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串联体化实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson 翻译:赵志奇 陈军试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶实验步骤实验方案 A 和 B1.将切下并纯化的双标签连接为串联体:2.在 16t℃ 下孵育 2 h。3.将双标签串联体上取样于 8% 的聚丙稀酰胺凝胶的一个泳道,用 100bpladder 作为分子量标准,在室温、80℃ 电泳 3 h。4.EB 染色。5.将含有 400bp 或更大串联体的凝胶区切下。6.如同实验方案 8 所描述的那样,从切下的凝胶片段中纯化 DNA 以分离双标签片段。但不要在 37°C 而是在 65℃ 下孵育,离心前不需干冰/乙醇冰浴。7.沉淀后,用 70% 乙醇冲洗沉淀物 2 次,晾干后重新溶于 40ul 的 LoTE 中展开......阅读全文

质谱沙龙第十六期活动报道

      2009年2月22日下午,质谱沙龙第十六期活动在第二炮兵总医院远程会诊中心会议室举行。此次到会者除了来自发酵研究院、清华大学医学院、北京大学分析中心、二炮总医院、军事医学科学院、解放军307医院、北京生命科学研究所、中科院植物所、AB公司

克隆串联体实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶仪器、耗材 试剂盒PCR仪实验步骤 一、在pZero的I位点连接串联体1.SphI酶切载体,与按大小回收的串联体片段连接;我们推荐在pZero的Sph1位点上克隆串联体,有关于在此载体上克隆的细节我们参考了Zero Background 克隆试剂盒

2017年3月Cell期刊不得不看的亮点研究

  3月份即将结束了,3月份Cell期刊又有哪些亮点研究值得学习呢?小编对此进行了整理,与各位分享。  1.Cell:长生不老药有望即将来临  doi:10.1016/j.cell.2017.02.031  在一项新的研究中,研究人员发现一种肽能够选择性地寻找和破坏阻止组织正常更新的衰老细胞,并且证

克隆串联体实验

试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶仪器、耗材试剂盒PCR仪实验步骤一、在pZero的I位点连接串联体1.SphI酶切载体,与按大小回收的串联体片段连接;我们推荐在pZero的Sph1位点上克隆串联体,有关于在此载体上克隆的细节我们参考了Zero Background 克隆试剂盒的使用

克隆串联体实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE cDNA标签 连接酶

大化所二氧化碳加氢制低碳烯烃取得新进展

  我所李灿院士,李泽龙博士等人在CO2催化加氢制备低碳烯烃方面取得新进展:实现了串联式催化剂体系上直接将CO2高选择性的转化为低碳烯烃。近日,该研究成果在ACS Catalysis (ACS Catal. 2017, 7, 8544-8548)上发表。  李灿团队长期致力于太阳能光催化、光电催化、

基因表达系列分析实验(SAGE)

实验材料感兴趣的细胞或组织试剂、试剂盒糖原EDTA缓冲液SDSBSATween 20连接子T4 DNA 连接酶BsmFIPC8SeeDNA乙酸钠乙醇DMSOPCR引物乙酸铵DNA ladder聚丙烯酰胺 TBE凝胶DNA参照pZErO-1 质粒TE缓冲SOC培养液Tris · Cl仪器、耗材微量离心

串联体化实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶实验步骤 实验方案 A 和 B1.将切下并纯化的双标签连接为串联体:2.在 16t℃ 下孵育 2 h。3.将双标签串联体上取样于 8% 的聚丙稀酰胺凝胶的一个泳道,用 100bpladder 作为分子量标准,在室温、80℃ 电泳 3 h。4.EB

膏体充填开采模式 成功破解绿色矿山开采“生死局”

  今年的盛夏,刘东人很“爽”:他们迎来矿山绿色开采的“新欢”后,矿区“被套”资源盘活了,矿井服务年限延长了,环境污染杜绝了,与矿区居民关系也和谐了。  去年底,新光集团刘东煤矿与飞翼股份有限公司合作实施膏体充填采煤项目。今年5月,项目通过了江苏、安徽两省经信委联合组织的现场验收评审。专家一致认为项

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验             实验步骤

中国科大发现治疗肝纤维化智能疗法

  日前,国际学术期刊《美国化学会·纳米》在线发表了中国科学技术大学教授梁高林、廉哲雄课题组的合作研究成果,报道了一种增强抗肝纤维化效果的新型策略,并在动物模型上显示了比目前临床策略更优异的治疗肝纤维化的效果。  多种慢性肝脏疾病会发展成肝纤维化,若不对其进行及时干预,则会进一步恶化为肝硬化甚至肝癌

串联体化实验

            试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE cDNA标签 连接酶 实验步骤

中国科大在治疗肝纤维化研究中取得进展

  10月4日,国际学术期刊ACS Nano 在线发表了中国科学技术大学化学与材料科学学院教授梁高林课题组和生命科学学院教授廉哲雄课题组的合作研究成果,文章标题为Tandem Enzymatic Self-Assembly and Slow Release of Dexamethasone Enha

Cell Research:一类全新植物异染色质蛋白

  研究人员发现一类植物特有的新型组蛋白甲基化阅读器ADCP1,并确定其为动物HP1(Heterochromatin Protein 1,异染色质蛋白1)功能同源蛋白,揭示出其在植物异染色质维持和转座子元件沉默中的作用,彰显了不同生命界中表观机制的复杂性和保守性。  2018年11月13日,清华-北

MALDI技术在质谱成像中的应用

  一、质谱成像技术简介  成像质谱(IMS)是一种非常灵敏的分子成像技术,可提供组合的分子信息和空间分辨率。它允许从组织切片、单细胞或其他物质表面直接鉴定和定位化合物分子。成像质谱研究的核心特点是质谱仪的高灵敏度、技术的无标签性、对肽和蛋白质的成像能力,以及从个体水平(几百微米)到细胞水平(几十纳

电子传递和光合磷酸化

原初反应使光系统的反应中心发生电荷分离,产生的高能电子推动着光合膜上的电子传递。电子传递的结果,一方面引起水的裂解放氧以及NADP+的还原;另一方面建立了跨膜的质子动力势,启动了光合磷酸化,形成ATP。这样就把电能转化为活跃的化学能。一、电子和质子的传递(一)光合链(photosynthetic c

Nat Rev Genetics | 环状RNA的合成与功能

  环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新兴的内源性非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),是继microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非编码RNA家族中极具研究潜力的新成员。越来越多的研究表明,环状RNA具

脉冲场凝胶电泳的分子质量标准

PFGE 用于分离很大的 DNA 分子,因而需要很高分子质量的标准。这种标准可以按照 Lauer 等(1977 ) 介绍的方法从噬菌体,如 T7 (40kb)、T2 (166kb)和 G (758kb) 提取获得。但是一个更好的覆盖范围更广的系列标准是 λ 噬菌体 DNA 的系列串联体。后面介绍的具

我国科学家揭示MLL1融合蛋白引发白血病的新机制

  2019年9月17日,美国科学院院刊PNAS杂志在线发表了南开大学药学院杨娜课题组与中科院生物物理所许瑞明课题组、范祖森课题组的合作研究成果,题为“A higher-orderconfiguration of the heterodimeric DOT1L-AF10 coiled-coil do

研究揭示DNA某些区域可免受辐射伤害

  印度最近一项研究发现,人体DNA中的某些区域可免受辐射伤害,这一发现对维持人类基因组稳定性至关重要。相关研究成果日前在线发表在美国细胞出版社旗下的《iScience》杂志上。  人类基因组不断受到内源性和外源性损伤的挑战,维持基因组稳定性对任何生物体生存都至关重要。在外源性因素中,电离辐射是造成

生物质谱技术在蛋白质组学中的应用

  一、 前言[1,2]   基因工程已令人难以置信的扩展了我们关于有机体DNA序列的认识。但是仍有许多新识别的基因的功能还不知道,也不知道基因产物是如何相互作用从而产生活的有机体的。功能基因组试图通过大规模实验方法来回答这些问题。但由于仅从DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验(四)

三、蛋白质的硝化修饰酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸侧链的硝化与亚硝化作用构成了蛋白质硝化PT M 的主要部分。这些加成反应由发育、氧化应激及衰老过程中产生的活性氮介导。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的过度反应或调控紊乱造成的(Yeo et al.,2008)。活性氮和活性氧能够靶向于D

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验4

五、质 谱 分 析质谱仪器的多种设计和配置都支持蛋白质组的动态性质及其相关 P T M 的研究工作 。对 鉴 定 PTM 而言,质谱仪的最重要的两个特征(feature) 就是其质量准确度和分辨率 。与蛋白质鉴定不同 (其通常是基于鉴定同一蛋白质中的多个独立肽段)P T M 必须通过单独的 MS/M

新技术用声波取外泌体诊断癌症

  美国一研究小组9月18日在《美国国家科学院院刊》上发表研究报告称,他们开发出一种运用声波从血液中快速提取细胞外泌体的新技术,能显著改进外泌体或胞外囊泡的提取过程,运用这一技术的微流体便携装置,有望成为血检新工具,使医生快速获得癌症等疾病的特征信息。  细胞外泌体是活体细胞分泌的一种膜性囊泡,直径

二氧化碳加氢制芳烃研究取得新进展

  中国科学院大连化学物理研究所催化基础国家重点实验室中科院院士李灿、博士李泽龙、博士生曲圆直等人在CO2催化加氢制备芳烃研究方面取得新进展:通过串联式催化剂体系直接将CO2高选择性地转化为芳烃。近日,该研究成果在《焦耳》(Joule)上发表。  李灿团队长期致力于太阳能光催化、光电催化、电催化分解

强!中国学者用最短时间突破100篇CNS生命科学领域成果

  【90】2020年6月28日,中国科学院,海南医学院,协和医学院等多单位合作,高福,秦川,严景华及戴连攀共同通讯在Cell 在线发表题为“A universal design of betacoronavirus vaccines against COVID-19, MERS and

脂质组 LC/MS自动化鉴定及相对定量(一)

脂质组学的前景 脂质组学作为一门新兴的研究学科,其成果对于科学家深入理解细胞生理和病理过程十分重要。脂质轮廓分析在疾病表型研究中的应用正成为转化医学中蓬勃发展的一个方向。通过特异性脂质生物标记物的鉴定,我们有希望区分健康人群与患病风险人群,进行疾病早期诊断、并推动个性化医疗的建立。&nbs

基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验

钙调素(CaM) 是普遍分布的蛋白质,参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时,CaM 获得强亲和力,结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白,启动或终止 Ca2+ 调控的信号串联。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料PRSETB 细菌表达质

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤 一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启

“与诺奖同行”成为清华学生的“小目标”

  “巅峰对话”第二十期开幕式上,杨振宁、Aaron Ciechanover、施一公与学生们探讨“科学中的挑战精神与创新思维”。  活动开始前,1957年诺贝尔物理学奖得主杨振宁在学生的镜头前说了这样一句话:“很开心能参加你们年轻人所组织的这个活动,我想这样的活动对于你们也许会有些用处。”  在清华