生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(二)

HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物(Cat# 16966),使用DAPI(Cat# 17507)对细胞核进行复染。 ①. 用于成像和流式细胞术的iFluor-链霉亲和素缀合物: 产品名称 Ex / Em(nm) 滤光片组 消光系数 FQY² 规格 货号 iFluor™350链霉亲和素 344/448 DAPI 20,000 0.95 1 m......阅读全文

链霉亲和素的分子量

链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级,这一性质常用于分子生物学用途 。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基,分子量为16450。

链霉亲和素为什么可以提高融合率

链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸组成中,甘氨酸和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基;链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带任何糖基。在蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在N端10~12和C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结

链霉亲和素磁珠(SA-magnetic-bead)性能比较研究

磁性聚合物微球兼具高分子微球特性和磁响应性,因此,广泛应用于靶向给药、生物诊断、催化剂制备、磁成像等领域。目前,大部分的生物分子是通过表面的氨基或者羧基与磁性微球表面的基团共价结合的方式直接固定化在磁性微球的表面。这种方法不仅复杂,还会使固定化的生物分子活性受到较大影响,例如抗体可能会失去与抗原的特

适用于TRFRET的荧光染料:trFluor-链霉亲和素

时间分辨荧光:理论上,荧光是最灵敏的检测手段,由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。而现在偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移(FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中。在生物溶液或血清中的很多化合物和蛋白质是自发

链亲和素的性状

链亲和素的性状描述级别:Biotechnology grade活力:≥17 units/mg proteinDnase,Rnase&protease activity:None detectedElectrophoresis (One Band):Pass产品描述:Streptomyces av

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)

       注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率。        2.生物素化二抗       我们提供生物素化的二抗,可与基于链霉亲和素的扩增技术

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(一)

       上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统,以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用,今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物,与生物素类似,链霉亲和素分子本身也较小,同时也可以与生物活性大分子(例

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(二)

        HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物(Cat# 16966),使用D

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(一)

       生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小,它可以与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性,以及后续键的强度,可实现强大的流线型生物测定应用。

抗链霉亲和素IgG抗体干扰抗环瓜氨酸肽(CCP)IgG

血液中抗环瓜氨酸肽(抗CCP)IgG抗体的检测主要用于类风湿性关节炎的诊断。在实验室中,研究人员怀疑由于抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体导致的抗CCP抗体IgG抗体错误升高。在本研究中,我们以标准化方法评估了初级保健机构中抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体的流行情况以及抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体对来自三个不

标记的链霉卵白素生物素法(LSAB)

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过

链霉抗生物素蛋白的特性和应用

中文名称链霉抗生物素蛋白英文名称streptavidin定  义一种链霉菌产生的抗生物素蛋白,为四聚体,亚基分子质量约14.5 kDa,在酶联免疫吸附检测中广泛使用,因其不含糖链,比蛋清中的抗生物素结合蛋白在某些情况下更适用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

生物素链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定  义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似,但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少,且不含糖基,在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生

粗糙链孢霉的杂交

实验概要通过对链孢霉杂交所产生的子囊孢子的观察,了解分离和交换现象,并进行统计,计算交换值。实验原理粗糙链孢霉(Neurospore crassa )属于真菌类,子囊菌纲,球壳目,脉孢菌属,又称为红色面包霉。     粗糙面包霉的营养体是由单倍性(n=7)的多核菌丝组成的。生殖方式有无性生殖和有性生

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物 仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

            试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物

链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验

免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光

链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验

实验材料 组织样品试剂、试剂盒 生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.

粗糙链孢霉的分离和交换

【实验目的】1.用粗糙链孢霉的赖氨酸缺陷型和野生型进行杂交,并观察杂交所得后代的子囊孢子的分离和交换现象。2.掌握顺序排列四分体的遗传学分析方法,进行有关基因与着丝粒距离的计算和作图,加深理解基因分离和连锁交换规律。 【实验原理】粗糙链孢霉(Neurospora crassa,2n=14),又称红色

生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA

生物素化寡聚脱氧胸苷-链亲和素磁珠纯化带 Poly(A)+RNA             试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液   稀释

生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA

用磁性微球代转纤维索作为介质,这种方法比较常用且已商品化。试剂、试剂盒GTC 抽提缓冲液稀释缓冲液 β-巯基乙醇无 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。仪器、耗材亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针磁架75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管1

生物素化寡聚脱氧胸苷链亲和素磁珠纯化带-Poly(A)+RNA

试剂、试剂盒 GTC 抽提缓冲液 稀释缓冲液 β-巯基乙醇 无 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。仪器、耗材 亲和素-磁珠 (SA-PMP)生物素标记的 oligo(dT) 探针 磁架 75℃ 水浴50 ml 无菌 Corex 离心管 15 ml 螺旋盖锥形离心管 Tissu

亲和素和生物素为什么亲和力最高

生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异性亲和

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱操作说明

【概要】玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又称F-2毒素,是玉米赤霉菌的代谢产物,具有类雌激素样作用,具有较强的生殖毒性和致畸作用,可引起动物发生雌激素亢进症,导致动物不孕或流产,对家禽、猪、牛和羊的影响较大,给畜牧业带来很大的经济损失。【适用范围及性能】用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料

生物素亲和素标记缺点

灵敏度生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比恬度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。特异

生物素亲和素系统介绍

生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应,使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。BAS目前已广泛用于抗原、抗体的定性、定量检测及定位观察研究。生物素(biotin,B)

亲和素的应用特点

亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子

生物亲和素-ELISA-知识

生物素亲和素 (又称抗生物素) 系统 (biotinavidinsystem,BAS) 标记抗体的技术是 20 世纪 70 年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使 BAS 标记技

Biotin标签蛋白纯化工具的应用类型

Biotin 标签与其它标签的球形蛋白不同,生物素(Biotin)要小得多,这使蛋白质间的干扰更小;同时可以多个生物素偶联在单个蛋白质上,利用链霉亲和素,可使检测效果最大化。此外,生物素含有戊酸侧链,很容易与其它基团反应偶联生成相关衍生物,且不影响链霉亲和素与生物素的结合功能,极大拓展了生物素的应用