DNA快速检验全球研究进展(二)

2.2 快速扩增检验一种常用的快速扩增研究方法是选用合适的快速酶并结合快速循环程序对现有的常规试剂盒进一步优化,以达到缩短PCR扩增时间为目的。如2008年Vallone等[13]将PyroStart和SpeedSTAR两种酶结合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burnie,MD)可实现快速扩增,SpeedSTAR酶(Takara Bio USA,Madison,WI)可提高腺苷酸化,优化各位点间的峰平衡,同时结合快速循环程序将Identifiler®扩增时间缩短为36 min;Amanda Foster[14]选择SpeedSTARTMHS DNA聚合酶,使用Bio-Rad C1000TM扩增仪进一步提高升降温循环的速率,同时修正每步的热循环参数,并采用两步代替3步的PCR方法使AmpFLSTR® Identifiler®整个扩增的时间为26 min;Bahlmann等[15]......阅读全文

DNA快速检验全球研究进展(二)

2.2 快速扩增检验一种常用的快速扩增研究方法是选用合适的快速酶并结合快速循环程序对现有的常规试剂盒进一步优化,以达到缩短PCR扩增时间为目的。如2008年Vallone等[13]将PyroStart和SpeedSTAR两种酶结合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burn

DNA快速检验全球研究进展(三)

芯片毛细管电泳具有进样量少,灵敏度高,分析速度快等特点,非常适合法医DNA-STR的快速检验。毛细管电泳芯片由于尺寸小,可施加较大场强,所以在几秒钟内就可完成对样品的分离,微阵列毛细管电泳芯片可实现高通量检测则成为目前学者研究的热点。2002年Emrich CA等[31]报道的将高通量384孔毛

DNA快速检验全球研究进展(一)

影视作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意见从而借对话引出对案情分析的桥段,其中会包含对遇害者的情况分析诊断,也就是“古代法医”的部分工作。1247年(中国南宋理宗淳祜七年),时任湖南提点刑狱兼大使行府参议官的宋慈编写完成《洗冤集录》,这是世界历史上第一本以死亡方式系统编辑的法医学著作。《洗冤

DNA分子标记技术研究进展(二)

2.第二代分子标记2.1 SSR标记技术    在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列,如重复单位长度在15~65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA),重复单位长度在2~6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DNA)。小卫星和微卫星DNA分布

基于数字PCR的单分子DNA定量技术研究进展(二)

2  qPCR与dPCR比较研究 qPCR是目前DNA定量研究的主要技术,该技术通过在PCR反应体系中加入荧光结合染料(SYBR green I) 或荧光标记的探针( 如TaqMan Probes) ,利用实时积累的荧光信号监测整个扩增过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,以此来评估

HIV检验技术的研究进展

【关键词】  人类免疫缺陷病毒;聚合酶链反应;抗原  [摘要] 艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种严重威胁人类身体健康的疾病。为有效遏止HIV的蔓延,除寻求更加有效的疫苗和治疗药物外,HIV早期诊断十分重要,其早期诊断主要靠实验诊断,包括病原学、免疫学、分子生物学等。  [关键词]

用于PCR的植物基因组DNA快速制备方法(二)

2 结果与讨论2.1 PCR模板DNA的快速制备本方法是将少量植物叶片在TE溶液或去离子水中,经钨合金珠在离心管内的振荡破碎,直接获得DNA溶液。用多功能组织细胞研磨器(MTM-60)一次可操作60个样品。琼脂糖凝胶电泳表明,用TE和去离子水都可获得分子量较大的DNA片段(图1A)。用TE制备的DN

线粒体DNA甲基化研究进展

  DNA 甲基化是表观遗传修饰的重要方式之一. 线粒体是真核细胞内的关键细胞器, 线粒体DNA(mtDNA)编码部分线粒体基因, 其 mtDNA 的甲基化修饰可能引起所编码基因的异常表达, 从而参与调节生理和病理过程. 近期来自西安交通大学生命科学与技术学院的研究人员就目前 mtDNA 甲基化及其

RNAi的研究进展(二)

三,RNAi的应用前景RNAi 技术中的相关问题主要涉及以下几点:(1) dsRNA 序列的选择dsRNA 主要选自已知的cDNA 的开放阅读框架(ORF) 中的基因区域。为防止mRNA 调控蛋白对RISC 与靶RNA 结合的干扰,应避免选择包括:1) 起始密码子下游或终止密码的50~100 核

酵母DNA的快速分离

实验方法原理 根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中提取,并且可以用于转化 E. coli。实验材料 酵母细胞试剂、试剂盒 乙醇酚氯仿醋酸钠STES 缓冲液TE仪器、耗材

酵母DNA的快速分离

根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中提取,并且可以用于转化 E. coli。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据该方案制备的酵母 DNA 可

酵母DNA的快速分离

            实验方法原理 根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也可以从酵母中提取,并且可以用于转化 E. coli。

快速制备酵母DNA法

实验概要本实验制备了酵母转化质粒,快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2% Triton X-100,1%SDS,100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl(pH8),1mmol/L Na2EDTA,苯酚:氯仿:已戊醇(25:24:1),YP

菌落总数快速检验纸片

本品可用于各类食品及饮用水中菌落总数的测定,由细菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以开始进行抽样检测,而且操作简便,通过酶显色剂的放大作用,使菌落提前清晰地显现出来,培养十几小时就开始出现红色菌斑,非常适合于食品

心肺复苏的研究进展(二)

 三.CPR基础与临床的科学研究是一个系统工程   CPR不仅是将一个突然倒地的患者经过及时按压,自主循环恢复送到医院进行救治的简单过程,也不是仅凭掌握CPR技术的目击者实施的简单救命技术,如果详细阅读2010AHA版的CPR指南,更多地是强调CPR从基础到临床,从社区到医院,从现场目击者到EMSS

质粒DNA的小量快速提取

实验概要本实验介绍了质粒DNA小量快速提取的基本原理及操作步骤。实验原理在碱性条件下,染色体DNA和质粒DNA都发生变性,但质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当用酸性的高盐缓冲液将pH中和至中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型并溶解在溶液中,而染色体DNA不能复性而形

转化子DNA的快速鉴定—快速细胞破碎法

目的:1、掌握用细胞破碎液裂解菌体细胞,并通过电泳的方法细胞中不同分子量质粒的方法;2、从实验六的氨苄青霉素抗性转化子中筛选仅含一个拷贝目的基因的重组载体。原理:挑选8~10个白菌落接于平板过夜培养。利用破碎细胞缓冲液中的十二烷基硫酸纳(SDS)在37℃溶解膜蛋白,使细胞破裂,然后高速离心,将含有质

唾液检验(二)

  (四)激素  Shannon等研究结果表明,脂溶性非结合类固醇容易通过微循环和唾液细胞时入唾液,其浓度与血浆中的非结合类固醇浓度相关。如皮质醇、醛固酮、脱氢雄甾醇、睾酮、孕酮、雌二醇、雌三醇等无可通过唾液测 定,用于评价肾上腺皮质功能和生殖医学研究。  (五)酶类  1.淀粉酶(amylase)

纯化DNA实验_基因组DNA的快速纯化

试剂、试剂盒尾部缓冲液蛋白酶 K仪器、耗材离心管玻璃棒实验步骤第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液(配 25 ml)50 mmol/L

全球粉末涂料市场快速扩容

  美国增长咨询公司弗若斯特沙利文5月发表的研究报告称,全球粉末涂料市场2013年的销售额约为77.7亿美元,预计2020年销售额将达到125.3亿美元,年均增长率为7.1%。全球粉末涂料的市场集中度较高,2013年前三大粉末涂料生产商约占全球35.6%的市场份额。全球粉末涂料市场供货量同样将保持增

科学家用DNA分子造出-全球最小二极管

  北京时间4月5日下午消息,佐治亚大学和以色列内盖夫本·古里安大学的研究人员利用DNA分子制造出了新型二极管。  据新浪科技报道,这被认为是全球尺寸最小的二极管。研究人员表示,这将促进DNA元件的开发,推动分子电子学的发展。  二极管的功能是实现电流的单向流动。40多年前,科学家提出,可以将二极管

食品的快速检验检测技术

  摘要:食品安全已成为社会关注的焦点问题。文章介绍了目前常用的食品安全快检技术,并展望了其发展方向。   引言   食品安全(food safety)是指食品无毒、无害,符合应当有的营养要求,对人体健康不造成任何急性、亚急性或者慢性危害。俗话说“民以食为天”,食品安全关系到人民群众的身体健康和生命

DNA分子标记技术研究进展(一)

遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用,随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起,遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映,它具有

多肽抗生素研究进展(二)

β-defensins比α-defensins大一些,一般含有38~42个氨基酸残基。都含有3个二硫键和4~8个精氨酸。昆虫defensins在C末端与α-defensins相似,但是只有两个β片层结构,中间有一段α螺旋起稳定作用。主要对革兰阳性菌起作用,而对真菌没有作用。植物defensins一般

儿童肾移植研究进展(综述)(二)

  移植后需要考虑的问题    1、移植物的存活    随着时间的推移,受助儿童移植肾存活率得到了大幅提升,无论移植物是来自存活还是死亡的捐赠者。    这些进展归功于如下几个因素:移植前准备的完善、移植技术的提高、更好的供体选择、更有效的免疫抑制药物、小儿特定药代动力学的深入了解,以及询证医学药物

土壤酶化学计量研究进展(二)

 土壤(A)和凋落物(B)胞外酶活性对氮沉降的响应 该文的通信作者Robert L. Sinsabaugh更是土壤酶活研究领域的领军人物,于08年在Ecology Letters上报道了全球尺度的土壤酶活化学计量研究成果(Robert L. Sinsabaugh, et al., 2008);于09

DNA的定量(二)

2. EB荧光分析法(1)琼脂糖凝胶的制备。(2)样品的准备。把待测DNA样品进行1:2连续稀释,并准备一份DNA标准液作对照。(3)上样。稀释样品与上样缓冲液按1:5混合均匀后上样。(4)电泳。用100V稳压电泳至溴酚蓝指示剂迁移到凝胶的3/4处停止电泳。(5)取出凝胶,入EB荧光染液中作用20m

基因组DNA的快速纯化

第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中,加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K,在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液(配 25 ml)50 mmol/L Tris,pH 8                      

哺乳动物-DNA-的快速分离

根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 k

哺乳动物-DNA-的快速分离

            实验方法原理 根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。