链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。此实验方案介绍了一种经三步反应的技术，它通过使用链亲和素-第二抗体结合物，然后再与生物素-荧光染料结合物反应，提高了免疫组化反应的敏感度。实验材料组织样品试剂、试剂盒生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材离心机摇床实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 ......阅读全文
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2. 待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3.
链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法，在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光
生物素亲和素标记缺点
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且比恬度高，具多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
标记亲和素生物素法（BAELISA）实验
实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原
标记亲和素生物素法（BAELISA）实验
检测未知抗原 检测未知抗体 实验方法原理 亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。
标记亲和素生物素法（BAELISA）实验——检测未知抗体
实验方法原理包被抗原：用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释，于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml，于4 ℃放置18～24 h。用洗涤缓冲液洗3次，每次3 min。 加样：加适当稀释的待检样品（未知抗体）于反应孔中，同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h，洗涤
标记亲和素生物素法（BAELISA）实验——检测未知抗原
实验方法原理亲和素是卵白蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，对生物素有非常高的亲和力（结合常数高达1015M-1）。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原（
生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用（二）
注意： Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数（单位= cm -1 M -1）。 FQY = 在水性缓冲液（pH 7.2）中的荧光量子产率。 2.生物素化二抗 我们提供生物素化的二抗，可与基于链霉亲和素的扩增技术
生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用（一）
生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小，它可以与生物活性大分子（例如抗体）广泛结合，而不会对其功能（即抗体的结合位点）产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性，以及后续键的强度，可实现强大的流线型生物测定应用。
标记的链霉卵白素生物素法(LSAB)
标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术，20世纪80年代开始采用。基本试剂：① 第一抗体；② 生物素化第二抗体；③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法：1. 将固定后的标本用PBS漂洗；2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min，用来密封内源性过
生物素亲和素系统介绍
生物素－亲和素系统（Biotin-Avidin—System，BAS）是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应，使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素（biotin，B）
亲和素和生物素为什么亲和力最高
生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且比恬度高，具多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异性亲和
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带－Poly(A)+RNA
生物素化寡聚脱氧胸苷-链亲和素磁珠纯化带 Poly(A)+RNA 试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液 稀释
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带－Poly(A)+RNA
试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液 稀释缓冲液 β-巯基乙醇 无 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。仪器、耗材 亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针 磁架 75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管 15 ml 螺旋盖锥形离心管 Tissu
生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带－Poly(A)+RNA
用磁性微球代转纤维索作为介质，这种方法比较常用且已商品化。试剂、试剂盒GTC 抽提缓冲液稀释缓冲液 β-巯基乙醇无 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。仪器、耗材亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针磁架75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管1
生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用（一）
上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统，以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用，今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物，与生物素类似，链霉亲和素分子本身也较小，同时也可以与生物活性大分子（例
生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用（二）
HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色：将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育，然后与生物素化的山羊抗兔IgG（H＆L）（Cat# 16794）进行孵育，然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物（Cat# 16966），使用D
链亲和素的性状
链亲和素的性状描述级别：Biotechnology grade活力：≥17 units/mg proteinDnase,Rnase&protease activity：None detectedElectrophoresis （One Band）：Pass产品描述：Streptomyces av
免疫组织化学常用的检测方法
免疫组织化学（immunohistochemistry）技术的基本原理是抗原-抗体的反应。利用带有标记物（如荧光素或辣根过氧化物酶等）的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起
蛋白质糖基化检测实验_生物素亲和素复合物观察糖蛋白
用生物素-亲和素复合物观察选择性标记糖蛋白实验材料蛋白样品试剂、试剂盒醋酸钠丙酮实验步骤一、过碘酸钠氧化糖蛋白样品1. 在 0.1 mol/L 醋酸钠 pH 4.5 缓冲液（50 mmol/L 磷酸钠，pH 7.4 ) 中制备蛋白溶液，在冰上预冷。2. 用水制备新鲜的 0.5 mol/L 过碘酸钠原
生物素亲合素系统的生物素与亲和层析介绍
亲和层析是将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开，然后选用适当的洗脱液， 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来。 生
病毒免疫荧光实验_荧光素标记抗体
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法：较为常用，具体步骤是：1) 抗体溶液的制备：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素：根据待标记抗体的总量，按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白
免疫印迹与免疫检测实验——亲和素生物素偶联
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TTBS缓冲液TBS缓冲液过氧化物酶碱性磷酸酶仪器、耗材摇床硝酸纤维素膜尼龙膜实验步骤1. 在旋转摇床或摆动平台中持续摇动使膜与合适的封闭液平衡。对于硝酸纤维素膜或PVDF膜，需在室温封闭30~60 min。尼龙膜则需在37℃封闭2 h。2. 用TTBS溶液（用于硝酸纤
抗体的生物素化标记
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后，生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。NHSB：N-羟基琥珀酰亚胺生物素（有商品供应）0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液，pH
抗体的生物素化标记
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后，生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB：N-羟基琥珀酰亚胺生物素（有商品供应） 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液
生物素链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍
中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定 义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似，但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少，且不含糖基，在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生
生物素亲和素系统要注意什么问题
灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合，形成的生物素衍生物，不仅保持了大分子物质的原有生物活性，而且比恬度高，具多价性。此外，每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异
亲和素－生物素系统在ELISA中的应用
亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，生物素－羟基琥珀亚胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子
生物素标记蛋白操作方法
下面的操作方法可以使约3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合，对某些蛋白来说，生物素与蛋白的分子比可根据不同的生物素化要求进行调整。1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中，并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液（如Tris或者甘氨酸），可以通过在PBS中透析或
生物素标记蛋白操作方法
1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中，并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液（如Tris或者甘氨酸），可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算：蛋白质量（mg）/蛋白分子量（MW）＝蛋白质的毫摩尔数。 2. 在打开之前，平衡生物素至室温。加2 mg