关于多聚酶链反应的基本原理介绍
多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)又称体外核酸扩增技术,即对特定DNA片段进行非细胞依赖性扩增,其基本过程是将已提取的待测DNA在一对寡核苷酸引物、三磷酸核苷及耐热DNA多聚酶存在的情况下,分别于90℃、55℃和72℃下经变性、退火和核苷酸链的延伸,如此循环数十次以扩增DNA。扩增物经溴乙锭染色后作凝胶电泳,再于紫外灯下观察特定碱基对数的DNA片段,以出现橙红色的电泳带为阳性。若需进一步鉴定,可将凝胶分离的DNA回收再用特异性探针进行杂交分析。 PCR在免疫学中通常应用于癌基因、凋亡相关基因的表达、HLA的定型与基因分析、免疫球蛋白和T细胞受体多样性研究以及细胞因子、粘附分子的检测。PCR的方法有30余种,如多重PCR、巢式PCR、二次PCR、共享引物PCR、逆转录PCR、锚定PCR等等。现临床研究最常用的是逆转录PCR,现简介如下:首先提取细胞总RNA,然后在逆转录酶的作用下,以......阅读全文
简述多聚磷酸的应用
在有机合成中用作失水剂、环化剂、酰化剂,是缩合、环化、重排、取代等反应的催化剂或溶剂。有时用多聚磷酸酯(PPE)类以增加多聚磷酸在有机溶剂中的溶解度。此外多聚磷酸也用作正磷酸的代用品及分析试剂。
dna多聚酶的正常值及临床意义是什么
正常值 25cpm。 临床意义 (1) 升高:乙肝病毒持续感染者、急性乙型肝炎潜伏期、初期、繁殖期、乙型慢性肝炎、乙型慢性肝炎的e抗体阳性、DNA多聚酶高值时说明肝功能恶化。(2) 降低:乙型慢性肝炎的e抗原阳性者。
PCR(多聚酶链反应)实验原理、方法步骤和注意事项
【实验对象】特定的DNA序列。【试剂与器材】 引物(primer),根据需扩增的DNA设计相应的引物;TagDNA聚合酶; 10×PCR缓冲液(随酶一起购买);5mmol/L dNTP贮备液(商品化产品);DNA模板(需扩增的 DNA);双蒸水;矿物油;PCR反应管;微量移液器;离心机及PCR仪
检测自身免疫病:铁蛋白多聚抗原和多聚二抗检测
自身免疫疾病是机体针对自身抗原产生大量自身抗体后引起的慢性全身性疾病。因此,检测患者体内特异性的自身抗体是诊断该病的主要指标。例如,用ELISA检测原发性干燥综合征(Primary Sjogren's syndrome, pSS)患者血清中的抗M3及α-fodrin抗体,为其诊断提供了重
关于多聚磷酸的基本介绍
多聚磷酸是一种无机物,化学式为Hn+2PnO3n+1,无色透明黏稠状液体,具有腐蚀性,属二级无机酸性腐蚀物品。多聚磷酸为质子酸,能溶解多种低分子及高分子有机化合物。在有机合成中用作失水剂、环化剂、酰化剂,是缩合、环化、重排、取代等反应的催化剂或溶剂。有时用多聚磷酸酯(PPE)类以增加多聚磷酸在有
多聚体的结构和作用
多聚体是由单体(monomers)结合而成的分子。生物分子(如蛋白质、核酸、糖)都是多聚体(polymers)。
多聚腺苷酸过程图解
切割及多聚腺苷酸化特异因子(CPSF)及切割活化因子(CstF)两个蛋白质复合物会开始与末端的RNA聚合酶Ⅱ结合。当RNA聚合酶Ⅱ前进时经过多聚腺苷酸化信号序列的CPSF,及CstF转移至新的mRNA前体,CPSF会与AAUAAA序列结合,而CstF会与其后的GU序列或充满U的序列结合。CPSF及C
多聚核糖体的定义
多聚核糖体(polyribosome)是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA分子上,形成的似念珠状结构。在合成多蛋白质时,核糖体并不是单独工作的,常以多聚核糖体的形式存在。一般来说,mRNA的长度越长,上面可附着的核糖体数量也就越多。 这样,一条mRNA就可以在几乎同一时
多聚腺苷酸过程图解
切割及多聚腺苷酸化特异因子(CPSF)及切割活化因子(CstF)两个蛋白质复合物会开始与末端的RNA聚合酶Ⅱ结合。当RNA聚合酶Ⅱ前进时经过多聚腺苷酸化信号序列的CPSF,及CstF转移至新的mRNA前体,CPSF会与AAUAAA序列结合,而CstF会与其后的GU序列或充满U的序列结合。CPSF及C
链酶蛋白酶的配制方法
自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染,经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下:把该酶的粉末溶解于10mmol./l Tris?HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中,配成20mg/ml浓度,于37℃温育1h。经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中,保存-20℃。
食物过敏原的检测和定量方法PCR多聚酶联反应法
PCR多聚酶联反应 以DNA为测试对象的检测方法越来越多地应用到外来食物的检测中,如转基因谷物等。PCR方法对食物中特定过敏原的检测具有专一性和灵敏度,但是,PCR方法不能检测抗原或特定蛋白,因此检测结果不能与食物的真正过敏性相关联,而且食品加工过程对蛋白和DNA的影响不同,在一些加工工序
多聚腺苷酸聚合酶的本质是蛋白质还是RNA
不对,多聚腺苷酸聚合酶是mRNA转录后加工过程用来加多聚腺苷酸尾巴的,既不需要摸板也不要引物,还有RNA聚合酶不需要引物
饲料所在多聚半乳糖醛酸酶催化机制方面取得重要进展
近日,从中国农业科学院饲料研究所获悉,由姚斌研究员领衔的饲用酶工程创新团队在多聚半乳糖醛酸酶催化机制方面取得重要进展。研究基于嗜热真菌(菌株名Achaetomium sp. Xz8)来源的高比活内切多聚半乳糖醛酸酶晶体结构,以活性T3环状连接区(loop区)为研究靶点,系统研究环状连接区上底物
多聚核蛋白体的定义
多聚核蛋白体是mRNA链上多个互相隔离的核糖体(与已合成的那一部分蛋白)的串珠状复合物。
简述多聚核糖体的意义
在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成若干条蛋白质多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体。 在mRNA的起始密码子部位,核糖体亚基装配成完整的起始复合物,然后向mRNA的3’端移动,直到到达终止密码子处。当第一个核糖体离开起始密码子后,空出的起始密码
关于多聚核糖体的介绍
多聚核糖体(polyribosome)是指合成蛋白质时,多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA分子上,形成的似念珠状结构。在合成多蛋白质时,核糖体并不是单独工作的,常以多聚核糖体的形式存在。一般来说,mRNA的长度越长,上面可附着的核糖体数量也就越多。 这样,一条mRNA就可以在几乎同一时
聚合酶链[式]反应
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
线粒体呼吸链酶的疾病
线粒体呼吸链酶缺陷会造成线粒体病,线粒体病主要包括:母系遗传Leigh综合征,线粒体肌病,多系统疾病、心肌病、进行性眼外肌麻痹,Leer遗传性视神经病,糖尿病和耳聋、共济失调舞蹈病、细胞外基质慢性游走性红斑、进行性眼外肌麻痹、肌红蛋白尿电机神经元疾病,铁粒幼细胞贫血、MERRF-线粒体肌病、肌阵
多聚酶链式反应(PCR)基因扩增及琼脂糖凝胶电泳检测
一、 实验目的通过本实验学习PCR反应的基本原理,掌握PCR的基本操作技术以及琼脂糖凝胶电泳技术。二、 实验原理PCR用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段,即通过引物延伸而进行的重复双向DNA合成。基本原理及过程如下:PCR循环过程中有三种不同的事件发生:(1)模板变性;(2)引物退火;(3)热
中科院成都山地灾害与环境研究所:以灾害链聚研究链
从四川成都到西藏拉萨的川藏交通廊道,横跨14条大江大河,穿越21座海拔4000米以上的雪山,因而规划建设中的川藏铁路被誉为“最难”铁路线。然而,这条“难于上青天”的交通干线所处的川藏交通廊道,一直是中科院成都山地灾害与环境研究所的主战场之一。 在2017走进中科院“科技支撑川藏交通廊道建设”记
双链聚肌胞与干扰素的区别
双链聚肌胞(Poly I∶C)是一种人工合成的双链RNA,具有双链RNA的结构特性,能够模拟病毒感染后所形成的双链RNA,刺激机体产生抗病毒免疫反应和炎症反应,具有良好的抗病毒作用,是一种干扰素诱导剂。 干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用
核糖核酸多聚体的结构特点
中文名称核糖核酸多聚体英文名称ribopolymer定 义由核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键生成的多聚体。如多核苷酸、核糖核酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
关于多聚核糖体的形成过程
肽链合成开始时,在mRNA的起始密码子部位,核糖体亚基装配成完整的起始复合物后,向mRNA的3'端移动,开始多肽链的合成,直到到达终止密码子处。核糖体在mRNA的每一个密码子处便与有与之互补的反密码子的tRNA(携带有相应氨基酸)结合,之后其上的氨基酸便与核糖体上的肽链相连,空的tRNA
细胞化学词汇多聚核蛋白体
中文名称:多聚核蛋白体外文名称:polyribosome定 义:多聚核蛋白体是mRNA链上多个互相隔离的核糖体(与已合成的那一部分蛋白)的串珠状复合物。蛋白质的生物合成是在有两百多种生物大分子参与下方才把脱氧核糖核酸(DNA)上的遗传信息密码“翻译”成具有各种生物功能的蛋白质,在这一复杂
多聚磷酸盐的离子色谱测定
图1. 10mg/L混合标准溶液色谱图。 本文采用英蓝超滤技术、离子色谱法对水产品中磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐、三偏磷酸盐进行了分离,并分别测定了含量。实验结果表明,该法灵敏度高,检测结果准确、稳定,值得推广。 多聚磷酸盐作为一类重要的功能性食品添加剂,因能使肉制品具有持久的
什么是聚合酶链反映
聚合酶链式反应(PCR)是20世纪80年代后期由K.Mullis等建立的一种体外酶促扩增特异DNA片段的技术。PCR是利用针对目的基因所设计的一对特异寡核苷酸引物,以目的基因为模板进行的DNA体外合成反应。由于反应循环可进行一定次数,所以在短时间内即可扩增获得大量目的基因。 PCR技术具有灵敏度高、
看完这些你会对双链聚肌会有更多了解
双链聚肌胞分子量: 671.41单链(PI)和单链(PC)是这两种产品一定要等摩尔碱基配对,形成稳定的双螺旋结构,两单链缺一不可。双链聚肌胞用于抗病毒感染,缩短病程,效果很好,单链无此作用。单链的含量要比双链高一半 。 为一种干扰素诱导剂。在体内细胞诱导下产生干扰素,有类似干扰素的作用,故有
多酶体系的定义
指催化机体内的一些连续反应的酶互相联系在一起,形成的反应链体系。 一般分为可溶性的、结构化的和在细胞结构上有定位关系的三种类型。
什么是多酶饲料
多酶饲料是生物饲料的一种,饲料中富含多种饲用酶,能够在一定程度上消除饲料原料中的抗营养成分或对动物内源性酶类起到补充作用,从而有利于改善现有饲料的品质、提高饲料的利用率。结合国内外有关资料,就常见饲用酶的种类和作用以及多酶生物饲料的研发工艺、存在问题和研究现状进行了综述,并对多酶生物饲料的发展做出展
核糖核酸多聚体的基本信息
中文名称核糖核酸多聚体英文名称ribopolymer定 义由核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键生成的多聚体。如多核苷酸、核糖核酸。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)