张锋最新论文:这种人体天然蛋白可形成病毒样衣壳,可被改造为mRNA递送载体

基于RNA的治疗方法(包括mRNA疫苗),具有预防和治疗广泛疾病的巨大潜力。为了实现这一潜力,我们需要一套有效的递送载体,将治疗性RNA货物有效包装并安全地递送到特定的组织中。 目前已经开发出多种递送方式,包括非病毒递送载体,例如脂质纳米颗粒(LNP),以及病毒递送载体,例如腺相关病毒(AAV)。然而,这些方法的广泛适用性受到多种因素限制,包括递送货物的大小限制、免疫原性、组织特异性靶向问题以及生产的可扩展性。 早在2021年8月,张锋团队在 Science 期刊发表论文【1】,利用人类基因组中的逆转录病毒样蛋白PEG10,开发了一种全新的RNA递送平台——SEND,该系统能够在mRNA周围形成球形保护性衣壳,从而实现对mRNA的封装和递送。 2024年3月5日,张锋教授团队在《美国国家科学院院刊》(PNAS)发表了题为:Human paraneoplastic antigen Ma2 (PNMA2) forms ic......阅读全文

关于活载体病毒蛋白疫苗的简介

  将编码病毒蛋白的基因插入其他活病毒或细胞基因组中并用之感染动物或人体,使外源基因在宿主细胞表达,可产生对基因产物及载体的免疫应答。活病毒载体包括痘苗病毒、杆状病毒和腺病毒等。研究较多的是痘病毒疫苗。痘病毒疫苗在感染宿主细胞胞浆中复制,无致癌性,此类疫苗可诱导机体产生细胞免疫和体液免疫且疫苗易于生

关于慢病毒载体的包膜蛋白介绍

  采用表达水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G的质粒和双嗜性小鼠白血病病毒(MLV)包膜蛋白Env的质粒,分别取代表达HIV本身包膜蛋白Env的质粒,使HIV-1载体颗粒包上了VSV或双嗜性MLV的 包膜。这样做的结果至少具有三个方面的积极意义:  ①包膜的更换进一步降低了慢病毒载体恢复成野生型病毒的

腺病毒载体综述

腺病毒的一般特性    腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D

病毒包装技术——病毒与非病毒载体

基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,一般实验方向

简述慢病毒载体的载体质粒

  载体质粒上HIV-1的顺式序列通常包括两端的LTR、剪切位点及包装信号Ψ等。此外,研究表明,gag基因5′端的序列可提高载体RNA的包装效率;Rev蛋白需要与Rev反应元件(RRE)相作用,将未剪切的载体转录产物从细胞核转运到胞浆。因此,Naldini等在载体上保留了gag基因5′端350bp的

科学家发现天然抗流感病毒蛋白

论文发表于《细胞》;有助于流感疫苗的研发   美国科学家通过在家禽和猪身上进行试验,发现了一类抗病毒蛋白——干扰素诱导跨膜蛋白家族,其中又以IFITM3蛋白尤其能够对抗甲型流感病毒、西尼罗河病毒、登革热病毒等多种病毒。科学家表示,这种蛋白或许可以帮助人类对抗流感病毒,也有助于流感疫苗的研发。相关研

病毒载体与埃博拉病毒保护性抗原GP蛋白重组的疫苗

  如重组水泡口腔炎病毒(VSV)疫苗,其表面有一个糖蛋白,作用是识别宿主细胞。这个蛋白就相当于一把钥匙,打开人体细胞那把锁之后,就可长驱直入了。研究者对这种病毒进行了转基因,把它原有的糖蛋白用埃博拉病毒表面的糖蛋白替换。改造之后的VSV疫苗既能让机体产生针对埃博拉病毒的抗体,同时又没有致病性。  

腺病毒载体的分类

第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所

腺病毒载体综述2

其他疗法    随着高龄人口的增加,对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒,因其可以感染有丝分裂后的细胞,同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区(immunologically privileged site)中的低病原性,因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。

病毒包装技术——腺病毒载体的制备

1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄

病毒包装技术1——病毒与非病毒载体介绍

  基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。   锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,

关于催化剂载体天然矿物的介绍

  天然矿物类物质本身具有一定的吸附性和催化活性,且耐高温,耐酸碱,常被用作催化剂的载体。已被用作TiO2载体的有硅藻土、高岭土、天然浮石和膨胀珍珠岩等。刘勋等研究了几种不同天然矿物(硅藻土、蛭石、高岭土、膨润土、硅灰石和海泡石)与纳米TiO2的复合。结果表明,在6种天然矿物所制得的复合材料中,以海

腺相关病毒的载体特点

安全性好对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高载体自身免疫原性低长期表达比较稳定,易于保存和运输缺点:容量较小

腺相关病毒载体的简介

  腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

关于病毒载体的基本介绍

  病毒载体可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体(in vivo)或是细胞培养(in vitro)中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。

关于慢病毒载体的介绍

  慢病毒载体(Lentiviral vector)较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

腺病毒载体的分类介绍

  第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。  第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性

转运蛋白是不是就是载体蛋白

转运蛋白:转运蛋白是膜蛋白的一大类,介导生物膜内外的化学物质以及信号交换。脂质双分子层在细胞或细胞器周围形成了一道疏水屏障, 将其与周围环境隔绝起来。尽管有一些小分子可以直接渗透通过膜,但是大部分的亲水性化合物,如糖,氨基酸,离子,药物等等,都需要特异的转运蛋白的帮助来通过疏水屏障。因此,转运蛋白在

杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体

  这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子,可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。   如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒,含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV) N蛋白。Takehara[9]等构

病毒包装技术5——腺病毒载体的制备介绍

  1 菌液的准备   1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。   1.2. 将单

病毒包装技术——慢病毒载体构建及包装流程

一、实验流程(1和2为并列步骤)慢病毒过表达质粒载体的构建设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,PCR(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(CDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。

基于脾坏死病毒的载体

实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用 材料 试剂 氯 化 钙(CaCl2) (2mol/L) 溶 解 14. 7 g C

反转录病毒载体的制备实验

实验材料二个反转录病毒包装细胞株反转录病毒载体包含选择性标记试剂、试剂盒PBS细胞染色液组织培养皿仪器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基低蛋白质结合的纤维素乙酸盐注射器式滤器克隆形成环实验步骤展开

腺相关病毒载体的应用简介

  经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面

基于脾坏死病毒的载体

实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用材料试剂氯 化 钙(CaCl2) (2mol/L)溶 解 14. 7 g CaCl2 于 IOOml H2O 中。过滤除菌或高压灭菌。转染的细胞系: 293T 和 D17 (ATCC)甘 油(1 0 % 〜2

基于脾坏死病毒的载体

这一章描述的实验方法是基于我们关于来自S N V 及其紧密相连的R E V -A 载体的实 验 (P a r v ee n e t a L 2000)。我们曾用这两种病毒载体对各种细胞进行基因转移,包括初期的造血细胞、人脑及有丝分裂后的神经元细胞(Parveen etal.2000)。与其他反转录病

简述腺相关病毒载体的应用

  经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面

关于慢病毒载体的概念介绍

  慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在