蛋白体外表达纯化
实验目的：获得目的蛋白的粗蛋白，构建反应体系；表达载体：pLM303；步骤： 1.挑菌小摇，5 ml，37℃过夜；可保菌； 2.取1 ml加到30 ml LB k+培养基中，37℃，约1.5 h，到OD600约为0.6； 3.取2 ml 作为IPTG加入之前的对照；加入IPTG至终浓度2.5 mM（1 M IPTG母液加75 ul 到30 ml 培养基中），28℃，180 rpm，培养5小时； 4.菌液可以4 ℃保存20天左右； 5.取1 ml超声破碎，取上清，SDS-PAGE检测蛋白是否表达；利用IPTG加入之前的菌液破碎之后的上清作为对照；......阅读全文
myTXTL®－体外蛋白表达系统的特点
体外蛋白表达系统 Arbor Biosciences是基于大肠杆菌的体外蛋白表达系统：myTXTL无细胞体外蛋白表达系统(Arbor Biosciences中国代理) 在大肠杆菌蛋白表达实验中，我们经常会遇到蛋白表达不出来、表达出的蛋白没有活性、蛋白表达过程中容易形成包涵体等情况，还要分析出现这
蛋白体外表达纯化
实验目的：获得目的蛋白的粗蛋白，构建反应体系；表达载体：pLM303；步骤： 1.挑菌小摇，5 ml，37℃过夜；可保菌； 2.取1 ml加到30 ml LB k+培养基中，37℃，约1.5 h，到OD600约为0.6； 3.取2 ml 作为IPTG加入之前的对照；加入I
保定米奇生物：体外蛋白表达系统特点
在大肠杆菌蛋白表达实验中，我们经常会遇到蛋白表达不出来、表达出的蛋白没有活性、蛋白表达过程中容易形成包涵体等情况，还要分析出现这些情况的原因。1、目的蛋白不适合在大肠杆菌中表达。包括稀有密码子、mRNA结构、跨膜区等；2、表达条件需要进一步优化。比如温度、分子伴侣、适合的表达宿主等；3、采用哪种温和
体外蛋白质降解的重要意义
一是替代了体内细胞外的蛋白质降解。通常人们食用蛋白质食物，需经人体消化系统进行消化，即蛋白质降解，降解成氨基酸和小肽后，通过人体小肠吸收而被组 织利用。我们进行体外蛋白质降解，获得与人体降解的效果一样的营养物质，减少了人体肠胃降解蛋白质功能的负担，这对人体消化器官的养护以及防止衰老退化有 着重要
超滤法检测体外多胺结合蛋白的分析
实验概要本试验描述了使用大肠杆菌或酿酒酵母产生的鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白和放射性多胺来衡量多胺直接结合鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白的效率。实验原理多胺是所有活细胞内的脂质阳离子小分子化合物，以腐胺、精脒和精胺为主要代表。已揭示在某些重要的生物过程中，例如DNA、RNA和蛋白质的合成中，多胺可能具有一定的作用。但
科学家发现协助线粒体外膜蛋白嵌入的关键蛋白
线粒体外膜蛋白不仅可以调控线粒体与其他细胞器的分子信号传递，还能够促发受损线粒体通过自噬方式降解从而维持细胞线粒体稳态。线粒体外膜蛋白是如何嵌入线粒体膜的机制仍有待揭示。美国麻省理工学院和加州理工学院的研究团队报道了一种协助蛋白嵌入线粒体外膜的蛋白质，相关成果在《Science》发表，论文的标题
帕金森体外模型帕金森体外模型
体外培养的中脑多巴胺能神经元MPTP损伤模型l实验操作：实验采用胚胎龄14一16天的大鼠，剖子宫取胎，取胎鼠中脑腹侧区。可将多个胚胎来源的组织收集在一起，置Fl2培养基（Gibco）至35mm的培养皿中，以细剪刀剪碎。将2ml含0.125％的胰酶的F12加入到组织中，该混合物于37oC孵育10分钟后
步进式平衡透析，药物血浆蛋白体外结合研究
简介胰高血糖素样肽-1可诱导胰岛素的葡萄糖依赖性刺激，降低胰高血糖素分泌，可用于2型糖尿病的治疗，但其易被二肽基肽酶-4降解，体内半衰期仅为1h。利拉鲁肽是胰高血糖素样肽-1类似物，其交联到16C脂肪酸残基，促进可逆的自身缔合，并结合至血浆白蛋白，半衰期可延长至13h。药物的血浆蛋白结合受诸多因素影
实验方法丨蛋白质体外瓜氨酸化
组蛋白的翻译后修饰过程对 DNA 转录，染色体功能以及维护细胞信号传导通路的正常运行具有重要的作用，瓜氨酸化是由称为蛋白质精氨酸脱亚胺酶（Protein Arginine Deiminases，PADs）的酶家族催化的许多关键组蛋白修饰手段之一。PADs 催化肽基精氨酸水解，在组蛋白上形
NIBS学者JCB发现线粒体外膜蛋白降解的新途径
2018年1月2日,北京生命科学研究所蒋辉实验室在《journal of cell biology》杂志发表了题为 “Mitochondrial inner-membrane protease Yme1 degrades outer-membrane proteins Tom22 and Om4
体外诊断试剂中重组人血清白蛋白的应用
体外诊断（In Vitro Diagnosis，IVD）是指将血液、体液、组织等样本从人体中取出，使用体外检测试剂、仪器等对样本进行检测与校验，按照方法学分为生化诊断、免疫诊断、分子诊断三大类。体外诊断市场容量非常大，其中免疫诊断中的化学发光技术因其有高灵敏度、宽的线性范围、精确的定量检测、结果稳定
体外转录
· In Vitro RNA Transcription (Promega)For in vitro preparation single-stranded RNA probes or microgram quantities of defined RNA transcripts f
克隆化基因体外合成蛋白质分析DNA蛋白质相互作用实验
体外合成的蛋白质对于测定一个克隆的基因是否编码一个特异的DNA结合蛋白， 以及分析DNA-蛋白质相互作用都是极为有用的。为了检测DNA的结合能力，可将标 记的蛋白质与特异的DNA片段共温育，用非变性丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质-DNA复 合物与游离的蛋白质分离开来。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版
用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析DNA蛋白质相互...
用克隆化基因在体外合成的蛋白质分析DNA-蛋白质相互作用实验实验方法原理 实验材料 含有所需结合位点的质粒DNA试剂、试剂盒 35S标记的蛋白5×结合缓冲液10 mg mL poly (dl-dC) • poly (dl-dC)或其他的大分子载体 DNA加样缓冲液45%甲醇 10%乙酸EN3HANC
siRNA体外转染——GenMuteTM－siRNA体外转染的优化
GenMuteTM siRNA转染试剂（Cat#SL100568）是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM，过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例，如下步
用克隆化基因在体外合成蛋白质分析DNA蛋白质相互作用
基本方案 实验方法原理 实验材料 含有所需结合位点的质粒DNA
体外重组的定义
中文名称体外重组英文名称in vitro recombination定 义在体外对生物的遗传物质或人工合成的基因进行改造或重新组合形成新的核酸分子或新的基因的手段。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
体外培养的概念
中文名称体外培养英文名称in vitro culture定 义将活体结构成分（如活体组织、活体细胞、活体器官等）甚至活的个体从体内或其寄生体内取出，置于类似于体内生存环境的体外环境中生长和发育的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
体外重组（in－vitro－recombination）
载体与外源DNA分子体外重组时，如何选择优化连接条件以达到最高的重组率。因此有必要根据影响连接效率的因素综合考虑连接条件。影响连接效率的因素很多，如反应温度、插入片段和载体之间的摩尔比、DNA末端性质、反应时间、ATP浓度等。1. 反应温度是比较重要的影响因素。因为连接酶的最适反应温度为37℃，
什么体外消化试验？
体外消化试验即是在实验室模拟某些动物体消化道环境，用待测酶制剂进行体外消化饲料等动物食品，并测定消化前后各营养成分(干物质、蛋白质、氨基酸、有机物质、淀粉及纤维素等)的消化率，以判定酶制剂的消化效果。进行体外消化试验有一定的难度，因为动物消化道内环境是一个动态变化的复杂环境，它受到很多因素(包括动物
体外转录合成单链RNA探针:体外转录法
体外转录法l 体外转录合成单链RNA探针1. 用适当的限制酶消化超螺旋质粒DNA制备5 pmol的线性模板DNA。取一小份消化的DNA（100ng）进行琼脂糖凝胶电泳分析。如有必要，再补加限制性酶进行温育，直至不再残存痕量的未消化DNA。2. 如必须用产生3’突出端
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TN
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TNT 快速超级混合液 T7TNTPCR 增强液仪器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 离心机 水浴槽 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置实验步骤 ―、材料与设备1) 无核酸酶污染的水。2)[35S] 标记的甲硫氧
“机器子宫”体外合成胚胎
藏在母体深处的胚胎发育过程是大自然最大的秘密之一，现在，科学家为了解这个秘密打开了一扇新的窗口。他们首次在不需要精子或卵子的情况下，利用干细胞制造出人造小鼠胚胎，并使用一种创新的生物反应器培育该胚胎，使其成功在子宫外生长。没有参与此项工作的荷兰莱顿大学医学中心干细胞生物学家Niels Geijsen
体外DNA重组技术6
六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受态细胞的制备方法和转化实验的基本操作。【实验原理】将重组质粒转入大肠杆菌的过程称为转化。转化所用的大肠杆菌需要用物理或化学方法特殊处理，使重组DNA分子容易进入细胞内，被处理后易于接纳DNA分子的细胞称作感受态细胞。下面介绍感受态细胞的制备。【实验试剂与器
基因的体外编辑介绍
由于体内的细胞发生变异，功能失调甚至癌变，一种简单的方法是“修复”体外的细胞，然后将其注入体内，以恢复最初受损的功能。最典型的例子是近年来流行的CAR-T技术（在体外用病毒转染T细胞，使其能够识别肿瘤表面的某些蛋白质），以及在体外编辑干细胞。这种方法的优点是可以管理的。毕竟，编辑是在身体之外进行的。
体外培育牛黄的成分
本品以牛科动物牛Bos taurus domesticus 、melin的新鲜胆汁作母液，加入去氧胆酸、胆酸、复合胆红素钙等制成。[1]
什么是体外诊断
体外诊断是指将样本（血液、体液、组织等）从人体中取出后进行检测进而进行诊断，是相对于体内诊断而言。检测过程中需要相应的仪器和试剂，而这些仪器和试剂就组成了体外诊断系统，从事这些仪器和试剂研发、生产和营销的企业就形成了体外诊断产行业，它汇集了生物、医学、电子、机械等相关技术。 体外诊断产品按检验医学
体外诊断准备加码
体外诊断，即 IVD（In Vitro Diagnostic），是指在人体之外，通过对人体样本（各种体液、细胞、组织样本等）进行检测而获取临床诊断信息，进而判断疾病或机体功能的产品和服务。 体外诊断在医疗领域被誉为“医生的眼睛”，是现代检验医学的重要构成部分，临床应用贯穿了疾病预防、初步诊断、
mESCs体外EBs分化鉴定
实验概要mESCs体外EBs分化鉴定主要试剂0.25%Trypsin，细胞基础培养液实验材料60 mm、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、倒置显微镜实验步骤（1）常规方法消化细胞（参见胚胎干细胞传代方法），吹打成单细胞。（2）将单细胞移至60 mm或100 mm培养皿中，改用细