤器实验步骤1. 在悬浮培养液中培养Sf9细胞,并使之适应无血清培养液。 2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增Sf9细胞,将合适大小的两
杆状病毒系统蛋白质表达实验——重组蛋白大规模生产
实验材料草地夜蛾细胞(Sf 9)高滴度重组病毒仪器、耗材无血清昆虫细胞培养基1~10 L 旋转培养瓶10.16 cm 管索张力器多旋转瓶揽拌台27℃ 培养箱供气泵实验步骤1. 在悬浮培养液中培养 Sf 9 细胞,并使之适应无血清培养液(基本方案 1)。2. 准备旋转培养瓶,用于按比例扩增 Sf 9
高纯度硅烷实现大规模生产
12月21日,记者从上海交通大学获悉,由该校教授肖文德领衔研发的具有自主知识产权的硅烷大规模生产新技术600吨/年中试生产项目,在河南平煤神马集团试车成功,并已连续稳定生产出纯度大于99.9999%的高品质硅烷产品。该项目的成功标志着高纯度硅烷大规模生产技术获得突破。 据了解,我国电子和大规模
慢病毒大规模生产面临的挑战
慢病毒作为基因载体在治疗各类遗传性和后天性的人类疾病中倍受欢迎。从基础研究发展到临床阶段,高浓度纯化的载体需求量越来越大,相应的方法也层出不穷。目前大多数慢病毒的生产是在方瓶、平皿等体系中加入胎牛血清贴壁培养HEK293细胞系(293T和293E),通过多质粒瞬时转染包装得到病毒,但是该方法难以
重组蛋白质的定义
根据其定义,重组蛋白质的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。
重组腺相关病毒载体的生产实验
瞬时转染 293 细胞制备无腺病毒重组腺相关病毒载体实验材料293组织培养细胞系pSub201质粒pXX2质粒pXX6质粒试剂、试剂盒完全DMEM 10%FBS培养基完全IMDM 10%FBS培养基CaCl2纯DMEM 2%FBS 培养基干冰 乙醇浴硫酸铵饱和硫酸铵乙醇PBS仪器、耗材组织培养板—次
重组病毒的蛋白质分析实验
实验材料 Sf细胞试剂、试剂盒 胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材 培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤 1. 接种2.5×108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中,27℃温育≥ 2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml
重组病毒的蛋白质分析实验
实验材料Sf细胞试剂、试剂盒胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤1. 接种2.5x108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中,27℃温育≥2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml 病毒贮液中取0.5
体外大规模生产红细胞破解血源紧缺难题
记者7日从中国科大附属第一医院(安徽省立医院)获悉,该院血液内科程临钊、刘森泉团队对红细胞终末分化所需的营养成分进行系统性探索和优化,成功建立了一种全新的化学成分明确的红细胞诱导分化体系。这一成果为将来体外大规模生产人红细胞提供了新的方案,日前在《先进科学》杂志在线发表。目前,红细胞和其他血液制品,
陶瓷企业在河南大规模建生产线
离“瓷都”有多远? “中原瓷都”的设想破茧而出。 在内黄人眼中,打造“瓷都”算的都是经济账。据统计,全国每年新增住宅建筑面积约20亿平方米,而在内黄县所在中原市场在6亿平方米以上,消费群体辐射范围可达800多公里,涉及武汉、石家庄、北京、天津、西安等区域。今后10年乃至20年内,
重组蛋白质的合成方法
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前主要应用的重组蛋白的表达载体包括原核细胞如大肠杆菌、真核细胞如酵母、昆虫细胞以及CHO细胞等,重组蛋白的产
“动态成壳”新法或助大规模生产聚变能
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504985.shtm 科学家们使用激光演示了“动态成壳”概念的关键步骤。图片来源:罗切斯特大学科技日报北京7月17日电 (记者刘霞)太阳之所以能量源源不断,就在于它内部一直进行着大量核聚变反应。核
“动态成壳”新法或助大规模生产聚变能
太阳之所以能量源源不断,就在于它内部一直进行着大量核聚变反应。核聚变反应产生的聚变能具有清洁、廉价和可靠等特性,被视为理想的能源,但在地球上大规模复制太阳内部的这一过程面临诸多障碍。美国科学家首次通过实验,证明一种名为“动态成壳”的方法,或有助实现聚变能的大规模生产。相关研究论文刊发于最新一期《
除氧可提高大规模生产石墨烯质量
石墨烯被称为“21世纪的神奇材料”。自2004年发现以来,这种单层碳原子材料一直因其众多独特性能而备受推崇。但目前大量生产的石墨烯有个缺点:质量不高。现在,美国哥伦比亚大学和加拿大蒙特利尔大学联合研究团队开发出一种新方法,利用无氧化学气相沉积(OF-CVD)法来净化石墨烯,从而大规模生产高质量石墨烯
大规模稳定生产青蒿素的新方法
疟疾是最具挑战性的疾病之一。直到现在,它对世界上近一半的人口仍是真实和持续存在的威胁。据世界卫生组织统计,20年前每年有200万人死于疟疾,2015年仍有2亿1200万例感染,将近43万人死亡。 治疗疟疾的首选药物是我国科学家屠呦呦发现的青蒿素。2001年之前,世界各地的卫生保健组织使用单一成
除氧可提高大规模生产石墨烯质量
科技日报讯 (记者张佳欣)石墨烯被称为“21世纪的神奇材料”。自2004年发现以来,这种单层碳原子材料一直因其众多独特性能而备受推崇。但目前大量生产的石墨烯有个缺点:质量不高。现在,美国哥伦比亚大学和加拿大蒙特利尔大学联合研究团队开发出一种新方法,利用无氧化学气相沉积(OF-CVD)法来净化石墨烯,
特斯拉拟为绿色电网大规模生产储能产品
特斯拉能源(Tesla Energy)进军储能市场,不仅为住宅也为工厂提供服务,由此带来的新技术值得关注。而且,可能由此吸引新的资金和投入带来规模经济,降低成本。 最终,储能技术的概念和费用将会被广泛接受。大多数人认为这项技术是,晚上将电网中的电力储存在电池中,然后在电力需求最高和没有太阳时使
重组蛋白质的代谢标记实验
由于重组蛋白质表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病
重组蛋白质的途径和应用介绍
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前主要应用的重组蛋白的表达载体包括原核细胞如大肠杆菌、真核细胞如酵母、昆虫细胞以及CHO细胞等,重组蛋白的产
检测表达的重组蛋白质的方法
检测表达的重组蛋白质的检测方法有,首先采用DNA分子杂交技术,找到目的基因。其次检测目的基因是否转录出了mRNA,最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,进行抗原抗体杂交。
重组蛋白质的代谢标记实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
重组蛋白质的代谢标记实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1. 接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用,并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育
体外大规模生产红细胞研究取得突破性进展
近日,中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)血液内科、中国科大血液和细胞治疗研究所程临钊、刘森泉团队在体外大规模生产红细胞研究领域取得突破性进展。团队对红细胞终末分化所需的营养成分进行系统性探索和优化,成功建立了一种全新的化学成分明确的红细胞诱导分化体系,为将来体外大规模生产人红细胞提供了新的
大规模蛋白质相互作用研究方法进展(一)
来源:生命科学 关 薇, 王 建, 贺福初*(军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850) 摘 要:随着2000 年酵母大规模蛋白质相互作用网络图谱的成功描绘,蛋白质相互作用特别是大规模蛋白质相互作用研究成为生命科学领域的又一个研究热点。酵母、果蝇、线虫以及人类蛋白的大规模相
大规模蛋白质相互作用研究方法进展(三)
图1 TAP亲和层析纯化原理[14] 注:A:标签中的ProteinA 与固化的IgG 结合缓冲液淋洗去除不能结合的杂蛋白,TEV 酶切分离ProteinA 和靶蛋白;B:利用CBP(Calmodulin binding peptide)-Calmodulin 的相互
全球最大规模人类血液中蛋白质研究启动
为了更好地了解疾病的进展和治疗方法,科学家近日启动了全球最大规模的人类血液中蛋白质研究。据《科学》报道,该项目是英国健康研究机构——英国生物银行和十几家制药公司正在进行的合作的一部分,旨在测量50万人血液样本中5400种蛋白质的水平。组织者表示,对于其中一些人,研究人员将分析相隔数年的两个不同样本,
大规模蛋白质相互作用研究方法进展(二)
这一经典的蛋白相互作用研究方法接近于体内环境,那些瞬时、不稳定的两两相互作用也可以被检测到,并且与内源蛋白的表达无关[6]。鉴于这些优点并结合简便高效的Gateway表达载体构建方法[7],在大规模的蛋白质-蛋白质相互作用研究中酵母双杂交系统得到了最为广泛的应用。Rain 等[8]用该法绘制了人类胃
大规模蛋白质相互作用研究方法进展(四)
表1 蛋白质相互作用分析相关数据库及网站 网站 资源类型 网址 DIP 蛋白质相互作用http: //dip.doe-mbi.uda.edu INTERACT 蛋白质相互作用http: //bioinf.man.ac.uk/interactpr.htm ProNet 蛋白质相互作用ht
重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量
重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量按Qiagen公司的操作手册进行,具体步骤如下。一、重组蛋白质的诱导表达1.挑取转化有质粒的单菌落,接种于3ml 选择性LB液体培养基中,37 oC,250 rpm/min振摇培养过夜。2.次日将培养过夜的菌液500 μl再接种于10 ml(1:20)选择性LB液体