切向流过滤技术：重组蛋白制备的得力助手
蛋白质是生物大分子，具有复杂结构和多种功能。蛋白质作为生物学“中心法则”的终产物，是生命活动的主要承担者。深入了解蛋白质结构和功能之间的关联是解锁“生命密码”和揭示所有特定生物学过程机制的关键。虽然从天然来源中提取的蛋白质为其特征研究提供了关键的起始物料，但由于样品差异，蛋白质数量匮乏和质量不一，给蛋白质生物化学领域带来了挑战。因此，重组蛋白表达的概念应运而生，该过程通过载体将编码靶蛋白（POI）的外源基因引入宿主细胞，并通过劫持宿主细胞的蛋白质制造机制产生POI的过程。四十多年前，质粒（通常以环状双链DNA分子的形式出现）被确定为细菌中外源基因的主要信使，从而开启了基因工程的新纪元，使重组蛋白表达成为可能。在过去四十年里，研究人员已开发了各种载体系统以及宿主细胞，包括原核生物（大肠杆菌）和真核生物（例如酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞），以产生接近其自然状态的广谱重组蛋白，促进生化研究、工业催化、食品加工、疫苗和治疗等方面的发展。......阅读全文
切向流过滤技术：重组蛋白制备的得力助手
蛋白质是生物大分子，具有复杂结构和多种功能。蛋白质作为生物学“中心法则”的终产物，是生命活动的主要承担者。深入了解蛋白质结构和功能之间的关联是解锁“生命密码”和揭示所有特定生物学过程机制的关键。虽然从天然来源中提取的蛋白质为其特征研究提供了关键的起始物料，但由于样品差异，蛋白质数量匮乏和质量不一，给
应用切向流技术的DNA/蛋白质样品制备方案
生命科学研究中应用切向流技术（TFF）的DNA/蛋白质样品制备方案 生命科学实验室的超滤设备 密理博提供的实验室超滤全套解决方案 尽管切向流过滤Amicon® Ultra的超速装置，提供优良的性能（使用水平吊篮转子尤佳）。更多的用于与大规模操作
mRNA药物制备的关键技术——切向流过滤的高效应用
mRNA药物作为一种新型的生物制药技术，因其在治疗和预防疾病方面的潜力而受到广泛关注。切向流过滤（TFF）技术高效率、高回收率特点，在mRNA药物制备中作用很大。一、什么是mRNA？mRNA是细胞中的一种核糖核酸，它携带遗传信息，指导细胞制造特定的蛋白质。在mRNA药物中，人工合成的mRNA被设计用
切向流过滤的脱辅基血红蛋白的制备新方法
来自美国俄亥俄州立大学等的科学家们在2020年第117期的《Biotechnology and Bioengineering》杂志上发表了题为“Novel Manufacturing Method for Producing Apohemoglobin and its Biophysical
小型切向流超滤系统简介
了解切向流超滤技术切向流过滤（TFF），也叫错流过滤（CFF），是指液体流动方向与过滤方向相垂直的过滤形式。液体流动在过滤介质表面产生剪切力，减小了滤饼层或凝胶层的堆积，从而保证了稳定的过滤速度。根据被截留的颗粒或分子大小可分为微滤MF、超滤UF、纳滤NF和反渗透RO。TFF技术目前被广泛应用于制药
流过生命之网：切向流超滤技术解锁GLP1药物制备新境界
2023年年底，Science期刊将GLP-1类药物评为年度十大科学突破（Science’s 2023 Breakthrough of the Year）之首，同时，Nature也将GLP-1研究先驱 Svetlana Mojsov 评为年度十大人物之一。在商业层面，GLP-1类药物也无愧年度明星，
切向流过滤中的分子舞蹈与技术革新
探索科学世界，我们常常被那些看似平凡却充满奥秘的技术所吸引。嘿，准备好了吗？今天我们要继续探索这个听起来有点枯燥但实际上非常酷炫的科技——切向流过滤。我想如果分子世界也有派对，那么切向流过滤技术一定派对中的“superhero”。它不仅能够巧妙地解决分子们在过滤过程中的“拥挤”问题，还能优雅地引导蛋
使用切向流过滤法纯化血红蛋白
在现代医学中，输血是出血性休克、贫血等病症重要的治疗方法，也是常规手术的重要组成部分，但是肝炎及AIDS等小概率传播风险，总是干扰着输血的安全进行。此外，输血前，还需对供体血液进行分型，并与受体血型交叉匹配，以避免出现排异现象。对此，一种相对简便的替代方法是，使用血红蛋白（Hb）类氧载体（HBOCs
DNA重组技术－酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上，并切割双链DN
TFF切向流超滤膜清洗步骤
TFF切向流超滤膜清洗步骤1. 把滤过液和回流液出口连接到清洗罐。 2. 关掉清洗罐的排液阀、打开回流和滤过口的阀门。 3. 如果您的系统采用的是离心泵，可将泵的出口阀关闭；如果您的系统采用 的是变速泵，请把泵速调到最低。 4. 从清洗剂选择表中，选出能去除系统内的堵塞物的适当清
中空纤维切向流过滤纯化HSV疫苗
简介单纯疱疹病毒2型（HSV-2）是溃疡性生殖器疱疹的主要病原，全球每年新增感染达2300万例，其治疗方式主要围绕口服抗病毒治疗展开，但已有HSV-2候选疫苗进入临床试验，包括灭活、活性衰减、亚单位、DNA及多肽疫苗等，其中，野生型病毒删除UL5和UL29基因构建的复制缺陷型HSV-2疫苗株病毒（d
切向流超滤（TFF）的原理、特点及其应用
切向流超滤（TFF）能快捷、高效地进行生物分子的分离与纯化处理；可用于低至10毫升、高达数千升样品溶液的浓缩和脱盐处理；也可以用于不同大小生物分子的分离、细胞悬液收集、以及发酵液和细胞裂解液的澄清。为什么要使用切向流超滤● 易于装配，操作简单-用管路和少许管路配件，简单地连接切向流超滤装置、泵以及压
切向流超滤（TFF）的原理、特点及其应用
切向流超滤（TFF）能快捷、高效地进行生物分子的分离与纯化处理；可用于低至10毫升、高达数千升样品溶液的浓缩和脱盐处理；也可以用于不同大小生物分子的分离、细胞悬液收集、以及发酵液和细胞裂解液的澄清。 为什么要使用切向流超滤● 易于装配，操作简单-用管路和少许管路配件，简单地连接切向流超滤装置、泵以及
DNA重组技术：酶切、连接
实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5’…G↓A
使用串联切向流过滤高效浓缩慢病毒载体
简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一，与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是，慢病毒载体可转导非分裂细胞，并可携带更多的转基因盒，在细胞中的转基因表达时间也更长，即可获得更高的滴度，而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系，但原代细胞较难
重组蛋白制备工艺优化策略
重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分，尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中，上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离，充分利用上游对下游的影响，对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签，His标签，GST标签等，不同的亲和标签选择不同的纯化方案；
切向流超滤：胶乳银纳米颗粒粒径筛选和浓缩的“绿色”...
切向流超滤：胶乳银纳米颗粒粒径筛选和浓缩的“绿色”技术银纳米颗粒（AgNP）因其抗菌特性，广泛应用于消费品、水体消毒剂、治疗药物以及生物医学设备的生产，但其适用性受粒径限制。对均质AgNP进行粒径控制，并消除稳定剂及有机溶剂的毒性影响，在技术和效率上都存在诸多挑战。切向流超滤（TFU）常用于蛋白质、
微流控芯片膜过滤技术
过滤技术的集成是微流控芯片研究的热点，从已有文献报道来看，微过滤器的形式多样，常见的有围堰式、栅栏式、阵列式及多孔膜式等。其中多孔膜结构为基础的膜过滤最具吸引力，与其他几类只能截留较大颗粒或者细胞的微过滤器相比，其优点是它可以实现分子水平的分离，具有更好的选择性。在微流控戏芯片上，多孔膜结构的引入可
重组克隆筛选（酶切鉴定）
【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理；2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统，其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说，重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入
重组质粒双酶切鉴定
既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。 你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。 pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6
使用中空纤维切向流过滤（HF－TFF）优化高浓度抗体工艺2
如图2所示，1.0mm内径纤维的起始通量高于0.5mm内径纤维（18L/m2/hr vs. 12L/m2/hr）。正如预期，通量随IgG溶液浓度的增加而降低。运行过程中，TMP恒定为5psig，直到接近运行结束时，增加至约10psig。此时，通量降低至0L/m2/hr。图2同时显示，在整个运行过程中
使用中空纤维切向流过滤（HF－TFF）优化高浓度抗体工艺1
背景/介绍抗体（Abs），或免疫球蛋白（Ig），被广泛用于许多不同的科研和治疗性应用1。特别是，单克隆抗体（mAbs）在诊断、蛋白质纯化以及医疗应用中的使用显著增加2-5。妨碍治疗性mAbs使用的一个主要障碍是皮下注射需要使用较高的浓度，因为这是优先选择的给药方法。按FDA要求，皮下给药时，注射体积
重组载体疫苗的制备过程
重组载体疫苗 将编码某一蛋白抗原的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗.
胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备
实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后，用 50% 甲醇清洗三次，时间控制在 6 小时，去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜（Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨
重组CHO细胞分离及蛋白收获技术介绍
简介：现今，通过哺乳动物细胞培养，新一代生物制药得到了前所未有的发展。本文主要介绍通过中空纤维微孔过滤，以分离哺乳动物分泌蛋白的过程。起始浓度为2×105 cell/ml，细胞外蛋白产物是一种与白介素-2相似的10kD淋巴因子，是一种潜在的肿瘤治疗药物。该应用需要去除细胞和颗粒，而不裂解细胞，同时达
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1．枸橼酸三钠还原法 （1）10nm胶体金粒的制备：取0.01%HAuCl4水溶液100ml，加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml，加热煮沸30min，冷却至4℃，溶液呈红色。 （2）15nm胶体金颗粒的
免疫胶体金技术的蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 1．待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.0
重组蛋白的定义
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的 宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统；1.原核表达系统：最常用的大肠杆菌蛋白表达，真核表达系统如酵母，哺乳动
重组蛋白的概述
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统；1.原核表达系统：最常用的大肠杆菌蛋白表达，真核表达系统如酵母，哺乳动物
重组蛋白的种类
按功能分，可分为以下几种： 1.白细胞介素（Interleukin，IL） 由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类 细胞因子。由于最初是由 白细胞产生且又在白细胞间发挥作用，所以得名，现仍沿用此名。 2.干扰素（interferon， IFN） 具有干扰病毒复制的能力，故得名。其具有十分广