《PNAS》:揭开病毒性出血热的谜团

出血热(Hemorrhagic fevers)是由拉沙热、登革和其他病毒引起,每年影响约100万人,而且往往是致命的,但是科学家们一直不明白,为什么只有一些感染病毒的人染上疾病,而其他人却没有。 但是现在,美国斯克利普斯研究所(TSRI)的病毒学家和免疫学家发现了“出血热”综合征秘密的一个重要线索。相关研究结果发表在本周的《PNAS》杂志,表明I型干扰素(IFN-I)免疫蛋白,是人出血热小鼠模型病毒性综合征的一个关键因素。 TSRI免疫学副教授Roberto Baccala与Michael Oldstone教授共同指导了这项研究,Roberto指出:“在特定的遗传品系小鼠中阻断IFN-I信号,可完全预防疾病迹象,如导致死亡的血管渗漏。” 研究人员一直认为,IFN-I蛋白对有效的抗病毒应答是必不可少的,仍然用其来治疗一些慢性病毒感染,这项新的研究表明,有时候这些蛋白质的作用弊大于利,阻断它们或它们激活的特定生物途径,可能......阅读全文

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百

小鼠肝细胞原代培养实验

小鼠肝细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM 无血清DMEM

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实

小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

            实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。 实验材料

大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法

心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(

磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞

PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPMI-10完全培养基6、AUTOMACS系统和分选柱7、30μm尼龙网或40μm预分离滤膜 实

小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术

实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研

流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞

实验概要本文主要讲述了:从成年小鼠脑中分离单细胞,制成单细胞悬液,我们一个单细胞分离成单细胞悬液,除去髓鞘碎片,然后染色标记,以确定小胶质细胞的成分。细胞被固定,在多色流式细胞仪上读取。实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4

流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞

实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。2. 用剪刀去头。3. 剥开头骨的软组织。4. 除去下颌骨。5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。7. 舀出大脑,维持组织的完整性。8. 立即将脑组织置于预冷的流式细

小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞

实验概要小鼠神经干细胞分化为星形胶质细胞主要试剂无菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、细胞基础培养液、 PDL、laminin、小鼠神经分化培养液(Neuron M)、小鼠神经干细胞向星形胶质细胞分化培养液主要设备4孔板、12mm细胞培养玻片实验步骤 在4孔板每个孔中放置一块12mm细胞培养

细胞技术专题:小鼠腹腔巨噬细胞培养实验

小鼠腹腔巨噬细胞培可以:(1)吞噬与清除异物;(2)分泌生物活性物质;(3)对仿生全降解材料,降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。实验方法细胞培养技术实验方法原理取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬

巨细胞病毒的病毒特征

  病毒性状  CMV具有典型的疱疹病毒形态,其DNA结构也与HSV相似,但比HSV大5%。本病毒对宿主或培养细胞有高度的种特异性,人巨细胞病毒(HCMV)只能感染人,及在人纤维细胞中增殖。病毒在细胞培养中增殖缓慢,复制周期长,初次分离培养需30~40天才出现细胞病变,其特点是细胞肿大变园,核变大,

小鼠辛型肝炎病毒(TTV)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠辛型肝炎病毒(TTV)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于检测小鼠血清,血浆及相关液体样本中辛型肝炎病毒(TTV)水平,感染人的血液学诊断。实验原理:  本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠辛型肝炎病毒(TTV)。用

小鼠肝炎病毒抗体(MHVAb)酶联免疫分析

小鼠肝炎病毒抗体(MHV-Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于检测小鼠血清,血浆及相关液体样本中肝炎病毒抗体(MHV-Ab)水平,感染人的血液学诊断。实验原理:  本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠肝炎病毒抗体(

美制造出感染丙肝病毒的小鼠模型

  针对丙肝病毒(HCV)感染的治疗研究工作,一直受阻于缺少一种有关这种疾病的小型动物模型。据美国物理学家组织网报道,现在,美国科学家制造出了首个丙肝病毒感染的具有全功能免疫系统的小鼠模型,该模型将使科学家能对阻止丙肝病毒进入细胞的分子以及用于治疗丙肝的疫苗进行测试。相关研究发表在近日

溶瘤病毒可延长脑肿瘤小鼠存活时间

  根据英国《自然·通讯》杂志28日发表的一项癌症学研究,欧洲科学家团队利用病毒靶向癌细胞——利用一种溶瘤病毒成功延长了两种不同类型儿童脑肿瘤模型小鼠的存活时间。这些发现促使研究人员利用该病毒展开了一项长期临床试验。  儿童脑肿瘤如高级别胶质瘤和弥漫内生性脑桥胶质瘤难以治疗,而且与成人肿瘤相比,具有

小鼠肝炎病毒抗原(MHV-Ag)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠肝炎病毒抗原(MHV Ag)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于检测小鼠血清,血浆中肝炎病毒抗原(MHV Ag)水平。实验原理:  本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中小鼠肝炎病毒抗原(MHV Ag)。用纯化的小鼠肝炎病

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(一)

早在1986年Mosmann等[1]依据小鼠分泌的细胞因子谱不同首次将Th细胞分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、、IL-12、IFN-γ和TNF- α等细胞因子,介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应。Th2细胞主要分泌IL-4、I

小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]

一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中

小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)

实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(三)

2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响。PMA刺激8h后CD4阳性T淋巴细胞的表达没有明显下降。PMA刺激12h后,CD4阳性T淋巴细胞的表达明显下降。而CD8表达在8h和12h均没有明显下降。典型的检测结果见图2。图2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(四)

从Rostaing等[2]发表流式细胞术检细胞内细胞因子的方法后,陆续有人研究了流式细胞术检测细胞内因子方法的可行性及重复性等问题。虽然活化T淋巴细胞有各种各样的方法,如:PMA、PHA、Con A、CD3、CD2和CD28等。但是目前公认的较好的方法仍然是PMA和钙离子载体的联合刺激。研究

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(二)

2 不同浓度的PMA刺激后人T淋巴细胞CD4、CD8和CD3的表达。24孔细胞培养板中,每孔加入约5×105个细胞,加入RPMI 1640培养基至总体积1ml。加入不同浓度的PMA(10ng、20ng和50ng终浓度)和500ng/ml Ionomycin共同刺激人外周血单个核细胞,同时加入

小鼠源细胞注意事项的过程

小鼠源细胞维护过程:1、用前仔细检查仪器,玻璃瓶是否有破损,各接口是否吻合,注意轻拿轻放。2、用软布(可用餐巾纸替代)擦拭各接口,然后涂抹少许真空脂。(真空脂用后一定要盖好,防止灰砂进入。)3、玻璃反应釜各接口不可拧得太紧,要定期松动活络,避免长期紧锁导致连接器咬死。4、先开电源开关,然后让机器由慢

小鼠骨髓瘤细胞知识点

1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存