几种常用转化细胞和转化技术

1)致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验 1.取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分钟,滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入75cm/培养瓶中,接种密度10~20×106/75cm,37℃培养2~3天,在顺利情况下能迅速长满瓶面。 2.贮存:选大批生长状态良好的细胞冻存,储以备用。 3.致癌物处理:取冻存细胞,解冻,接种于25ml培养瓶中,每瓶含细胞10 万~30万。待细胞生长进入指数增生期时,向培养瓶中加入致癌剂MNNG。致癌剂量1~3微克/毫升营养液。在37℃温箱中培养12~48小时。 4.低血清培养:弃掉MNNG作用液,用温PBS洗1~3次,加入含20%小牛血清,继续置温箱中培养2~3周,然后改用含5%血清培养液培养。低血清培养液不利于正常细胞生长,但......阅读全文

土壤消毒ZL技术实现转化

  近日,中国农业科学院植物保护研究所与浙江临海市建新化工有限公司签订了二甲基二硫作为土壤熏蒸剂的应用技术ZL独家转让协议。  据悉,二甲基二硫是一种新型土壤熏蒸剂,植保所研究员曹坳程科研团队经过多年研究,发现其对土传病害和杂草,特别是根结线虫具有优异的防治效果,可以很好地替代破坏臭氧层物质的甲基溴

精密铜管:技术转化结硕果

   日前,第四届中国工业大奖发布会在北京人民大会堂举行,金龙精密铜管集团总裁李长杰代表铜管高效短流程技术装备研发及产业化项目团队领取了奖项。  项目由中科院金属研究所研究员张士宏带领的塑性加工团队与金龙铜管集团合作,此次获奖也是继该项目获得中国有色金属工业科学技术奖一等奖和国家科技进步奖二等奖之后

技术转移转化如何“突围”?

  近日,多位专家共聚北京市科学技术研究院和京津冀科研院所联盟联合主办的“智联全球·慧创未来”京津冀国际科技成果应用场景大会,共探技术转移转化“突围”之路,分享国内外技术转移转化经验。  国家科技评估中心副总评估师韩军在会上表示,我国科技成果转化还存在诸多短板,要积极向成功开展技术转移的国家学习,善

质粒的转化及转化子的鉴定实验——电转化法

实验方法原理电转化法:外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定,形成电穿孔,不仅有利于离子和水进入细菌细胞,也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。实验材料外源片段与载体的连接产物大肠杆菌感受态细胞试剂、试剂盒X-galAmpLA培养基水抗生素仪器、耗

酵母转化实验_原生质体转化

实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1.  在实验前2天,将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中,于30℃培养过夜(如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养)。2.  转化前一天晚上,从5 ml 过夜培养

成熟细胞可转化为成人干细胞

与目前其他对细胞进行重组的方法相比,其人工干预更少  据美国物理学家组织网11月21日报道,哈佛医学院和哈佛牙科学院的研究人员在11月21日出版的《自然—医学》(Nature Medicine)杂志上撰文指出,通过模拟一种罕见的遗传疾病,他们能够让成熟细胞退回到成人干细胞状态,新获得

大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法

第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的 培养基 上,在37°C下过夜培养2. 高温灭菌大的离心瓶(250-500ml)以备第二天摇瓶用3. 准备几瓶灭菌水(总量约1.5升),保存于

大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法

这都是我几年来经验总结啊,觉得有用一定要顶大肠杆菌电转化感受态细胞制备第一天: 1. 将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的培养基上,在37°C下过夜培养 2. 高温灭菌大的离心瓶(250-500ml)以备第二天摇瓶用 3. 准备几瓶灭菌水(总量约1.5升),保存于冷冻

淋巴细胞转化实验转化率是怎么反应机体细胞免疫水平的

  免疫细胞是指所有参与免疫应答过程的细胞,包括骨髓造血干细胞、淋巴细胞、单核巨噬细胞和粒细胞等。  人体内的淋巴细胞分为T细胞、B细胞和NK细胞,各有其特异的表面标志和功能,据此建立相应的检测方法。  淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标,可以判断机体的细胞免疫或体液免疫水

酵母转化

·         Yeast Transformation (Gietz Lab)LiAc/SS-DNA/PEG Transformation·         Yeast Transformation (Breeden Lab)LiAc method·         Large-Scale Y

细菌转化

实验概要本实验介绍了细菌转化的两种方法:电击法和热击法。主要试剂LB培养基主要设备电击杯,电击仪,1.5 mL的离心管,摇床,恒温水浴锅实验材料DNA样品或者连接产物,细菌感受态细胞实验步骤1. 电击转化    1) 加DNA样品或者连接产物于融化的细菌感受态细胞中,混匀后加入冰预冷的电击杯中。 

质粒转化

[ 基本原理 ] 将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲

拟南芥转化

实验概要本实验以拟南芥为试材介绍了转化及筛选的过程。主要试剂1. 渗透培养基:(1L)1/2xMurashige-Skoog5%蔗糖0. 5克MES用KOH调至pH5. 7再加:10微升lmg/ml的6-BA母液200微升Silwet L-77Top agar0. 1%琼脂PNS或水溶液2. 筛选培

DNA转化

DNA转化Chemical Transformation·         Transformation of Competent Cells (RbCl2 Method) (Goldberg Lab)Very nice protocol for E. Coli transformation inc

T细胞转化试验的相关疾病

  小儿普通易变型免疫缺陷,药物过敏,小儿原发性免疫缺陷病,严重联合免疫缺陷病,急性化脓性甲状腺炎,慢性自身免疫性甲状腺炎,小儿甲状腺功能亢进症

什么是淋巴细胞转化试验

  淋巴细胞转化试验是检测细胞免疫功能的经典试验。基本原理是采用T淋巴细胞敏感 的刺激物在体外刺激T淋巴细胞,T淋巴细胞受到刺激后可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细 胞,并进行有丝分裂。用形态学法或放射性 核素法检测T细胞的增殖程度,并以此评定相应的细胞功能。

Cell特辑:干细胞研究临床转化

  “Cell Press Selections”是由Cell出版社推出的一份推荐文章集合手册,主要介绍某个生命科学研究领域最新的进展及突出成果。相关特辑内容包括研究论文,评论性文章以及snapshots,涉及了同一领域的方方面面,更为重要的是这些文章由赞助商赞助,可以免费获取。  最新特辑大部分内

淋巴细胞转化试验的目的

淋巴细胞转化试验是检测细胞免疫功能的经典试验。基本原理是采用T淋巴细胞敏感 的刺激物在体外刺激T淋巴细胞,T淋巴细胞受到刺激后可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细 胞,并进行有丝分裂。用形态学法或放射性 核素法检测T细胞的增殖程度,并以此评定相应的细胞功能。

淋巴细胞转化试验是什么

  人类淋巴细胞在体外与特异性抗原(如结核菌素)或非特异性有丝分裂原(如植物血凝素,PHA)等一起孵育,T细胞即被激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加,最后导致细胞分裂。  在光学显微镜下可计数转化后的淋巴母细胞数,也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)

转化细胞计数原理和计数方法

转化细胞实验原理测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和稀释平板计数法。 直接计数法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,则难于直接测定。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser)细菌计数板。两种计数板的原

淋巴细胞转化试验方法

T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)或特异性抗原刺激后,可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加、细胞体积增大并能进行分裂的淋巴母细胞,此称为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低,可以反映机体的细胞免疫水平,因此,可作为测定机体免疫功能的指标之一。本实验采用形态学方法进行淋

T淋巴细胞转化试验介绍

  T淋巴细胞转化试验:体外培养时,T淋巴细胞在有丝分裂原如植物血凝素(PHA)或刀豆素A(CONA)的刺激下,代谢活跃,增加蛋白质、RNA和DNA的合成,从而转化为母细胞,部分细胞发生有丝分裂。从而反应T淋巴细胞的免疫功能。T淋巴细胞转化试验(T lymphocyte transformation

拉曼技术正在坐等临床转化

拉曼技术正在坐等临床转化  “拉曼技术正在坐等临床转化。这项研究只需要有针对性地打破障碍,以拉曼作为临床工具向前迈进。” Mahadevan Jansen说。一旦这样,内外科医生将可以更加准确有效地诊断多种疾病。  一项正在进行的研究表明,基于拉曼的设备可以广泛应用在临床诊断中。此外,该技术可以用于

衣藻的遗传技术(转化)实验

实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基,在通气和恒定光照条件下,培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁,低速离心浓缩细胞,在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为

神经调控技术临床转化获进展

  近日,清华大学玉泉医院与清华大学航天航空学院神经调控技术国家工程实验室举行战略合作签约仪式,以推进全国神经调控技术的临床转化应用,建立全国神经调控术后程控规范化培养基地。据悉,此次合作是清华大学临床医学跨院系“产学研一体化”科研项目,是清华大学转化医学的又一成功案例。  据介绍,神经调控是利用植

衣藻的遗传技术(转化)实验

            实验材料 细胞 试剂、试剂盒 EcoRI 酶 仪器、耗材

衣藻的遗传技术(转化)实验

衣藻的遗传技术(转化)             实验材料 细胞 试剂、试剂盒

美开发出“间接谱系转化”技术

  据物理学家组织网12月5日(北京时间)报道,美国萨克生物研究所开发出一种“间接谱系转化”(ILC)技术,能由成熟细胞生成干细胞,允许干细胞及其衍生物的无限生产,并可将生成时间从2个月缩短至15天。相关研究报告发表在本周出版的《自然·方法》杂志上。   推广干细胞疗法需要克服的障碍之一就是快速生

衣藻的遗传技术(转化)实验

实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基,在通气和恒定光照条件下,培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁,低速离心浓缩细胞,在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为

生物质转化的关键技术

木糖是多缩戊糖的一个组分,分子式为C5H10O5。在自然界迄今还未发现游离状态的木糖。天然D-木糖以多糖的形态存在于植物中,在农产品的废弃部分如玉米芯、棉籽壳、甘蔗渣、稻壳以及其他禾秆、种子皮壳等中含量较多。因玉米芯产量大,多缩戊糖含量最高,易存储,结构相对疏松,易于提取,因而被大量用于木糖生产。木