沉默是金:强大的RNAi筛选技术
在过去，想要发现哺乳动物细胞的重要生理过程，通常需要通过化学突变或将转座子插入到基因组中对细胞内的基因进行干扰。但是，大约10年前，RNA 干扰(RNAi)技术的出现改变了这种状态。这项技术的核心是，设计一个短链RNA，使其在转录过程中与目的基因序列互补结合，从而阻止目的基因翻译成蛋白。RNAi技术的问世，使得对哺乳动物体内每一个细胞内基因进行干扰成为了可能。 “这个技术的出现开辟了了解哺乳动物基因功能的一个全新领域。”美国国家卫生研究院国家转化科学推进中心从事RNAi筛选的科学家Scott Martin说。利用RNAi筛选方法已经发现了许多关键的细胞过程，如细胞增殖、细胞凋亡和细胞复制等。 尽管近年来RNAi筛选技术在不断提高，我们拥有了更多有效的RNA探针来干扰目标基因，但是这项技术也存在一定的缺陷。“脱靶效应是主要的限制，” Martin说。你需要采取一定的措施来清除用以沉默靶基因的RNAis而......阅读全文
Cell：光学混合筛选技术几天内筛选人细胞中的数千基因
如今，在一项新的研究中，来自美国麻省理工学院和布罗德研究所的研究人员开发出一种方法，该方法将大规模混合筛选与基于图像的细胞行为分析相结合。这种称为光学混合筛选（optical pooled screen）的方法允许人们在空间和时间分辨率下研究基因如何影响细胞过程，而其他的混合筛选方法则无法做到这
转基因植物中的筛选基因
基因工程（DNA重组技术）是在离体条件下对不同生物的遗传物质（DNA）进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。自
细胞转染所需细胞的筛选方法
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
高通量细胞迁移筛选
细胞迁移是一个活的生物生长和维持生命过程中不可缺少的的关键过程。为了完成相应的功能，体内的细胞经常会以特定的方向迁移到特定的位置。迁移是一个循环的过程，细胞向前端伸出突触，缩回其尾端。动物组织中的细胞发生迁移主要是为了响应特定的外部信号。细胞迁移对于胚胎发育、伤口愈合、分化以及免疫应答等都是非常重要
细胞筛选方法和步骤
筛选步骤：a.杀灭曲线的确定将未转染的细胞按每孔0.05million铺入24孔板，孵育过夜，2.第二天，除去24孔板中旧的培养基，3.将含不同浓度嘌呤霉素（1ug/mL，2ug/mL，3ug/mL，4ug/mL，5 ug/mL，6ug/mL，7ug/mL）的新鲜培养基加入已铺有细胞的24孔板，4.
转染细胞的筛选原则
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
转染细胞的筛选方式
1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。2) 将培养液换成含抗生素的培养基，抗生
CRISPR筛选发现关键基因，让抗肿瘤T细胞疗法更持久
免疫疗法方兴未艾，并在肿瘤治疗中展现出极佳的治疗效果，而抗肿瘤T细胞疗法是免疫疗法的重要代表。 细胞毒性CD8 T细胞可以直接杀死肿瘤细胞，是在临床使用的许多免疫治疗方法中动员的关键武器。然而，肿瘤组织能够创造严酷的微环境，招募免疫调节细胞，并诱导抑制T细胞功能的信号分子的产生，从而阻碍了T细
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选
稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始①在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证②高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白
关于转染细胞筛选的介绍
1、确定抗生素作用的最佳浓度： 不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。 1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细胞8 孔，接种量以第二天长成25%单层为宜，置CO2 孵箱中37℃培养过夜。 2) 将培养液换成含抗生
转染细胞的稳定筛选实验
本实验主要用于获得含目的外源基因的真核细胞。实验方法原理外源基因转染真核细胞后整合入基因组DNA，能够长期存在于细胞中，随染色体复制而传给子代。外源基因进入培养细胞一般要经过几天才能够整合入基因组DNA。实验材料转染细胞试剂、试剂盒抗生素培养基胰酶仪器、耗材6孔板24孔板96孔板CO2培养箱滤纸片培
转染细胞的稳定筛选实验
实验方法原理 外源基因转染真核细胞后整合入基因组DNA，能够长期存在于细胞中，随染色体复制而传给子代。外源基因进入培养细胞一般要经过几天才能够整合入基因组DNA。 实验材料
杂交瘤细胞的筛选
杂交瘤细胞的筛选 在细胞融合后，要从上述五种细胞中筛选出杂交瘤细胞，一般使用HAT培养进行筛选，HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶（T）三种成分。细胞的DNA合成有内源性途径（主要途径）和外源性途径（旁路途径）两种方式。内源性途径就是利用谷氨酰胺或单磷酸尿苷酸在二氢叶酸还原
转染细胞的稳定筛选实验
实验材料 转染细胞试剂、试剂盒 抗生素培养基胰酶仪器、耗材 6孔板24孔板96孔板CO2培养箱滤纸片培养瓶实验步骤 1．确定抗生素作用的最佳浓度：不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性，因此在筛选前要做预试验，确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。1) 提前24 小时在96 孔板或24 孔板中接种细
基因测序技术首次实现胚胎筛选
来自牛津大学的科学家们利用新的基因测序技术对胚胎进行分析，从而选择试管受精的胚胎。之前，新的基因测序技术从来没用被用于胚胎的筛选。 这项分析技术称为“下一代测序技术”，一种强大的方用来解读所有的基因。通过测试每个样品产生大量的DNA数据，同时揭示遗传性疾病，染色体的异常及线粒体的突变。下一
血清学筛选克隆新抗原/新基因——血清学筛选法
通过以血清的各种反应为中心的机体免疫反应和变态反应的研究体系来筛选新抗原和新基因。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒TBST 裂解液 血清 NZY top IPTG 一抗 二抗 SM 封闭液 MgSO4 LB AP BCIP-NBT 显色液仪器、耗材硝酸纤维素膜 滤纸 冰箱 培养箱 水浴锅 平板 脱色摇床
新基因筛选工具能绘制“垃圾DNA”
据英国《每日邮报》官网报道，美国科学家近日开发了一种新的基因筛选工具，能绘制引起癌症、糖尿病和痴呆症的基因突变，或有助于开发新疗法，进而拯救每年因此丧生的数百万人。新成果发表在《公共科学图书馆》杂志上。 领导这次研究的哥伦比亚大学教授大卫·戈尔茨坦说，现在的基因测序只能在不超过三分之一的遗传病
筛选化合物抑制细胞作用
出现细胞增殖的情况有多种，排除化合物本身的影响，是否还有其他因素，比如人为计数的误差，出现细胞分布不均匀，取样点的不同，会导致计算结果的失真，先重复几次，排除自己操作的原因在探究是否是化合物的原因。另外，一定要做好对照，空白对照与阳性对照，通过对照的比较来看，会更说明问题。
PDGFRA靶点药物细胞筛选模型
胃肠道间质瘤(Gastrointestinal Stromal Tumors,GIST)是一类起源于胃肠道间叶细胞的肿瘤，约占胃肠道恶性肿瘤的1～3%，年发病率约为10－20/100万。它是一种软组织肉瘤、对化疗不敏感，其中约78.5%的GIST有KIT激活变异，约7.5%的GIST有PDGFRA变
基因检测也亲民－可筛选正宗大闸蟹
说起生物、生命、健康、基因检测等话题似乎很高端，但展览会实际上非常亲民，接地气。展览既有非常高端的干细胞技术介绍，也有很居家的健康食品展示，而且还有各种免费的体检体验活动。高高在上的基因检测技术原来能非常亲民，竟可以用来教您如何挑选正宗的阳澄湖大闸蟹，教您如何减肥瘦身。 展览会变成免费体检大厅
杂交瘤细胞怎么筛选分离方法
第一次用加入氨基蝶呤的选择培养基选择出融合正确的杂交瘤细胞第二次用抗原抗体反应选择出可以产生抗体的杂交瘤细胞。
细胞人工纯化的电烙筛选法
在贴壁细胞转化时，往往在培养瓶的细胞层中会出现分散的转化灶，转化灶区域细胞密集、排列规则，有明显生长趋势，与周边未能转化的细胞有明显的区域界限，此时即可用机械刮除法去除未转化细胞，也可用电烙筛选法烫死未转化细胞而保留转化灶细胞。其方法如下： (1)倒去旧液，并用记号笔划出转化灶的区域。 (2
自动化的细胞筛选系统
与传统药品相比，目前利用生物工程技术生产的药品价格较高。除了早期的哺乳动物、昆虫细胞等高蛋白质生物细胞之外，在研发过程中，能够用于微型生物反应器的细胞，有着明显降低成本的优势。 在高产细胞株的筛选时，通常要使用传统的摇瓶和台式生物反应器，并且需要有最佳的媒介介质、细胞营养液和生物过程条件
细胞的筛选驯化和保藏方法介绍
实现悬浮培养首先需要选择合适的宿主细胞，细胞系的特征直接影响放大的可能性以及放大技术的选择。同一种细胞在悬浮培养和贴罐培养时对同一病毒的敏感性不同；同一株细胞不同的克隆对营养条件有不同的需求，对病毒敏感性亦可能不同。 常根据毒株特性，综合考虑所用毒株能在何种细胞上增殖、表达，悬浮或贴壁细胞属性足否适
多基因风险评分技术可筛选基因，避免低智商婴儿出生
美国一家专注于筛查基因检测公司Genomic Prediction透露，利用一种叫做多基因风险评分（a polygenic risk score）的技术，可使计算出一个人拥有某些条件或特征成为可能。 譬如，如果想要筛查智商“更高”的婴儿，可以筛选与智力有关的上千种基因。 该公司声称，他们通过
谷物筛选器筛选原理
谷物筛选是指根据粮食颗粒大小的不同，利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。因为筛选和重力分选的主要对象是谷物，其介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器就是一款专门检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量，确定其品质等级的仪器。
流式细胞仪能筛选出单克隆细胞么
可以。为了制备牛型布鲁菌核蛋白L7/L12的单克隆抗体,试验采用流式细胞仪与间接ELISA相结合的方法进行单克隆筛选,以及Western-blot分析。结果表明:最终筛选出3株表达量较高的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液的抗体效价可达1∶3 200,3株单克隆抗体均能与核蛋白L7/L12发生特异性结合,
血清学筛选克隆新抗原/新基因（一）
一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes（NC）浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中，室温下水平摇动30
基因芯片的应用药物筛选和新药开发
由于所有药物（或兽药）都是直接或间接地通过修饰、改变人类（或相关动物）基因的表达及表达产物的功能而生效，而芯片技术具有高通量、大规模、平行性地分析基因表达或蛋白质状况（蛋白质芯片）的能力，在药物筛选方面具有巨大的优势。用芯片作大规模的筛选研究可以省略大量的动物试验甚至临床，缩短药物筛选所用时间，提高
Nature－Comm：基因融合筛选有助预测肺癌恶性程度
目前开发肺癌有效的治疗已经具有相当大的挑战性，部分是因为许多基因突变在肺癌中发挥作用。通过分析肺癌的RNA和DNA，美国密歇根州综合癌症中心研究人员发现含大量基因融合的肺癌患者比只有较少基因融合的肺癌患者有更糟糕的结果。 此外，研究人员确定肺癌（包括有吸烟史的）患者的几个新遗传异常。肺癌是一个