Antpedia LOGO WIKI资讯

串联体化实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 LoTE cDNA标签 连接酶 实验步骤 实验方案 A 和 B 1.将切下并纯化的双标签连接为串联体: 2.在 16t℃ 下孵育 2 h。 3.将双标签串联体上取样于 8% 的聚丙稀酰胺凝胶的一个泳道,用 100bpladder 作为分子量标准,在室温、80℃ 电泳 3 h。 4.EB 染色。 5.将含有 400bp 或更大串联体的凝胶区切下。 6.如同实验方案 8 所描述的那样,从切下的凝胶片段中纯化 DNA 以分离双标签片段。但不要在 37°C 而是在 65℃ 下孵育,离心前不需干冰/乙醇冰......阅读全文

用于蛋白质表达的标签实验(一)

一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

定量定性蛋白质组学新工具亮相ASMS

赛默飞世尔科技在ASMS 2010展示定量定性蛋白质组学工具   美国犹他州盐湖城(2010年5月25日)– 全球服务科学领域的领导者赛默飞世尔科技,今日公布了其在蛋白质组学工具方面的重大进步,并表示这些进步将推动定量和定性蛋白质组学研究取得突破性的进展。这些新产品与赛默飞世尔科技其它的试剂和耗材

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素亲和力和可溶性的选择在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正

用于蛋白质表达的标签实验

实验步骤 一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启

赛默飞世尔科技:为蛋白质组学提供深层次解决方案

  定量蛋白试剂盒  在蛋白分析相关的试剂消耗品方面,Thermo Fisher Scientific都是直接在仪器上开发的。由于试剂和仪器时配套的,从而能够提高分析效率。例如细胞培养氨基酸稳定同位素标记技术(SILAC)和串联质谱标签(tandem mass tag)试剂盒。  细胞培养氨基酸稳定

赛默飞ASMS发布两款Orbitrap系列液质 一款小巧一款“高大上”

  分析测试百科网讯 6月2-6日,全球质谱界盛会—第67届美国质谱年会(67th ASMS,以下简称ASMS)在美国亚特兰大盛大举行。会议期间,赛默飞发布了两款Orbitrap系列新液质,并举办了媒体发布会和Thermo Fisher Happy Night!媒体发布会现场  赛默飞在本届ASMS

赛默飞在HUPO上发布两款新质谱

Thermo Scientific Exactive Plus EMR 和 Q Exactive Plus Orbitrap 系统在 HUPO上加入最新 Orbitrap 

形形色色的蛋白标签(二)

  体内标记   对于in vivo标记,人们通常用化学标记的营养物喂养细胞,让它们掺入新合成的蛋白、核酸或代谢物。之后收获细胞,分离出这些分子,从整体上查看细胞行为,或利用抗体或其他捕获试剂来研究某个蛋白。   蛋白质组研究人员常用的方法是SILAC,即细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记。两

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验6

七、P T M 的定量分析当研究 P T M 的生物学意义时,如能了解一个特定修饰或一组P T M 的相对或绝对丰度通常会有帮助。这样可以将不同的生物样品间的目的修饰进行直接比较。例如, 将正常与疾病状态下细胞或组织内某一 P T M 的丰度进行比较。定量分析这些变化能够帮助深人了解 P T M 在

翻译后修饰蛋白质的定性和定量实验(五)

六、CID、ECD和 ETD的对比基于质谱的蛋白质组学分析依赖于气相中肽段在低碰撞能量下断裂, 在质量谱图中形成峰。进而通过峰图确定肽段序列,再推断出相关蛋白质。完成肽段断裂最主要的方法就是碰撞诱导解离(collision induced dissociation,C I D ) ( S w

质谱检测法与蛋白质分析(三)

  Protein(s):待测蛋白质样品;Enz. Digestion:酶解;Pep. Mixture:裂解产物混合物;   MS Analysis:质谱检测分析;DB Search:数据库比对搜索;Identities:鉴定;   Prot.DB :蛋白质数据库;Proteom

质谱检测法如何进行蛋白质分析?

  MS/MS操作模式  串联质谱仪通常使用的都是离子模式来鉴定蛋白质的氨基酸序列。目前所有的MS/MS质谱仪都具有该功能。不过其它特殊的质谱仪也具有MS/MS功能。如果要发现蛋白质中的某个功能基团则需要用到母离子扫描功能或者中性丢失扫描功能,而这就必须用到三重四级杆质谱仪,如Q-Q-Q质谱仪,或四

串联体化实验

试剂、试剂盒 溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶实验步骤 实验方案 A 和 B1.将切下并纯化的双标签连接为串联体:2.在 16t℃ 下孵育 2 h。3.将双标签串联体上取样于 8% 的聚丙稀酰胺凝胶的一个泳道,用 100bpladder 作为分子量标准,在室温、80℃ 电泳 3 h。4.EB

质谱检测法与蛋白质分析(二)

传统的和最新的蛋白质组学研究策略虽然到目前为止,还没有一种蛋白质组学研究策略能够对某个蛋白质组进行常规的、完整的分析,但是现在的技术已经非常强大,我们相信,很快就能进行全蛋白质组学研究了。而且,对某个亚蛋白质组(比如某个细胞器或亚细胞结构的蛋白质组)进行研究早就已经不是什么难题了,这已经成为了一种常

2019生命科学产业奖出炉!赛默飞、布鲁克、安捷伦斩获大奖

  分析测试百科网讯 近日,服务于生命科学工具市场的领先研究和咨询公司——BioInformatics Inc.(隶属于Science and Medicine Group旗下)公布了2019年Life Science Industry Awards(生命科学产业奖)。  自2002年以来,Li

赛默飞在ASMS发布紧凑型台式质谱 Orbitrap Exploris 480

——专为高通量生物制药和学术研究实验室设计  分析测试百科网讯 在6月2日至6日举行的第67届美国质谱年会(ASMS 2019)上,赛默飞推出了一款全新的紧凑型台式质谱仪——Orbitrap Exploris 480。这款产品具备先进的差分离子迁移接口和内标触发方法,可在高通量实验中提供高水平的性能

质谱和蛋白质组学:击中目标

Nature Methods - 5, 741 - 747 (2008)   作者:Nathan Blow   分析测试百科  译     近年来,质谱仪大幅提高了动态范围和灵敏度,使研究者们在疾病生物标志物的发现和验

串联体化实验

是对差异显示技术(DD)实验和基因表达系列分析实验中实验方案A和B的补充实验现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. Johansson  翻译:赵志奇 陈军试剂、试剂盒溶液与缓冲液LoTEcDNA标签连接酶实验步骤实验方案 A 和 B1.将切

赛默飞世尔科技发布一个包括五个软件解决方案的新系列

赛默飞世尔科技于国际蛋白质组学大会(HUPO)上宣布发布一个包括五个软件解决方案的新系列,可提高定性和定量蛋白质组学工作流程  澳大利亚悉尼(2010年9月20日)  -全球科学服务领域的领导者赛默飞世尔科技公司,于2010年国际蛋白质组学大会(HU

蛋白质组学实用分析技术一览

分析其实也属于技术的一部分,且在蛋白质组学研究中显得尤为重要,因为蛋白质组学研究提供的数据是生物学上最庞大的,而且蛋白质组比基因组具有更大的复杂性,因此蛋白质组信息学更有挑战性。今天小编先抛砖引玉地介绍几个常用的分析方法和软件。蛋白质定性分析蛋白质定性分析通常是指利用质谱法进行蛋白质鉴定和序列分析。

赛默飞世尔科技精彩亮相第六届AOHUPO大会

  2012年5月5~7日,第六届亚太人类蛋白质组组织(AOHUPO)大会在国家会议中心卡隆重召开,这是亚太地区规模最大、影响最广、学术水平最高的蛋白质组学学术峰会。赛默飞世尔科技作为此次大会的金牌赞助商,展示了其蛋白质组学领域的最新产品技术及解决方案。赛默飞世尔科技展台大会入口处摆设了赛

形形色色的蛋白标签(一)

  一提到蛋白研究,首先跳入脑海的当然是抗体。的确,很多蛋白实验都离不开抗体。然而,即使抗体公司时不时推出新产品,但许多蛋白还是没有相应的抗体,我们只能望电脑兴叹。而且,也有很多抗体无能为力的情况,比如观察蛋白在细胞内的运输。所幸,各种各样的蛋白标签让我们能够从容应对这些挑战。   遗传标签  

质谱仪

最近又有几项有关质谱仪的最新进展问世,这些新成果的出现又给我们的生物大分子研究工作补充了“弹药”。在蛋白质测序方面,基于碰撞诱导裂解技术(CID),又新出现了可变裂解技术(Alternate fragmentation technique),该新技术是基于处在碰撞池中的离子具有的电子传递特性开发出来

蛋白质组技术的研究进展

大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多DNA序列信息仅

蛋白质组技术的研究进展(二)

3 蛋白质组技术的支柱---鉴定技术(Identification)    如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定.  在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comi

e测试 | 解析未知样品的质谱图,你在行吗?

  质谱是通过荷质比来鉴定不同的分子的,所以,其基本功能就是测定分子量。  通过分子量这一信息能够获知的信息有很多,从裂解单个分子的方向出发,比如基团信息、结构的测定。  现代的很多质谱能够保证分子的完整性,于是可以用来测序,鉴定未知的蛋白质,或者比较样本当中蛋白和肽段的丰度分布,用于临床诊断。  

蛋白质组技术的研究进展

  大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多DNA序列信

10标串联质谱标签(TMT)能更快速定量肿瘤蛋白

  在过去十年中,基因组学研究已经系统绘制了人类癌症的遗传改变,但这些改变对蛋白质组的直接影响还知之甚少。NIH临床蛋白质组学肿瘤分析联盟(CPTAC)的蛋白组学研究表明,将蛋白质组和磷酸化蛋白质组数据与基因组数据相整合,才能改善癌症通路的鉴定。图片来源于网络  然而,实体瘤组织在组成上比细胞系要复

Nature Protocols 快速重复地对肿瘤蛋白进行深度分析和定量

  Broad研究所蛋白质组学平台的研究人员近日在《Nature Protocols》杂志上报道了一个经过优化的新流程,能够快速且重复地对肿瘤蛋白进行深度分析和定量。  在过去十年中,基因组学研究已经系统绘制了人类癌症的遗传改变,但这些改变对蛋白质组的直接影响还知之甚少。NIH临床蛋白质组学肿瘤分析

ASMS 2018布鲁克发布一系列创新质谱产品和突破性工作流程

  分析测试百科网讯 2018年6月3日,布鲁克于第66届ASMS大会上隆重发布创新质谱产品和多个突破性的生命科学研究工作流程,涵盖临床表型组学和蛋白质组学研究和大规模样本验证、生物制药应用、应用毒理学和法医学。  布鲁克总裁兼首席执行官Frank H. Laukien博士表示:“在本届ASMS上,