流式胞内染色protocol
一、surface marker染色1、收获细胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗涤一次，倾倒后滤纸吸干管口液体。2、加入预先配置好的你需要染的surface marker的抗体混合液（即CD3，CD4，CD8抗体mixture），充分混匀，室温下孵育20分钟。3、FACS Buffer 2 ml洗涤一次倾倒后滤纸吸干管口液体。二、Intracellular Staining的步骤1、加入Fix/permeabilizatioin Buffer（不同公司有各自的试剂，ebioscience或者BD，看你的抗体是那个公司的，但是操作流程大致相同）2、加入Fix/Perm Buffer 250ul 后，混匀，4度孵育30分钟（公司可能推荐1ml，我一直加250ul，绝对可行）或者室温15～20分钟3、用公司配套的Perm Wash Buffer 1x的2ml洗涤1-2次，本人一直洗一次节约试剂，也没......阅读全文
流式胞内染色protocol
一、surface marker染色1、收获细胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗涤一次，倾倒后滤纸吸干管口液体。2、加入预先配置好的你需要染的surface marker的抗体混合液（即CD3，CD4，CD8抗体mixture），充分混匀，室温下孵育20分钟。3、
流式检测胞内抗原时打孔液的配方
打孔液有很多种，方法也有很多。与你的实验方法相关。我用过酒精固定或Triton X-100（我做的都是培养的细胞）：（1）70%的酒精固定24小时即可，不再需要再打孔。如在PI染色测细胞周期或凋亡。（2）Triton X-100是比较强烈的穿孔剂。0.1% Triton X-100/PBS（再加0.
什么是胞内运输？
胞内运输(intracellular transport)是真核生物细胞内膜结合细胞器与细胞内环境进行的物质交换。包括细胞核、线粒体、叶绿体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基体和内质网等与细胞内的物质交换。
细菌的芽胞染色
（一）实验目的：学习细菌的芽胞染色法（二）实验原理：细菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色（芽胞呈无色透明状）。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则：除了用着色力强的染料外，还需要加
细菌的芽胞染色
(一)实验目的：学习细菌的芽胞染色法 (二)实验原理：细菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则：除了用着色力强的染料外，还
细菌的芽胞染色
(一)实验目的：学习细菌的芽胞染色法 (二)实验原理：细菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色(芽胞呈无色透明状)。芽胞染色法就是根据芽胞既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽胞染色法都基于同一个原则：除了用着色力强的染料
流式细胞仪检测细胞凋亡实验protocol
40年来，流式细胞术一直由多色流式主导。 尽管Fulwyler发明的初代仪器基于库尔特体积，但荧光在短短几年内成为流式细胞仪主导技术。 从20世纪80年代初到现在，技术开发人员一直致力于构建能够测量更多荧光参数（我们通常将其称为“颜色”）的仪器。 最开始，Göhde在1968年首次发表关于荧光
Isotype胞内染色有哪些学问？来看看这篇文章怎么说
对科研党来说，流式细胞术一点都不陌生，它以自己特有的方式从细胞蛋白水平定量检测目标蛋白的表达，并且能get到目标蛋白在各个细胞亚群中的表达，同时在细胞功能上也有很重要的作用，包括细胞凋亡，细胞周期，细胞增殖等等。 流式细胞术以细胞为研究对象，在流式细胞仪的作用下定量检测样品细胞的物理化学特征，
胞内运输的概念和组成
胞内运输(intracellular transport)是真核生物细胞内膜结合细胞器与细胞内环境进行的物质交换。包括细胞核、线粒体、叶绿体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基体和内质网等与细胞内的物质交换。
胞内运输额具体形态
胞内运输是指细胞内、细胞器间的物质交换。有分子扩散、微丝推动原生质的环流、细胞器膜内外的物质交换，以及囊泡的形成与囊泡内含物的释放等。如光呼吸途径中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、丝氨酸、甘油酸分别进出叶绿体、过氧化体、线粒体；叶绿体中的丙糖磷酸经Pi转运器从叶绿体转移至细胞质，并在细胞质中合成蔗糖进入液泡贮
胞内受体的分化类型介绍
胞内受体又可分为核内受体和胞浆受体，如雄激素、雌激素、孕激素及甲状腺素受体位于核内，而糖皮质激素受体位于胞浆中。类固醇激素与胞内受体结合后，可使受体的构象发生改变，暴露出DNA结合区。在胞浆中形成的类固醇激素-受体复合物以二聚体形式穿过核孔进入核内。在核内，激素-受体复合物作为转录因子与DNA特异基
胞内运输的具体形态
胞内运输是指细胞内、细胞器间的物质交换。有分子扩散、微丝推动原生质的环流、细胞器膜内外的物质交换，以及囊泡的形成与囊泡内含物的释放等。如光呼吸途径中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、丝氨酸、甘油酸分别进出叶绿体、过氧化体、线粒体；叶绿体中的丙糖磷酸经Pi转运器从叶绿体转移至细胞质，并在细胞质中合成蔗糖进入液泡贮
胞内受体的种类和分化
胞内受体又可分为核内受体和胞浆受体，如雄激素、雌激素、孕激素及甲状腺素受体位于核内，而糖皮质激素受体位于胞浆中。类固醇激素与胞内受体结合后，可使受体的构象发生改变，暴露出DNA结合区。在胞浆中形成的类固醇激素-受体复合物以二聚体形式穿过核孔进入核内。在核内，激素-受体复合物作为转录因子与DNA特异基
胞内运输的转运方式介绍
营养物质的转运方式有两种：1、被动转运：被动转运过程主要包括被动扩散、易化扩散、滤过、渗透等作用。 被动扩散：营养物质透过细胞膜，不借助载体，不消耗能量，物质从浓度高的一侧向浓度低的侧透过称为被动扩散。 易化扩散：指非脂溶性物质或亲水物质如钠、钾、葡萄糖和氨基酸等，不能透过细胞膜的双层脂类，需在细胞
流式细胞术，怎么处理样本？
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）能够快速测定细胞悬液中单个细胞的生物学性质，并可以对特定的细胞进行分选收集。广泛用于细胞生物学，免疫学，遗传学，基础医学等领域。接下来的 Protocol 中以小鼠的淋巴细胞为例进行细胞表面和胞内染色。一. 试剂准备Wash Buffer：PBS+1
流式细胞法检测荧光假单胞菌
流式细胞法FCM（Flow Cytometry Method）可以检测菌液中标记荧光信号的单细胞，对菌株实现逐一定量分析。流式细胞法检出的菌数是平板计数法的 3.8 倍，因为能统计到总体菌落数量。利用这个方法检测牛奶中假单胞菌，能在4 h内完成检测，且在菌落数含量较少时灵敏度有很大的提高。此方法
流式磁珠染色时间多长
10至30min。磁珠（ImmuneMagneticBeads，IMB）是发展起来的一项新的免疫学技术。流式磁珠染色时间为10至30min。磁珠将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体，以免疫学为基础，渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域，其在免疫检测、细胞分离
胞内受体的分化种类级特点
胞内受体又可分为核内受体和胞浆受体，如雄激素、雌激素、孕激素及甲状腺素受体位于核内，而糖皮质激素受体位于胞浆中。类固醇激素与胞内受体结合后，可使受体的构象发生改变，暴露出DNA结合区。在胞浆中形成的类固醇激素-受体复合物以二聚体形式穿过核孔进入核内。在核内，激素-受体复合物作为转录因子与DNA特异基
胞内受体的分化及功能介绍
胞内受体又可分为核内受体和胞浆受体，如雄激素、雌激素、孕激素及甲状腺素受体位于核内，而糖皮质激素受体位于胞浆中。类固醇激素与胞内受体结合后，可使受体的构象发生改变，暴露出DNA结合区。在胞浆中形成的类固醇激素-受体复合物以二聚体形式穿过核孔进入核内。在核内，激素-受体复合物作为转录因子与DNA特异基
亮点推荐细胞代谢胞内氧检测技术
细胞内氧含量水平对细胞的生理状态，信号传导以及细胞对药物处理的应激反应有显著的影响。由于技术原因，之前的研究更多集中在，通过检测细胞胞外氧含量变化情况，进而间接评估细胞代谢速率的差异以及相应的胞内氧含量相对水平。然而，影响胞内氧含量的因素不仅包括细胞代谢速率差异，同时也包括细胞组织类型，环境氧浓度，
Cell：发现胞内细菌能促进癌症转移
近年来，越来越多的研究表明，在结直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌等多种癌症类型中，细菌也是肿瘤组织本身的组成部分。这些细菌往往以较低的生物量寄生在肿瘤组织中，其菌群特征与癌症风险、病理类型和治疗反应相关。然而，肿瘤驻留细菌在肿瘤进展中的生物学作用仍不清楚。近期我国科学家发现，肿瘤驻留的胞内细菌能够促
小鼠胞内细胞因子检测刺激方案
小鼠细胞因子细胞来源活化-极化培养培养时间再次刺激胞内阻断剂GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (
人胞内细胞因子检测刺激方案
人细胞因子细胞来源活化-极化培养培养时间再次刺激胞内阻断剂G-CSFPBMCLPS (1 ug/mL)24hr-MonensinGM-CSFPBMCPMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL)5hr-MonensinGIFN gammaPBMCPMA (30-50ng/mL)/Ion
流式抗体染色不避光会怎样
流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的： 流式细胞仪能检测多少个通道 需要同时检测检测多少个指标 厂家的抗体有多少种荧光标记 如果流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多 A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体 1） BD流式细胞仪 BD流式试剂选择及应用
芽胞杆菌属的形态与染色
致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平，呈竹节状。在组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链。无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于菌体中央，其直径小于菌体。
酶分子的胞内高效递送、催化和检测
Nature Communications:高内涵助力纳米材料新剂型研究--酶分子的胞内高效递送、催化和检测 近日，中国科学院过程工程所(IPE)生化工程国家重点实验室生物剂型与生物材料课题组与清华大学(THU)及天津大学(TJU)合作，基于无定形金属有机框架开发出一种新剂型，可实现酶分子的细胞
2014值得关注的技术：迷你的胞内探针
2013年末，《Nature Methods》杂志将年度技术授予了单细胞测序(single-cell sequencing)。同时，杂志还介绍了2014年值得关注的技术，包括CRISPR和基因组编辑、神经学工具、原位测序、单颗粒低温电子显微镜等。 追踪小的分子并干扰其活性对了解活细胞如
抗胞内菌免疫的基本内容介绍
对人类重要的兼性胞内菌有结核分枝杆菌、伤寒沙门氏菌、布鲁氏菌、嗜肺军团菌等，它们主要寄居在人体单核吞噬细胞中。专性胞内菌有引起斑疹伤寒、恙虫病的立克次体，引起Q热的柯克斯体，引起沙眼、性病淋巴肉芽肿的衣原体等。它们主要寄居在人体的血管内皮细胞和上皮细胞内，有时亦可在单核吞噬细胞内发现。 巨噬细
流式细胞计PI染色死细胞
PI能够插入双链DNA中。它被活细胞排斥但能穿透正在死亡或已经死亡的细胞的细胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、缓冲体系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
小鼠神经干细胞的流式染色
实验概要小鼠神经干细胞的流式染色主要试剂荧光标记抗体CD133-PE、EGF-Alexa647，10μg/ml的PI，染色液主要设备15 mL离心管、10%FBS包被的玻璃巴斯德管、移液枪、70 μm细胞滤膜、4℃低温离心机实验步骤（1）接神经干细胞的分离和纯化最后一步。去上清，用染色液重悬细胞，向