自然子刊综览
《自然—方法学》 新方法可分离精确突变的罕见人体iPS细胞 《自然—方法学》上的一篇文章介绍了一种经过精确突变设计的罕见人体诱导多能干细胞(iPS)的分离手段。该手段可实现含有精确疾病突变或者突变逆转的人体iPS细胞系的简单生成，从而帮助我们更好了解疾病的遗传学基本原理。 统计显示，大量的基因组突变都与人类疾病有着联系，科学家迫切需要找到方法通过实验研究这些突变的生物学影响。而让人体iPS细胞发生精确突变的那些特定基因工程手段的使用则让科学家感到兴奋。 但是要在对基因组产生最小干扰的前提下实现基因组的精确变化却是很难的。Bruce Conklin等人将酵母基因研究中比较经典的方法应用到人类iPS细胞上。他们将该方法与灵敏数字生化检测手段相结合，发现只需要少量转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)便可分离那些指定基因产生精确突变的罕见人体iPS细胞。他们在人体基因组的多种基因上展示了该方法的使用......阅读全文
人类语言基因让小鼠变“聪明”
美欧研究人员15日发表的一项新研究表明，如果给小鼠引入人类版本的语言基因Foxp2，那么小鼠的学习能力将得到提高。这一成果有助于研究人类语言的出现和进化。 Foxp2语言基因是十多年前在英国一个存在严重语言障碍的家族中首先发现的，缺乏这种基因的人普遍存在学习障碍和语言组织障碍。这种基因并非人类
小鼠βactin基因的克隆表达（4）
实验步骤：（1）诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养2h以上，至对数中期（A550=0.5~1.0）。向诱导管中加入IPTG使其浓
虾青素开启小鼠长寿基因
夏威夷大学John A. Burns医学院和Cardax公司最近联合公布了一项动物研究的结果，他们对一种抗衰老药物的有效性进行了评估。 由Cardax公司开发的虾青素化合物CDX-085能够显著增强FOXO3基因的表达，之前有研究表明该基因与长寿有关。“每个人体内都有FOXO3基因，可以帮助人
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES
小鼠肝细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基
如何测小鼠白细胞总数
动物细胞培养的原理是细胞增殖，即有丝分裂．在有丝分裂过程中DNA含量变化（以2N为例）：（1）间期DNA复制，数目加倍（2N→4N）；（2）前期、中期和后期，DNA含量不变（4N）；（3）末期细胞分裂，DNA平均分配给两个子细胞，数目还原（2N）．本题考查动物细胞和有丝分裂过程中DNA含量变化规律，
小鼠腹腔巨噬细胞培养
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2 培养箱中孵育后，荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一
小鼠破骨细胞分化方案
破骨细胞是高度分化的多核巨细胞，主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能，在骨代谢方面起着关键性作用的细胞，因而机体对于破骨细胞的调控非常严格，在破骨细胞分化成熟的过程中，RANK /RANKL/OPG系统起着分化调控枢纽的作用，是调节破骨细胞分化成熟的关键信号途径。核因子κB
小鼠肝细胞原代培养
实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。
小鼠精原干细胞移植
实验概要小鼠精原干细胞移植主要试剂75%乙醇、台盼蓝、白消安、水合氯醛主要设备外科手术刀、外科手术剪、玻璃针（内径约40μm）、显微镊、实体解剖镜、相差显微镜、显微操作仪实验步骤（1）白消安处理受体鼠取6～8周龄的小鼠，按照40～60 mg/kg腹腔注射白消安，小鼠在注射白消安4～6周后，可以用来移
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 通过光镜观察细胞形态、电镜观察超微结构及检测培养上清白蛋白水平证实培养细胞为肝细胞，持续培养结果显示原代培养第6～12 d 左右为肝细胞功能最佳观察和实验阶段。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6 孔
小鼠白细胞分化抗原
大多数白细胞分化抗原在生物进化过程中具有保守性，这是不同种的动物执行相同或相似生物学功能的需要。小鼠是免疫学常用的实验动物，而且对某些人白细胞分化抗原的结构和功能的了解首先是从小鼠或小鼠源性的细胞实验模型得知的，表1-3列举了部分与人CD抗原类同的小鼠造血细胞表面抗原，以供参考。表1-3 与人CD抗
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来，已推动2000+个课题组加速研究进展，帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系，或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关
研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠
赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来，已推动2000+个课题组加速研究进展，帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系，或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关
体内处理精原干细胞产生转基因小鼠的试验方法
实验概要本试验描述了通过体内处理小鼠精原干细胞产生转基因小鼠的技术，其成功率高。在此次研究中通过的将幼鼠的精原干细胞（SSCS）与重组慢病毒表达的EGFP -F在体内感染，然后与正常雌性交配。转基因可遗传和前处理的小鼠可在多次交配试验中使用。这项技术可以适用于模拟接近人类发展和疾病的实验室动物模
基本方案2－植入基因修正的细胞到新生的小鼠脑内
实验材料基因修正的细胞新生小鼠试剂、试剂盒乙醇抗菌素外科胶水仪器、耗材汉密尔顿注射器显微操作仪手术用具幼鼠脑图谱加热板实验步骤1.为移植开始培养基因修正的细胞，收获 80%~90% 的汇合度的细胞。手术时，当麻醉和准备动物的时候准备好悬浮细胞（支持方案）。手术期间，每 30~60 min 重悬细胞。
转基因小鼠模型的建立(SOP)6
[洗卵管制作]1） 点燃酒精灯，调节火焰到最佳。捏持玻璃毛细吸管或巴氏移液管在火焰上焰旋转过火。2） 当吸管开始变软，快速撤离火焰，向外急剧扯拉使吸管变长，形成口径大约200?l的吸管。注意制备过程中离开火焰的时间以及扯拉的力度，尽量保证制备吸管的一致性。3） 为吸管评分，轻柔地折断吸管，辨别
小鼠大脑皮层基因活性图谱问世
一国际研究小组最新发表在《神经细胞》杂志上的论文称，他们使用一种最新测序技术，首次成功描绘出小鼠大脑基因活性的完整图谱。该图谱覆盖了整个基因组的所有基因，十分详细地显示了小鼠大脑皮层各层次的基因活性情况。研究人员指出，该研究成果不仅有助于科学家进一步理解哺乳动物大脑的组织结构情况，
基因编辑让早衰小鼠寿命延长25％
年龄增长会增加很多疾病发生的风险，例如心脏病、癌症和阿尔兹海默症。所以，科学家们一直在试图找到延缓衰老的方法。 2019年2月18日，《Nature Medicine》期刊上发表一篇最新文章，揭示了一种新的基因疗法或有助于延缓衰老。 来自Salk研究所的科学家们利用CRISPR/Cas9基因
转基因小鼠模型的建立(SOP)1
名称：转基因小鼠模型的建立(SOP)关键词：转基因小鼠目的：在动物体研究转化基因原理：转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术，它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供
基因激活疗法可抑制小鼠肝损伤
洛杉矶加利福尼亚大学的化学家Hsian-Rong Tseng 说：“这是一项非常令人兴奋的工作，这将使转录因子传输到另一个不同的领域。” 我们的细胞产生超过一千个独特的转录因子，它们每一个都会结合到DNA的一个特定区域来提示基因的转录：从DNA创建 RNA模板来合成新的蛋白质。改变这些因子的活
转基因小鼠制备实验方法（protocol)
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，
“基因魔剪”让耳聋小鼠恢复听力
英国《自然》杂志12月20日发表了一项基因治疗领域成果：因高水平基因组编辑技术而闻名世界的博德研究所表示，基因编辑技术（CRISPR-Cas9，也称“基因魔剪”）现已被用于恢复人类遗传性耳聋小鼠模型的听力。最新研究凸显了CRISPR-Cas9技术用于治疗显性遗传性听觉损失疾病的潜力。 有将近一
转基因小鼠模型的建立(SOP)3
（2）受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小，体重在20-25克左右，严禁用低体重以及超重母鼠，若体重较低，其体能不足以维持妊娠，可能导致受精卵的重新吸收；若体重较重，麻醉剂被吸收入脂肪组织，降低麻醉效果，可能使手术困难，而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在，所以手术时切掉脂肪组织可能导
转基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之处]（1）外源基因随机整合；（2）个别原核不清晰，需进行特殊处理；（3）需大型精密仪器，费用昂贵；（4）操作周期相对较长。（二）实验器材的准备1．输精管切除术用器材：弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培
基因疗法可治小鼠糖尿病
Ⅰ型糖尿病是一种自体免疫性疾病，患者自身免疫系统会错误攻击并摧毁分泌胰岛素的贝塔细胞，从而导致血糖水平升高。近日，发表在新一期美国《细胞—干细胞》期刊的研究揭示，一项新型胰腺内基因疗法成功让Ⅰ型糖尿病小鼠的血糖水平恢复正常并维持相当长的一段时间。该疗法或具广阔前景。图片来源于网络 该论文高级作
动物实验技术：转基因小鼠制备实验
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，
基因疗法恢复小鼠听力和平衡能力
哈佛医学院和马萨诸塞州总医院的研究人员采用新的基因疗法，使先天听力和平衡能力受损的小鼠恢复了部分听力和平衡能力，完全失聪的小鼠能够听到大声讲话。该研究结果发表于近期出版的《分子治疗》杂志上。 治疗各种听力损失症，最为关键的是找到一种能适用于所有类型毛细胞的基因传递机制。此前的基因疗法仅对内毛细
转基因小鼠模型的建立(SOP)5
4．显微注射（1）导入DNA的制备：显微注射首先涉及导入DNA的制备，显微注射的转入基因通常为去除载体序列的线状DNA，转基因所用载体是真核表达载体，即含有在哺乳动物细胞内表达的真核启动子。所谓组织特异性的实现多是通过组织特异性启动子来实现组织特异性表达的。制备转基因小鼠，必须对待导入DNA进行分离