范国平教授Cell子刊发表干细胞研究新成果
来自加州大学洛杉矶分校的人类遗传学教授范国平（Guoping Fan），领导Eli和Edythe Broad再生医学和干细胞研究中心的研究人员，为对比人类胚胎中的干细胞来评估如何利用培养条件在实验室中设法取得干细胞制定了一个基本标准，这为科学家们更好地在人工环境中复制天然干细胞发育奠定了基础。 该研究在线发布在《细胞干细胞》（Cell stem cell）杂志上。 多能干细胞(PSCs)指的是能够转变为人体内几乎所有细胞的一类细胞。一直以来科学家们在实验室中（体外）采用了许多不同的方法及在各种条件下来获得长期培养的PSCs。尽管大家都知道培养技术可以影响PSCs最终变成的细胞类型，但却一直未建立起“金标准”来帮助科学家们确定：人工环境如何能够更好地复制出自然状态下（体内）的状况。 论文的主要作者、范国平教授实验室博士后研究人员Kevin Huang博士，对来自过去一年来多个现有研究的数据进行了分析。这些以往发布的研究在......阅读全文
人造血干细胞的培养、转导和分析实验
反转录病毒介导的基质细胞支持 CD34+ 细胞转导实验材料人骨髓、脐带血或用抗凝血剂处理的外周血试剂、试剂盒HBSSPBSBBMM包被磁珠的鼠抗IgG反转录病毒载体上清液鱼精蛋白硫酸盐LBMMG418HEPES 溶液仪器、耗材转导培养基甲基纤维素培养基铯辐射源离心管旋转平台免疫磁性选择装置注射器培养
脐带间充质干细胞的优势及分离培养
优势 脐带间充质干细胞（MSCs）具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。有报道从人脐带中分离出MSCs，且细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs，免疫原性比骨髓MSCs低[1]，并且具有取材方便，无伦理学
人脐血间充质干细胞培养流程
准备：MSC 细胞培养基配制：MSC 专用基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml（一般分装成 10 管 50 ml，后考虑 1 株仅传 3~5 代约需最多 5 管）。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
人脐血间充质干细胞培养流程
1. 准备：MSC 细胞培养基配制：MSC 基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml（一般分装成 10 管 50 ml，后考虑 1 株仅传 3~5 代约需多 5 管）。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
脐带间充质干细胞的分离培养的介绍
脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法，由于酶对细胞的损伤较大，且细胞得率较低，费用昂贵，因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。 取新鲜健康脐带，用PBS冲洗干净后，用剪刀镊子剔去血管，剥出里面的华氏胶组织，将所得组织充分剪碎至1 mm3大小，加入α-MEM培养液置于37℃，
胚胎干细胞培养标准操作规程(SOP)
一、细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。 2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。 3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。 4．J1rtTA-r
骨髓间充质干细胞(MSC)原代培养与传代培养实验步骤
准备工作（1）试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗（青链霉素）、75%酒精、95%酒精、培养瓶（50ml，260ml）。（2）BALB/C小鼠（4~5周龄，18~22g，雌雄不限）、胎牛血
德首次从皮肤细胞中培养出成体干细胞
据美国物理学家组织网3月23日(北京时间)报道，德国马克斯·普朗克协会的科学家22日表示，他们首次成功地从已分化的成体细胞-皮肤细胞中获得了成体干细胞，跳过了多能干细胞阶段。在实验中，该研究团队首先提取出老鼠的皮肤细胞，接着使用不同生长因子的独特结合，在合适的培养环境下，设法诱导老鼠的皮肤细胞分
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
方法：神经干细胞的培养①原代细胞的培养：取孕13.5天昆明种二级孕小鼠，引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜，取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜，暴露胎鼠，剪开颅骨，取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中，体视显微镜下剥离脑膜,分离胎
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒胎牛血清
皮肤细胞经三维培养变身神经干细胞
日前，中科院遗传与发育生物学研究所戴建武研究组成功利用三维培养，将皮肤细胞变成神经干细胞。相关研究成果发表于《生物材料》。 2006年，山中伸弥利用逆转录病毒转基因的方法实现体细胞重编程，产生诱导性多能干细胞(iPS细胞)，开创了基因调控细胞重编程的全新领域。随后大量研究表明，不同基因的联
详解造血干细胞培养基基础知识
造血干细胞培养基具有光明的临床治疗前景。然而，常用培养基含有胎牛血清（FBS），增加了病原体、异种抗原、批间不稳定性。美国FDA正考虑禁止使用FBS于细胞治疗。为此，StemRD成功研制了MessenGro?，一种无血清、无异种蛋白、化学成分明确的人间充质干细胞培养基。 造血干细胞培养基
德国首次从皮肤细胞中培养出成体干细胞
（图片来源：德国马克斯·普朗克协会网站） 德国马克斯·普朗克协会（简称马普协会）3月22日宣布，该机构研究人员成功从已分化体细胞——皮肤细胞中培养出成体干细胞，为全球首创。 现阶段，具有分化多种组织细胞潜能的诱导多功能干细胞（iPS细胞）成为不少干细胞专家的研究重点，人
脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法
种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带，保存在PBSA中，1〜24 h内处理标本。(b)去除血管，将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天，使细胞从
长期培养检测法检测造血干细胞（LTCIC）
实验概要长期培养检测法检测造血干细胞（LTC-IC）主要试剂DPBS，HSCs培养液，MethoCult®培养基，HSCs稀释液、细胞基础培养液、HLTM液体主要设备离心机，超净台，体视镜，倒置显微镜镜，96孔培养板、100 mm培养皿，3mL注射器，16号钝针头，移液器，涡旋仪，5 mL、10mL
新干细胞培养方法：两种膜的结合
培养基ES:配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶
Nature－|－胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
大鼠胚胎神经嵴干细胞的直接分离和培养
1、培养用液：HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS（ph7.4）。酶消化液。用HBSS配制，含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlD
一种新的人胚胎干细胞培养方法
为了能够适用于医学移植，人类胚胎干细胞（hESCs）需要保持一种“未分化”状态，即它们没有变换成其他类型的细胞。为了确定培养hESCs的最好方法能使它们保持未分化状态，也能生长、增殖和存活，研究人员经常使用动物来源的血细胞“饲养层”，通常来自于小鼠（小鼠胚胎成纤维细胞MEFs）。然而，这种方法存
我国全自动干细胞诱导培养设备有望转化推广
记者３日从中国科学院广州生物医药与健康研究院获悉，由该院承担的国家重大科研装备研制项目“全自动干细胞诱导培养设备研制”在广州通过技术测试和验收。这标志着全球首台全自动干细胞诱导培养设备有望进行转化推广，实现规模化、自动化、智能化的诱导干细胞制备，助推再生医学及其相关的细胞治疗领域研究。 中科院
3D细胞培养：干细胞微载体的应用
干细胞培养方法 当前干细胞最主要的培养方法仍是2D培养，2D培养仅在一个平面上支持干细胞生长，无法再现生物体内细胞真实的3D立体微环境。2D培养环境在生物活性、培养基结构、营养物质的释放等很多方面均远不及3D培养，使干细胞逐渐丧失其原有的性状、形态、结构和功能，导致其
Nature－|－胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
Nature－|－胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚
哺乳动物的发育起源于受精卵，受精卵通过分裂，经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚（Morula）再到囊胚（Blastocyst）阶段，称之为着床前胚胎（pre-implantation）。随后胚胎植入子宫壁，诱导子宫内膜蜕膜化（decidualization）预示着成功着床（i
在体外为干细胞培养搭建新型“阳光房”
通常干细胞获取比较困难，数量也极其有限。为了获取足够数量的干细胞，必须进行体外扩增。但随着扩增代数的增加，干细胞的生物学功能会逐渐减弱，干细胞可用代次受限，导致干细胞资源稀缺和成本高昂。 随着人类在生命科学领域探索的不断深入，干细胞研究和应用已经成为科学界和全球生物医药行业关注的热点之一。尽管
胚胎干细胞的来源和培养的技术和条件
体外受精会产生多个胚胎。这会产生一些过剩的胚胎不用于临床或不适合植入患者体内，因此可以在征得供体同意的情况下可能获得捐赠。人类胚胎干细胞可以从这些捐赠的胚胎中获得，或者还可以使用患者的细胞和捐赠的卵子从克隆的胚胎中提取。 胚胎囊胚期的内细胞团(感兴趣的细胞)与滋养层细胞分离，滋养层细胞将来分化为胚外
胶原酶消化法—培养脐带间充质干细胞
人脐带间充质干细胞具有高度分化潜能，基因稳定、不易突变，不会引起肿瘤；无需配型、无排异，广泛应用于疾病治疗及抗衰老研究。目前，在美容行业及针对亚健康群体的应用，也越来越引人注目。脐带间充质干细胞脐带是由包膜、华通氏胶、脐静脉、脐动脉脐构成。脐带间充质干细胞存在于华通氏胶中。由于存在数量少，用胶原酶消
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验—人胚胎干细胞系的建立
实验步骤方 案 2. 6 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立试剂与材料无菌或无菌制备□ 5〜6 天的人胚泡，经 H F E A 允许，并且像先前讨论的完全经病人同意。 HFEA所要求的全部细节能够在 H E F A 的网站找到（http//:www.hfea.g0v.uk)。□链霉蛋白酶， 0
MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞的传代培养
缩小细胞培养体积试验证明，MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中，面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量，一般使用此方法传代，每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源：《人干细胞培养》实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌完全培养培养基（CCM）、PB
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后，可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管，将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管，用无血清DMEM洗，室温250g离心5min。(d)倒掉上清液，将离