适用于TRFRET的荧光染料:trFluor链霉亲和素

时间分辨荧光:理论上,荧光是最灵敏的检测手段,由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。而现在偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移(FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中。在生物溶液或血清中的很多化合物和蛋白质是自发荧光的,利用传统的快速荧光基团进行检测极大的限制了实验灵敏度。使用长寿命的荧光基团结合时间分辨的检测方式(在荧光激发和发射检测之间有一个时间延迟)可将快速荧光的干扰降到最低。时间分辨荧光(TRF)利用稀土元素中镧系元素的独特性质。再TRF中常用的镧系元素是钐(Sm)、铕(Eu)、铽(Tb)、镝(Dy)。与传统荧光基团相比,他们具有大的斯托克位移,和非常长的发射半衰期(从微妙到毫秒),这使它们在生物学荧光应用领域中日益重要。通过直接激发使镧系元素离子产生荧光是不容易的,因为这些离子很难吸收光子,镧系元素必须首先与有机分子形成复合物,有机......阅读全文

适用于TRFRET的荧光染料:trFluor-链霉亲和素

时间分辨荧光:理论上,荧光是最灵敏的检测手段,由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。而现在偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移(FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中。在生物溶液或血清中的很多化合物和蛋白质是自发

链霉亲和素的分子量

链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级,这一性质常用于分子生物学用途 。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基,分子量为16450。

链霉亲和素为什么可以提高融合率

链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸组成中,甘氨酸和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基;链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带任何糖基。在蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在N端10~12和C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结

链霉亲和素磁珠(SA-magnetic-bead)性能比较研究

磁性聚合物微球兼具高分子微球特性和磁响应性,因此,广泛应用于靶向给药、生物诊断、催化剂制备、磁成像等领域。目前,大部分的生物分子是通过表面的氨基或者羧基与磁性微球表面的基团共价结合的方式直接固定化在磁性微球的表面。这种方法不仅复杂,还会使固定化的生物分子活性受到较大影响,例如抗体可能会失去与抗原的特

链亲和素的性状

链亲和素的性状描述级别:Biotechnology grade活力:≥17 units/mg proteinDnase,Rnase&protease activity:None detectedElectrophoresis (One Band):Pass产品描述:Streptomyces av

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(二)

        HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色:将固定和透化的HeLa细胞中的α-tubulin与兔抗tubulin一抗一起孵育,然后与生物素化的山羊抗兔IgG(H&L)(Cat# 16794)进行孵育,然后加入iFluor™647-链霉亲和素偶联物(Cat# 16966),使用D

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(二)

       注意:        Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1)。       FQY = 在水性缓冲液(pH 7.2)中的荧光量子产率。        2.生物素化二抗       我们提供生物素化的二抗,可与基于链霉亲和素的扩增技术

生物素姊妹篇链霉亲和素及其衍生物的应用(一)

       上一期我们给大家介绍了目前在生化实验中被广泛使用的生物素-链霉亲和素结合系统,以及其中的第一个成员——生物素及其衍生物以及他们的一些常规的应用,今天给大家带来了该系统中另外一个重要的成员——链霉亲和素及其衍生物,与生物素类似,链霉亲和素分子本身也较小,同时也可以与生物活性大分子(例

生物素链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用(一)

       生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小,它可以与生物活性大分子(例如抗体)广泛结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性,以及后续键的强度,可实现强大的流线型生物测定应用。

抗链霉亲和素IgG抗体干扰抗环瓜氨酸肽(CCP)IgG

血液中抗环瓜氨酸肽(抗CCP)IgG抗体的检测主要用于类风湿性关节炎的诊断。在实验室中,研究人员怀疑由于抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体导致的抗CCP抗体IgG抗体错误升高。在本研究中,我们以标准化方法评估了初级保健机构中抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体的流行情况以及抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体对来自三个不

标记的链霉卵白素生物素法(LSAB)

标记的链霉卵白素-生物素法(LSAB法)是标记的卵白素技术,20世纪80年代开始采用。基本试剂:① 第一抗体;② 生物素化第二抗体;③ 辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。实验方法:1. 将固定后的标本用PBS漂洗;2. 于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过

链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验

实验材料 组织样品试剂、试剂盒 生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。 3.

链亲和素生物素结合物免疫荧光标记实验

免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光

链霉抗生物素蛋白的特性和应用

中文名称链霉抗生物素蛋白英文名称streptavidin定  义一种链霉菌产生的抗生物素蛋白,为四聚体,亚基分子质量约14.5 kDa,在酶联免疫吸附检测中广泛使用,因其不含糖链,比蛋清中的抗生物素结合蛋白在某些情况下更适用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

生物素链霉抗生物素蛋白系统的方法介绍

中文名称生物素-链霉抗生物素蛋白系统英文名称biotin streptavidin system定  义利用生物素与链霉抗生物素蛋白有很高亲和结合能力设计的检测分析系统。与生物素-抗生物素蛋白系统相似,但链霉抗生物素蛋白表面所带正电荷少,且不含糖基,在实验中非特异性结合远低于抗生物素蛋白。应用学科生

单分子荧光染料——ATTO荧光染料

单分子荧光检测技术是近十年来迅速发展起来的一种超灵敏的检测技术,其检测尺度可以精确到纳米量级,是单分子检测的首选方法。该检测技术利用荧光标记来显示和追踪单个分子的构象变化、动力学、单分子之间的相互作用以及进行单分子操纵。而荧光染料作为重要的标记物在单分子检测中起到了举足轻重的作用。荧光染料,指吸收某

单分子荧光染料——ATTO荧光染料

单分子荧光检测技术是近十年来迅速发展起来的一种超灵敏的检测技术,其检测尺度可以精确到纳米量级,是单分子检测的首选方法。该检测技术利用荧光标记来显示和追踪单个分子的构象变化、动力学、单分子之间的相互作用以及进行单分子操纵。而荧光染料作为重要的标记物在单分子检测中起到了举足轻重的作用。荧光染料,指吸收某

荧光染料

中文名荧光染料外文名fluorescent dye定义:荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。

粗糙链孢霉的杂交

实验概要通过对链孢霉杂交所产生的子囊孢子的观察,了解分离和交换现象,并进行统计,计算交换值。实验原理粗糙链孢霉(Neurospore crassa )属于真菌类,子囊菌纲,球壳目,脉孢菌属,又称为红色面包霉。     粗糙面包霉的营养体是由单倍性(n=7)的多核菌丝组成的。生殖方式有无性生殖和有性生

免疫亲和柱荧光计快速测定玉米赤霉烯酮

玉米赤霉烯酮快速分析技术1、简述玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN),又称 F2 毒素,是由禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、尖孢镰刀菌、黄色镰刀菌、串珠镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰刀菌、雪腐镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物,是一种雌激素真菌毒素。化学名为6-(10-羟基-6-氧基-1-炭烯基)β-雷琐

荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术(三)

       灵活的工作流程:与IHC,ICC,ISH和流式细胞仪兼容:        PSA™成像技术可适用于能在其检测方案中添加HRP的任何应用,并且与免疫学应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。与传统的IHC,ICC,ISH和FC应用程序结合使用时,PSA™成像可显著提高检测灵敏度,而不会降

IHC石蜡技术

实验概要免疫组织化学  (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA  等免疫测定方法低,但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此,从 IHC 获得的信  息结合显微技术提供了一副“宏图”,使来自其它

IHC石蜡技术

实验概要免疫组织化学  (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA  等免疫测定方法低,但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此,从 IHC 获得的信  息结合显微技术提供了一副“宏图”,使来自其它

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物 仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液聚乙烯乙二醇T5E5 缓冲液Dpn I蛋白酶 KRNA 酶 A5'端为生物素-TEG 且 3'端为核糖胞嘧啶的引物蛋白酶 K 处理过的 PCR 产物仪器、耗材 磁铁链霉抗生物素蛋白珠子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂1X ATEN 缓冲液(见第

顺磁性链霉抗生物素蛋白珠子的纯化实验

            试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液 聚乙烯乙二醇 T5E5 缓冲液 Dpn I 蛋白酶 K RNA 酶 A 5'端为生物

荧光素大全:荧光素及其衍生物产品汇总(二)

       1. 荧光素相关产品        我们提供广泛的荧光素产品选择,包括反应性荧光素和荧光素衍生物,用于标记抗体,核酸和其他生物分子,结合物,指示剂以及用于检测细胞,组织匀浆和溶液中酶活性的底物。        荧光素标准品: 产品名称货号荧光素* CAS 2321-07-5 *1荧光素

如何选择最亮的荧光染料荧光染料亮度排行汇总(一)

       荧光染料是细胞生物学等科学研究中不可或缺的重要工具,荧光滤色块是荧光显微镜中至关重要的一个部件。我们大家在操作荧光染料亮度的时候,我们可以按照上面的比较方法去比较荧光染料的亮度,那么一般荧光染料亮度怎么进行比较?        荧光染料的亮度可以用来比较不同荧光染料的荧光标记效果,通过

如何选择最亮的荧光染料荧光染料亮度排行汇总(二)

       荧光标记染料        图4.将 HeLa细胞与(Tubulin +)或不与(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后与iFluor™488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,左)或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,右)。细胞核用Hoechst 33

IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点

IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术,由于技术相对简单且直观,在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多;每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本;固定标本该用醇还是醛;如何选择最合适的一抗;抗原修