长读取测序揭秘转录本结构
短读取的 RNA-seq 虽然可以精确计数已表达的转录本,但无法提供这些转录本的结构信息。 现在,斯坦福大学研究人员在《自然-生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上报告称,他们开发出了一种能保留转录本结构信息的新方法,他们通过环状 cDNA 模板和长读取测序,实现了对转录异构体(transcript isoform)的定量和分析。 在这项最新研究中,科学家舍弃了传统的短读取 RNA 测序法,利用 PacBio 公司提供的长读取技术来测序完整的转录本。他们在 20 个人体组织的混合样本中,鉴定得到了 476,000 个转录本序列,平均长度 1 kb。 绝大多数哺乳动物的基因,不符合一基因一转录本的模式。这些基因往往存在多种剪切形式,拥有可变的转录起始/终止位点。短读取的测序技术不能提供上述信息,举例来说,短读取可以检测到发生选择性剪切的外显子,但无法判断外显子之间的结构关系,......阅读全文
-长读取测序揭秘转录本结构
短读取的 RNA-seq 虽然可以精确计数已表达的转录本,但无法提供这些转录本的结构信息。 现在,斯坦福大学研究人员在《自然-生物技术》(Nature Biotechnology)杂志上报告称,他们开发出了一种能保留转录本结构信息的新方法,他们通过环状 cDNA 模板和长读取测序,
长读长测序技术:拯救基因组组装项目
随着高精度长读长测序技术的出现,基因组难以组装的状态正在改变。《Nature Methods》杂志上近日发表了一篇文章,介绍了基因组组装项目如何受益于这种技术。 自测序技术问世以来,利用DNA序列的片段来组装人类、动植物或微生物的基因组就一直是难题。许多参考基因组都存在缺陷,如组装错误或存在缺
长读测序技术发现蚂蚁重大基因
蚂蚁是一种新兴的神经表观遗传学模型系统,迄今为止,虽然许多研究团队已经对各种蚂蚁进行了基因组测序,但这些测序结果并不能帮助科学家对表观遗传基因调控的复杂性进行分析。 美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院表观遗传学研究所埃米莉·希尔兹等研究人员,使用第三代长读测序技术,极大地改进了蚂蚁的基因组测序,
《Nature-Genetics》长读长测序鉴定隐藏变异
鉴定生命基因组中的复杂突变一直都很困难。加州大学欧文分校(University of California -Irvine)生态学和进化生物学副教授J.J. Emerson的研究团队最近在《Nature Genetics》发表文章,他们开发了一款基因分析方法,能以前所未有的分辨率水平识别复杂突
国外企业“妙招”-攻克长读长测序技术中“DNA提取”的痛点?
近年来,Pacific Biosciences、Oxford Nanopore Technologies、Bionano Genomics和10x Genomics等公司的长读长测序和基因组图谱技术越来越受欢迎。随着相关技术的推广应用,长读长测序技术在快速、高效提取高质量高分子量DNA方面的痛点
英研发第三代基因测序技术-用纳米孔单分子读取
基于纳米孔的单分子读取技术,英国牛津纳米孔公司成功研发出第三代基因测序技术。该测序技术读取数据更快、有望大大降低测序成本,改变个人医疗的前景。 当前,基因测序工作费时且昂贵,测序时,分子必须进行多次复制(这一步被称为扩增),同时进行荧光示踪标记,这一过程会带来错误,因此,一个基因要被测序多
长读长测序的“灾难”——检测结构变异成为空谈!
长读长测序技术以其读长的优势,能够更大程度的检测结构变异(Structural Variations,SV)。然而面对市面上常见的Nanopore测序技术,检测结构变异的事实真的如此吗?在今年11月bioRxiv杂志上发表的文章则指出:使用Nanopore对具有反向重复结构的CNV序列进行DN
纳米孔直接RNA和cDNA长读长测序概述
RNA测序已经在生物学和医学的各个领域取得了前所未有的发展。在包括癌症在内的诸多疾病中,转录异构体的表达和用途是健康组织和患病组织之间变异的重要来源。鉴定差异剪接的异构体和融合转录本,可以为疾病的诊断和治疗提供信息。RNA测序还有助于揭示从单细胞到整个组织的转录组动力学。同时,cDNA测序也极大
纳米孔直接RNA和cDNA长读长测序概述
RNA测序已经在生物学和医学的各个领域取得了前所未有的发展。在包括癌症在内的诸多疾病中,转录异构体的表达和用途是健康组织和患病组织之间变异的重要来源。鉴定差异剪接的异构体和融合转录本,可以为疾病的诊断和治疗提供信息。RNA测序还有助于揭示从单细胞到整个组织的转录组动力学。同时,cDNA测序也极大
放射自显影和从测序凝胶上读取-DNA-序列实验
实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的配方见附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。凝胶固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性混合物放射性墨水或化学发光标记物参见附录 9。可重复使用的放射性墨水主要是选择 Stratagene 的冷光标记物(Glosos)。标记物能被多
放射自显影和从测序凝胶上读取-DNA-序列实验
本实验介绍关于放射自显影和从测序凝胶上读取 DNA 序列的过程。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的配方见附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。凝胶固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋
放射自显影和从测序凝胶上读取-DNA-序列实验
实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液、缓冲液和试剂的配方见附录 1。将贮存液稀释到合适的浓度。凝胶固定液300 ml 甲醇2.4L 水300 ml 冰醋酸放射性混合物放射性墨水或化学发光标记物参见附录 9。可重复使用的放射性墨水主要是选择 Strat
长读长测序可以帮助诊断结构变异导致的罕见病
最近发表的一项研究显示,长读长测序可以帮助诊断结构变异导致的罕见病,这类变异难以用短读长测序进行鉴定。斯坦福大学临床基因组服务部的研究人员近期报道,他们使用 Pacific Biosciences 公司的 Sequel 测序仪对具有未知疾病的个体进行全基因组测序,找到了短读长测序技术未能发现的致病突
长链非编码-RNA-测序案例分析
背景:人类寿命的延长伴随着神经退行性疾病的发病几率的增加,因而价格不贵的血液诊断的发展迫在眉睫。通过 RNA-seq 分析血液细胞的转录本是发现新的生物标志物的非常高效的途径。 目的:利用 Illumina 测序平台对帕金森病人白血球中 lncRNAs 进行分析,探讨其对 mRNA 选择性剪接的
DNA测序的测序技术
高通量测序技术(High-throughput sequencing)又称“下一代”测序技术(Next-generation sequencing technology),以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等,主要有以
因美纳推出首创产品,在同一仪器上长读长和短读长测序
2023年3月14日,全球基因测序和芯片技术的领导者因美纳(纳斯达克股票代码:ILMN)宣布,其首款基于新型Illumina Complete Long Read技术的产品现已接受订购。Illumina Complete Long Read Prep, Human,这一高性能、长读长的人类全基因组测
因美纳推出首创产品,一台仪器实现长读长和短读长测序
率先体验客户分享的数据证实了新型长读长技术的准确性和灵活性, 开启了对具有挑战性的、低DNA起始量样本的解码 美国加利福尼亚州圣迭戈——2023年3月14日,全球基因测序和芯片技术的领导者因美纳(纳斯达克股票代码:ILMN)宣布,其首款基于新型Illumina Complete Long R
读取路径≠储存路径?Cell新研究颠覆记忆读取机制
当我们有了新体验时,记忆就会储存在海马体及其他脑区相连的神经环路中。每个神经元簇可以存储记忆的不同方面,比如事件发生的位置或与之相关的情绪。研究记忆的神经科学家一直认为,当我们召回这些记忆时,我们的大脑就会开启与最初记忆形成时相同的海马环路。然而,麻省理工学院(MIT)的神经科学家首次表明,记忆
DNA测序技术的测序规律
生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱基出现在可变终止端的机会均等,因此上述每一组产物都是一些寡核苷酸混合物,这些寡核苷酸的长度由某一种特定碱基在原DNA全片段上的位置所决定。在可以区分长度仅差一个核苷酸
DNA测序技术的测序原理
化学修饰法测序原理化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物
长读长测序显优势-基因组复杂结构变异检测实现新突破
基因组结构变异是很多癌症、遗传病等疾病的重要诱因。目前基于二代测序技术检测基因组结构变异存在很大的局限性,而三代测序存在错误率较高等多种问题,尤其针对复杂结构变异大多软件识别能力较差。针对这一问题,近日,在Nature Methods发表的一项最新研究中,研究人员开发了基因组比对工具NGMLR和
纳米孔测序首次实现1-Mb的读长
高通量测序的产量让人惊叹不已,但读长却屡屡遭人诟病。不过,从100 bp到1 kb,读长始终在进步。近日,测序界传来了一个激动人心的消息,澳大利亚Garvan研究所的研究人员利用Oxford Nanopore测序技术实现了> 1 Mb的读长,这堪称测序历史上的一个里程碑。 Kinghorn临床
测序解析昆虫中的恶魔-–-亚洲长角天牛
美国多个机构的研究人员近日对一种可怕的昆虫 – 亚洲长角天牛(Anoplophora glabripennis)的基因组进行了测序,发现了这种昆虫破坏树木的秘密。这项成果于11月11日发表在《Genome Biology》上。 美国孟菲斯大学、贝勒医学院及其他机构的研究人员利用表达芯片和转录组
测序平台的读长真的很重要吗?
在EdgeBio,我们一直关注如何提高效率,降低成本,并为我们的客户提供整体上更优质的服务。随之而来的是大量的R&D和新技术开发(NTD)费用。一个很好的例子是我们近期发布的一系列技术白皮书(共五篇),是关于定向重测序应用的,包括外显子组。您可以在这里找到。今天我将与大家分享一些使用Illumi
5000bp!单分子测序读长再次升级
PacBio RS单分子测序在发布时就以其超长的读长引起研究者的极大兴趣。在不到一年的时间里,随着年初C2试剂的升级,Pacbio RS的平均读长达到了3000bp,并迅速在测序的各个领域,特别是De novo中发挥了巨大的读长优势。Pacific Biosciences公司在11月6日
DNA测序技术
目前还有一种基于半导体芯片的新一代革命性测序技术——Ion Torrent。该技术使用了一种布满小孔的高密度半导体芯片, 一个小孔就是一个测序反应池。当DNA聚合酶把核苷酸聚合到延伸中的DNA链上时,会释放出一个氢离子,反应池中的PH发生改变,位于池下的离子感受器感受到H+离子信号,H+离子信号再直
DNA测序技术的测序的规律
生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱基出现在可变终止端的机会均等,因此上述每一组产物都是一些寡核苷酸混合物,这些寡核苷酸的长度由某一种特定碱基在原DNA全片段上的位置所决定。在可以区分长度仅差一个核苷酸
测序技术及测序仪器的比较
自sanger测序技术发明以来,经人类基因组计划的促进,测序技术有了跨越式的发展,以实验方法与实验仪器的改进为标志,测序技术经历了三代的发展,同时测序技术向着高通量测序,单分子测序,低价格测序的方向发展,目前测序技术已成为分子生物学实验中的重要的实验手段。本文主要简单回溯了测序技术的发展历史,介绍了
长读测序发现高达20%的果蝇基因来自细菌
科学家芭芭拉·麦克林托克在20世纪40年代首次发现了“跳跃基因”,即那些可以在其他物种基因组内移动或转移到其他物种基因组中的基因。然而,研究人员继续发现它们在进化和健康中的重要性。在UMSOM和IGS的微生物学和免疫学教授Julie Dunning Hotopp博士的带领下,IGS的研究人员使用了新
高通量测序技术——第二代测序技术
高通量测序技术是对传统测序一次革命性的改变,一次对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定,因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing)足见其划时代的改变,同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能,所以又被称为深度测序(de