法医DNA检验仪器和的试剂国产化打破国外垄断

“法医学DNA提取、纯化试剂与DNA自动提取仪的研制”课题通过验收 2010年6月30日,由公安部物证鉴定中心承担的“十一五”国家科技支撑计划“物证信息挖掘与综合应用关键技术研究”项目“法医学DNA提取、纯化试剂与DNA自动提取仪的研制”课题在北京通过公安部主持的课题验收。 该课题以法医DNA提取试剂、法医DNA纯化试剂、法医DNA自动提取仪和法医现场检材DNA自动提取仪为研制目标,是我国法医学DNA检验技术国产化战略迈出的重要一步。经过近3年的努力,先后攻克了磁珠制作、试剂构成、试剂各成份溶解性、磁珠团聚、常温环境细胞多重裂解、仪器自动化设计与软件控制等关键技术,研制出了3种试剂盒、2种仪器。其中,DNA提取试剂主要应用于DNA数据库建设等工作中大批量样本的提取检验,能够与目前国内DNA实验室应用的大型提取工作站配套应用;所研制的法医DNA纯化试剂,主要应用于案件现场疑难微量检材的提取纯化,实现了与目前已有的......阅读全文

DNA快速检验全球研究进展(三)

芯片毛细管电泳具有进样量少,灵敏度高,分析速度快等特点,非常适合法医DNA-STR的快速检验。毛细管电泳芯片由于尺寸小,可施加较大场强,所以在几秒钟内就可完成对样品的分离,微阵列毛细管电泳芯片可实现高通量检测则成为目前学者研究的热点。2002年Emrich CA等[31]报道的将高通量384孔毛

DNA快速检验全球研究进展(一)

影视作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意见从而借对话引出对案情分析的桥段,其中会包含对遇害者的情况分析诊断,也就是“古代法医”的部分工作。1247年(中国南宋理宗淳祜七年),时任湖南提点刑狱兼大使行府参议官的宋慈编写完成《洗冤集录》,这是世界历史上第一本以死亡方式系统编辑的法医学著作。《洗冤

DNA快速检验全球研究进展(二)

2.2 快速扩增检验一种常用的快速扩增研究方法是选用合适的快速酶并结合快速循环程序对现有的常规试剂盒进一步优化,以达到缩短PCR扩增时间为目的。如2008年Vallone等[13]将PyroStart和SpeedSTAR两种酶结合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burn

DNA复制检验点通路成员协同响应DNA复制胁迫的分子机制

中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所、深圳合成生物学创新研究院甘海云课题组在PNAS上,发表了题为《复制胁迫状态下芽殖酵母中Rad53耦联先导链和后随链DNA合成的机制》(A mechanism for Rad53 to couple leading- and lagging-strand

研究揭示DNA复制检验点通路成员协同响应DNA复制胁迫机制

  中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所、深圳合成生物学创新研究院甘海云课题组在PNAS上,发表了题为《复制胁迫状态下芽殖酵母中Rad53耦联先导链和后随链DNA合成的机制》(A mechanism for Rad53 to couple leading -and lagging-stran

美国通过DNA检验-希望防止食物中毒

  美国科学家使用脱氧核糖核酸DNA检测技术,辨认食物内导致中毒的细菌,以更早地发现这些细菌,从而能阻止大规模食物中毒事件的发生。   市面上的食品琳琅满目,让人食指大开。不过,随着食物中毒事件上升,公众渐渐对食品安全有所顾虑。为应对食物中毒情况,美国亚特兰大疾病控制与预防中心的专家,在进行有害细菌

法医DNA检验仪器和的试剂国产化-打破国外垄断

  “法医学DNA提取、纯化试剂与DNA自动提取仪的研制”课题通过验收  2010年6月30日,由公安部物证鉴定中心承担的“十一五”国家科技支撑计划“物证信息挖掘与综合应用关键技术研究”项目“法医学DNA提取、纯化试剂与DNA自动提取仪的研制”课题在北京通过公安部主持的课题验收。  该课题

出厂时必须批批检验-丽江用DNA检测牦牛肉

  丽江古城除了人多、酒吧多,还有一多就是牦牛肉多。从古城玉河广场沿着东大街走,二三十米就能见到一个卖牦牛肉的柜台,各种包装,各种口味,是游客们喜爱的零嘴和伴手佳品。但这些牦牛肉真的都是牦牛的肉吗?为了给牦牛肉验明正身,丽江市食品药品监督管理局近日出台了《丽江市牦牛肉制品生产流通管理办法》(以下简称

实验室检验检测工具土壤dna提取试剂盒

土壤的成分包括矿物质、粘土等无机物、植物及植物的遗体、腐殖物质等土壤有机物以及在土壤中存在的微生物。从土壤中提取的DNA,是微生物、动植物遗体等的总DNA,同时,腐殖物质的性质与DNA很相似,DNA提取过程中会将腐殖等物质一起纯化,采用传统的DNA提取方法来除去腐殖物质等抑制因子是十分困难的。而这些

全局DNA甲基化重塑技术帮助检验体外实验模型是否有效

  一些神经疾病的发病率正在攀升,特别是那些与衰老有关的疾病,如阿尔兹海默症和帕金森。为了更好地了解这些疾病,评估潜在新疗法,生物学家需要能在实验室进行研究的精确模型。  来自Salk和Stanford的研究人员,与Baylor医学院的合作者证明,用之前发表的方法诱导神经细胞,与大脑中自然发育的神经

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA序列测定2

目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法(双脱氧链终止法)和Maxam(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都同样生成相互独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组核苷酸都有共同的起点,却随机终止于一种(或多种)特定的残基,形成一系列以某一特定核苷酸

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA序列测定3

2.利用末端转移酶和α-32P-ddNTP标记DNA的3ˊ-末端 在二价阳离子存在下,末端转移酶催化dNTP加入DNA分子的3ˊ-羟基末端,如果作为底物的核苷酸经过修饰(如ddNTP),则可以在DNA的3ˊ-OH上仅加入一个核苷酸。对于双链DNA片段,亦存在DNA的两侧均被标记问题,可通过上述同

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA序列测定1

㈣ DNA聚合酶 如前所述,选用合适的DNA聚合酶进行测序反应也是保证测序质量的重要因素之一。常用于双脱氧末端终止法测序的有几种不同的酶: 1.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow片段) 此酶是最早用于建立Sanger测序的酶。但通常会有两个问题:①Klenow片段的持续合成能力较

DNA重组技术(DNA-Recombination)

一、DNA 的酶切与连接(1)酶切反应:同质粒DNA 的鉴定,只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切,则成比例增加。(2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。(3)15000rpm离心15min,弃上清。(4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2

二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定1

重组DNA是在体外用限制性内切酶,将不同来源的DNA分子进行特异地切割,获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接,从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞,在宿主细胞中进行无性增殖,获得大量的目的基因或DNA片段,此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1

载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定2

(1)CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子(如Ca2+、Mg2+等)低渗溶液中时,细菌细胞膨胀成球形,处于感受态;此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面,在丰富培养基中生长数小时后,球状细胞恢复原

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定3

当多克隆位点有外源DNA片段插入时,破坏此酶的N端阅读框架,产生无α互补功能的N端片段,因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色,见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短,不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框,有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

DNA合成(DNA-synthesis-)技术介绍

蛋白质概念提出:DNA多肽合成(DNA synthesis ):按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。)目前,oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,此方法具有高效

海宁“短、平、快”DNA检验法获全国公安基层技术革新奖

  DNA实验室检测水平不断提升   2010年前,海宁所在的嘉兴市仅有一家设在嘉兴市公安局刑侦支队的DNA实验室。发案后,现场提取的物证均需送往市公安局检验,现场勘查和物证检验相对割裂,很多物证不能及时对比,有时会延误破案的最佳时机。2010年8月,海宁市公安局成立了嘉兴市首个县级公安机关DNA实

DNA-指纹的概念高变区DNA与DNA指纹

人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段(10bp 左右)多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后,用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ,然后将样品进行

“垃圾DNA”或是编码DNA的“保镖”

"垃圾DNA"的概念源自上世纪70年代,用来形容基因组中不是编码蛋白质的DNA序列,在学术上被称为非编码DNA序列。 非编码DNA"开关说"究竟是个啥? 科学家们发现,人类基因组中包含多达400万个基因开关和功能调节因子,它们的载体便是"垃圾DNA"。这强烈地冲击了"DNA序列=生物性

DNA-Immunoprecipitation-for-the-Determination-of-DNABinding-Specificity

Andrea J. Gossett and Jason D. Lieb1Department of Biology, University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, NC 27599, USA1Corresponding autho

DNA-Fingerprinting,-DNA-Barcoding,-and-Next-Generation-Sequencing-...

DNA fingerprinting of plants has become an invaluable tool in forensic, scientific, and industrial laboratories all over the world. PCR has become

“垃圾DNA”或是编码DNA的“卫士”

   “垃圾DNA”的概念是在上世纪70年代提出来的,用来形容那些基因组中不是编码蛋白质的DNA序列,而在学术上被称为非编码DNA序列。  由于当时的科学家普遍认为有生物学意义的蛋白质才是决定生物性状的关键,而且也没有一种好的理论和技术手段来解释这些“垃圾”存在的原因,于是“垃圾DNA”这一观念便形

DNA提取方法洗涤-DNA(或-RNA)

当裂解物通过硅胶膜进行离心分离,现在所提取的 DNA 或 RNA 应该与柱子结合,杂质、细胞蛋白和多糖应该已经通过了。 但是,膜仍然被残留的细胞蛋白质和盐弄脏。如果样品来自植物,仍然会有多糖,也许一些色素留在膜上,或者如果样品是血液,膜可能会被染成棕色或黄色。洗涤步骤用于去除这些杂质。通常有两次洗涤

DNA重组(DNA-recombination)技术:工具酶

一、限制性内切酶限制性内切酶(restriction endonucleases,RE)是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶,能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。(一)命名原则限制性内切酶大多从细菌中发现,根据来源进行命名,限制酶的第一个字母(大写,斜体)为宿主菌的属名,第二、第三

DNA连接酶(DNA-ligase)介绍

DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA