液相色谱仪分析中的“调节剂”缓冲盐正确使用的重要性

在高效液相色谱仪分析过程中,缓冲液是不可或缺的,因为要用它来调节流动相的pH值,缓冲盐使用不当,后果可是吃不了兜着走。比如说,液相色谱仪的色谱柱压升高、柱效下降、保留时间异常等等不良影响: (1)柱压升高; 原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高。 (2)相同化合物的保留时间发生变化; 原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化. (3)柱效下降; 原因:i)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降;ii)凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效下降。因此液相色谱仪用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。 使用前和使用后的处理都是有讲究的哦! 1. 使用前的处理: 在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相......阅读全文

高效液相制备色谱仪类型

高效液相制备色谱仪类型有多种。1、按分离目的可分:化验室高效液相制备色谱仪和工业高效液相制备色谱仪。2、按灵敏性可分:微量高效液相制备色谱仪和痕量高效液相制备色谱仪。3、按结构可分:台式高效液相制备色谱仪和落地式高效液相制备色谱仪。4、按分离特点可分:高效高效液相制备色谱仪、高压高效液相制备色谱仪和

高效液相色谱仪中反相色谱缓冲液的选择

反相色谱中缓冲液的选择化合物的划分通过HPLC分离的样品可根据其在分离系统(或流动相)中的状态分成中性样品和离子样品所谓中性样品是在分离条件下不能离解的化合物,而离子化合物可以离解离子。换句话说,离子样品指的是酸碱化合物,而中性化合物是其它化合物。有盐流动相好在那里反相色谱(RPC)主要是基于待分离

高效液相色谱仪在做含有缓冲液的流动相时一般要冲多...

高效液相色谱仪,在做含有缓冲液的流动相时,一般要冲多久的柱子?色谱柱冲洗的长度取决于您的色谱柱。色谱柱长度决定流动相的缓冲时间  根据标准,它需要冲洗10倍的色谱柱体积,但是如果是研究和开发来做实验,通常会节省一些时间。  需要250毫米长的柱子冲洗柱子至少半小时。反相高效液相色谱柱,如C8和C18

高效液相和超高效液相的区别

超高效液相系统耐压更高,可以以更高的流速进行分析,并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高,即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的,高效液相色谱具有更细的流动相传输管路,内径更细的色谱柱,从而使死体积变小,理论塔板数更高,分析时间更短。超高效就是

实验室高效液相色谱仪如何选择缓冲液pH值

在选择缓冲液pH值之前,应先了解被分析物的Pka,高于或低于Pka两个PH值单位的,有助于获得好的、尖锐的峰,从公式:pH=pKa+log([A-]/[A])得知,溶液pH值高于或低于pKa两个单位,化合物中99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获 得好的尖锐的峰。显示的是它的离子形式和中

如何选择液相缓冲液pH值

如何选择缓冲液pH值在选择缓冲液pH值之前,应先了解被分析物的Pka,高于或低于Pka两个PH值单位的,有助于获得好的、尖锐的峰,从公式:pH=pKa+log([A-]/[A])得知,溶液pH值高于或低于pKa两个单位,化合物中99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获 得好的尖锐的峰。显示

高效液相蛋白质色谱仪种类

高效液相蛋白质色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:实验室高效液相蛋白质色谱仪和工业高效液相蛋白质色谱仪。2、按功能可分:分析型高效液相蛋白质色谱仪和制备型高效液相蛋白质色谱仪。3、按固定相和流动相的极性大小可分:正相高效液相蛋白质色谱仪和反相高效液相蛋白质色谱仪。4、按灵敏性可分:微量高效液相蛋白

高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)

附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No.             产品ZL号 Serial No.出厂日期  Date填料  Column Paking     如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col

高效液相色谱之高效排阻液相色谱

高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方

高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)

反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色

高效色谱仪液相和电脑连接不上

原因可能是这三个:检测器电源没开,检测器的网线没有插好,仪器跟aic断开连接。

超高效液相色谱柱-可以在高效液相色谱仪使用吗

完全可以,我们实验室就是用的超高惰性的色谱柱用在安捷伦1200上,只是压力会变得比较大,只要不超过仪器的压力上限就可以了。

液相色谱流动相中缓冲液有那些作用

有很多,比如酸类的:醋酸,磷酸,TFA等缓冲液;碱类的:三乙胺,二乙胺。还有盐类的:磷酸二氢钾,酸酸氢二钾等。作用主要就是调节PH,防止样品解离,便于分离,峰型更好。

高效液相色谱仪与经典液相柱色谱仪的差别

高效液相色谱仪是在经典液相柱色谱仪的基础上,引入了气相色谱仪的理论,采用了高压输液泵、高效固定相、梯度洗脱技术和高灵敏度检测器,具有高压、高速、高效、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点。一、工作压力差别:1、经典液相柱色谱仪工作压力:常压或减压。2、高效液相色谱仪工作压力:高压,1.5×107~3

高效气相色谱仪七种常用固定液

一、二甲基聚硅氧烷:  1、型号:OV-1(类似型号有SE-30和OV-101)  2、极性:非极性  3、使用温度:-60~350℃二、苯基(5%)乙烯基(1%)二甲基聚硅氧烷:  1、型号:SE-54(类似型号有SE-52)  2、极性:弱极性  3、使用温度:-60~350℃三、氰丙基(7%)

高效气相色谱仪常用固定液的性能特点

  高效气相色谱仪常用固定液有聚甲基硅氧烷、5%聚苯基甲基硅氧烷、氰基硅油和聚乙二醇等,性能特点如下:一、聚甲基硅氧烷:  1、极性:非极性  2、zui高使用温度:320℃二、5%聚苯基甲基硅氧烷:  1、极性:弱极性  2、zui高使用温度:320℃三、氰基硅油:  1、极性:中等极性  2、z

反相高效液相色谱

实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛(HPLC级)去离子水(HPLC级) 三氟乙酸(TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析(即在步骤①中不加样)。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。(1)线性梯

反相高效液相色谱

方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合

高效液相色谱柱

一、怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。 (1)硅胶基质填料: 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(

高效液相色谱技术

高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场

高效液相色谱原理

以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以

高效液相色谱原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱原理

以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以

高效反相液相色谱

反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液

高效反相液相色谱

            实验方法原理 反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高

高效反相液相色谱

实验方法原理反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反

高效液相色谱原理

采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测

高效液相色谱原理

采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测

高效液相色谱特点

  ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。  ②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。  ③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离

高效液相色谱积分

正常操作不建议手工积分,手工积分会人为的带来误差,同一次测定的对照品和样品的色谱图最好是在设定一个固定的积分条件进行积分计算,积分参数一致的情况下进行可减少人为主观意识上的误差。