衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基,在通气和恒定光照条件下,培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁,低速离心浓缩细胞,在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为 109 个/ml。4. 将细胞放入灭菌烧瓶中,刚好盖上瓶底,在亮光下轻摇 4 个小时。5. 转化时,将细胞稀释到 1.7X108 个/ml,取 0.3 ml 加入装有 0.3 g 玻璃珠的 15 ml 带塑料帽的圆锥形离心试管中。6. 加入灭菌 PEG 溶液,终浓度为 5%。7. 立即加入 1 μg 线性化的 pMN24 DNA,用旋转混合仪最高速度旋转混合 45 秒。8. 立即加入 10 ml SGII-NO3 培养基稀释交配混合液,将细胞倒入一干净的 15 ml 试管中,用桌面医......阅读全文
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基,在通气和恒定光照条件下,培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁,低速离心浓缩细胞,在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为
衣藻的遗传技术(转化)实验
衣藻的遗传技术(转化) 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料细胞试剂、试剂盒EcoRI 酶仪器、耗材SGII 培养基实验步骤1. 500 ml 烧瓶中装 250 ml SGII 培养基,在通气和恒定光照条件下,培养细胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切质粒。3. 去细胞壁,低速离心浓缩细胞,在 SGII-NO3 培养基重悬细胞为
衣藻的遗传技术(转化)实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 EcoRI 酶 仪器、耗材
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验
配子发生 交配 合子成熟 合子萌发 实验材料 细胞苔层
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验
配子发生 交配 合子成熟 合子萌发 实验材料 细胞苔层
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验
实验材料 细胞苔层试剂、试剂盒 蒸馏水仪器、耗材 培养基实验步骤 1. 在含 M 或 TAP 培养基的琼脂平板上生长细胞苔层。配子最容易从成熟但不老的细胞苔层获得。2 周以内的培养物最好,但较老的平板培养物常与一些细胞株一起使用。2. 用接种环取 1 环细胞,重悬在 1 ml 灭菌蒸馏水中。3. 光
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验——交配
实验材料mt+ 和 mt- 配子仪器、耗材96 孔皿相差显微镜或 DIC 显微镜实验步骤1. 在 96 孔皿的 1 个孔中混合基本等量的 mt+ 和 mt- 配子。2. 光照 2 小时,用相差显微镜或 DIC 显微镜取 1 滴交配混合液分析交配效果。3. 将 1 滴交配混合液滴到琼脂平板中心。4.
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验——合子萌发
实验材料合子仪器、耗材平板立体解剖显微镜实验步骤1. 打开平板包装,将表面用灭菌的单刃剃刀片刮几次。2. 平板光照至少 18 小时。3. 用立体解剖显微镜将合子放到平板上,用纤维光源照亮平板。4. 用圆头玻璃针,将萌发的四分体的 4 个细胞推压分开大约 5 mm,形成一个圆圈。5. 平板光照 1 周
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验——合子成熟
实验材料合子仪器、耗材平板铝箔实验步骤1. 光照 18~24 小时孵育合子。2. 再强力塑料包装材料包裹平板,再用铝箔封好,放黑暗中至少 5 天。平板可在黑暗中数月保持活力,也不会干燥。如果 5 天后所有合子萌发形成八细胞,将细胞在黑暗处放更长的时间。黑暗孵育更长时间通常会得到更高的四细胞萌发百分率
衣藻的遗传技术(四分体分析)-实验——配子发生
实验材料细胞苔层试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材培养基实验步骤1. 在含 M 或 TAP 培养基的琼脂平板上生长细胞苔层。配子最容易从成熟但不老的细胞苔层获得。2 周以内的培养物最好,但较老的平板培养物常与一些细胞株一起使用。2. 用接种环取 1 环细胞,重悬在 1 ml 灭菌蒸馏水中。3. 光照下 3
已经存在的微藻生物质转化技术
已经存在的微藻生物质转化技术可以大致分为以下三类:1)不通过提取工艺,直接将微藻转化为可再生燃料。2)加工处理全部微藻生物质转化为燃料。3)加工微藻提取物(如脂质、碳水化合物)生产燃料。
《科学》:衣藻基因组基本测定完成
通过100余位科学家的努力,衣藻(一种单细胞土生藻类)的基因组已经基本测定完成。在10月12日的《科学》杂志上,研究人员发表了他们对莱氏衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)基因组的分析报告。研究人员在衣藻基因组中发现了动植物早期进化的线索,尤其是在光合作用和鞭毛进化方面。
李小波博士等发现光合作用所需的多个候选基因
莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是一种非常有价值的真核模式生物,被广泛用于与光合作用、呼吸作用、脂类合成、细胞运动(生物鞭毛)、非生物胁迫等生物学过程相关的功能研究(图1)【1】。长期以来,通过同源重组将外源基因插入是敲除莱茵衣藻基因的主要方式,与外源基因的随机插入
关于莱茵衣藻等36种“三新食品”的公告
根据《中华人民共和国食品安全法》规定,审评机构组织专家对莱茵衣藻等3种新食品原料、喹啉黄铝色淀等18种食品添加剂新品种、磷酸锆(2:1)等15种食品相关产品新品种的安全性评估材料进行审查并通过。特此公告。附件:莱茵衣藻等36种“三新食品”的公告文本国家卫生健康委2022年5月5日
莱茵衣藻光保护蛋白PsbS快速瞬间积累和功能
FluorCam叶绿素荧光系统发表文献选录—莱茵衣藻光保护蛋白PsbS快速瞬间积累和功能 所有光合生物都必须要应对过量光照来避免光合氧化胁迫。对于植物和绿藻来说,高光的最快响应机制就是非光化学淬灭(NPQ)。这一过程允许将过量能量以热量形式安全地耗散掉。PsbS蛋白是这一过程中的重要传感器。为了确定
CMD1基因通过去甲基化调控莱茵衣藻对高光强的适应性
DNA甲基化是指DNA序列上特定的碱基通过共价键结合的方式获得一个甲基基团的化学修饰过程,是一种普遍存在于生物体的DNA修饰方式。DNA甲基化能够在不改变DNA序列的前提下改变遗传表现,是表观遗传学的核心研究领域之一。目前的研究表明,DNA甲基化与基因组印记、X染色体失活、转座因子抑制、衰老和癌
植物所揭示莱茵衣藻m6A表观转录组图谱
m6A是广泛存在于真核生物mRNA中的表观修饰,与RNA命运相关。近年来,m6A修饰在植物胚胎发育、茎尖分生组织的命运决定、表皮毛发生、根部发育、叶形态发生、开花转变、胁迫响应、果实成熟及孢子发生等多个生物学过程中发挥重要功能。然而,m6A在藻类中的功能尚不清楚。藻类包含从单细胞到多细胞的多种细
微藻提取物的转化化学催化介绍
酸和基础的化学催化剂可以分为Bronsted 和Lewis 两类,Lewis 酸性催化剂,如AlCl3 和ZnCl3,可高效将三酰甘油转化为脂肪酸甲酯。其它有效的化学催化剂还有ATixMO,HTiNbO3,TiVO4 等。化学催化剂面临的问题是寻找与现有催化剂催化活性一样,但所需反应温度低的催化剂。
新方法打破基因编辑技术对遗传转化依赖
近日,中国农业科学院油料作物研究所油料作物逆境生物学和抗性改良团队联合成都市农林科学院相关团队,建立了一种新型的基因编辑方法。该方法打破了基因编辑技术对遗传转化的依赖,直接通过授粉的方式对油菜和甘蓝的基因进行基因编辑,获得了不含转基因元件的突变材料。相关研究成果发表于《植物生物技术杂志》。 油菜
微藻脂质代谢机制有了新进展
近日,大连理工大学孔凡涛副教授受邀在《生物技术的当前观点》发表综述文章,介绍了微藻脂质代谢机制及其提高油脂含量的研究进展。 微藻的光合作用效率高、能合成富含能量的储存脂质(即油脂)、具有大规模种植、不与农作物争夺耕地和淡水等优势,广泛应用于食品及保健品、生物柴油等领域。同时,在全球碳循环中发挥
微藻提取物的转化-酯交换反应简介
酯交换反应用于将微藻中提取的甘油三酯转化为FAMEs(fatty acid methyl esters),仅仅是将醇基由另一个醇基或者酯基取代的过程,可以使用/不使用催化剂,通过不同的加热系统,促进反应。这一技术已经相对成熟,并且在将菜籽油转化为生物柴油的过程中应用广泛。酸催化的酯化反应是酯化反应的
微藻提取物的转化-超临界工艺介绍
超临界工艺是最近发展起来的一项可以同时实现油脂提取和转化的技术(Demirbas,2007)。使用超临界工艺提取微藻油脂效率要远远高于传统的溶解分离技术,同时也可以高效提取微藻中其他组分。由于超临界液体是有针对性的,因此可实现提取物的高纯度和高浓度。另外,在提取物和剩余物质中,没有有机溶剂污染。提取
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。 【内容】:1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物遗传转化 【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。 【内容】:1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养
农杆菌介导的遗传转化程序
实验概要农杆菌侵染实验实验步骤(1) 农杆菌菌液的制备 将农杆菌接种于附加50mg/L Km、50mg/L Sm、50mg/L Rif的YEB固体培养基上,28℃暗培养,至长出单菌落。用接菌环挑取单菌落,接种在5mL含相应抗生素的YEB液体培养基中,于28℃,200r/min 培养过夜。待
农杆菌介导的植物遗传转化
实验概要以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基:LB培养基100ml;MS 盐溶液(pH 7.0)100ml,
藻酸盐包裹实验
实验材料藻酸盐试剂、试剂盒生理盐水无血清培养基CaCl2苯巴比妥钠葡聚糖仪器、耗材加样枪磁力搅拌器注射器研钵荧光酶标仪实验步骤1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为1.5%; 2. 收集培养的肿瘤细胞,用无血清的培养基洗涤1 次,将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中; 3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用
藻酸盐包裹实验
1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为1.5%;2. 收集培养的肿瘤细胞,用无血清的培养基洗涤1次,将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中;3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用1 ml加样枪缓慢滴入磁力搅拌的250 mM CaCl2溶液中,形成乳白色的藻酸盐小珠。继续静置于25
藻酸盐包裹实验
实验材料 藻酸盐试剂、试剂盒 生理盐水无血清培养基CaCl2苯巴比妥钠葡聚糖仪器、耗材 加样枪磁力搅拌器注射器研钵荧光酶标仪实验步骤 1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为1.5%; 2. 收集培养的肿瘤细胞,用无血清的培养基洗涤1 次,将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中; 3. 将上述肿瘤细胞