植物组织化学显微镜标本片制作方法_组织离析法
实验方法原理用一些化学药品配成离析液，便组织细胞的胞间层溶解，细胞彼此分离，获得分散的、单个的完整细胞，以便观察不同组织的细胞形态和特征。经离析制备的材料可制作临时装片观察，也可制成永久玻片标本长期便用。实验材料植物组织试剂、试剂盒离析液仪器、耗材玻片镊子实验步骤1 铬酸－硝酸离析法适用于木质化的组织，如导管、管胞、纤维等。离析液由 10%铬酸和 10%硝酸等量混合而成。具体步骤是将植物材料（如木材、枝条、果壳等）先切成火柴棒粗细、长约 1cm 的小条或小块，放人小玻璃管中，加人离析液，其量约为材料的 20 倍，将口盖严塞紧，放在30-40℃的温箱中，经 1-2d。具体浸渍的时间可因材料块的大小而不同，如果两天以后仍未分离，则可换新的离析液继续浸渍。草本植物可不必加温。检查材料是否离析：以细胞间的胞间层溶解、细胞彼此能够分开为宜。可取出材料少许放在载玻片上的水滴中，加盖破片，用滴管的橡皮头轻轻敲压，若材料分离，表示浸渍时间已够。......阅读全文
植物组织化学显微镜标本片制作方法_组织离析法
实验方法原理用一些化学药品配成离析液，便组织细胞的胞间层溶解，细胞彼此分离，获得分散的、单个的完整细胞，以便观察不同组织的细胞形态和特征。经离析制备的材料可制作临时装片观察，也可制成永久玻片标本长期便用。实验材料植物组织试剂、试剂盒离析液仪器、耗材玻片镊子实验步骤1 铬酸－硝酸离析法适用于木质化的组
植物组织化学显微镜标本片制作方法_压片法
实验方法原理将植物的幼嫩器官如根尖、茎尖和幼叶等经过处理后，被涂抹或压在载玻片上，使组织成一薄层然后进行观察的制片方法。染色后可做临时的观察标本，也可以经过脱水、透明等步骤制成永久的玻片标本。实验材料植物的幼嫩器官如根尖、茎尖和幼叶试剂、试剂盒酒精仪器、耗材玻片镊子实验步骤1 幼根的培养取洋葱或大蒜
植物组织化学显微镜标本片制作方法
实验方法原理 临时装片法是将实验材料（徒手切片、表皮或一些低等植物等小型实验材料）放置于载玻片上的水滴中，然后加盖盖玻片制作成的玻片标本。其优点是可以保留材料的生活状态和天然色泽，一般多作为临时观察或用某些化学试剂做组织化学反应。也可选择适宜染料染色，制作成永久制片。实验材料 徒手切片、表皮或一些低
植物组织化学显微镜标本片制作方法
实验方法原理： 临时装片法是将实验材料（徒手切片、表皮或一些低等植物等小型实验材料）放置于载玻片上的水滴中，然后加盖盖玻片制作成的玻片标本。其优点是可以保留材料的生活状态和天然色
植物组织化学显微镜标本片制作方法_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法。其优点在于①应用范围广，几乎适用于所有的植物材料；②能将材料切成厚薄均一的切片，较清楚地显现细胞、组织的细微结构；③能切成连续蜡带，可观察细胞和组织的动态发生及层次变化过程；④切片可以长期保存，便于以后观察比较。缺点是：操作程序比较复杂，需
植物组织化学显微镜标本片制作方法_徒手切片法
实验方法原理徒手切片法是指手拿刀片，将新鲜材料或预先固定好的材料切成薄片，不经染色或经简单染色，制成水装片后进行临时观察，必要时经镜检后可选择好的薄片经过脱水与染色等制片步骤，制成永久玻片标本供长期使用。此方法的优点是不需要复杂的设备，方法简使，制片迅速，而且能观察到植物组织的天然色泽和活体结构，常
植物组织化学显微镜标本片制作方法_临时装片法
实验方法原理临时装片法是将实验材料（徒手切片、表皮或一些低等植物等小型实验材料）放置于载玻片上的水滴中，然后加盖盖玻片制作成的玻片标本。其优点是可以保留材料的生活状态和天然色泽，一般多作为临时观察或用某些化学试剂做组织化学反应。也可选择适宜染料染色，制作成永久制片。实验材料徒手切片、表皮或一些低等植
植物组织化学显微镜标本片制作方法_超薄切片技术
实验材料植物组织试剂、试剂盒包埋剂仪器、耗材切片机实验步骤1 取材：用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小块。太大固定液不易透入，造成材料内外固定不均；太小则材料受损伤的比率增高。取材时应注意：由于取材时要求切的组织块很小，组织受损伤的比例相当大，这无疑会引起细胞代谢的巨大变化，因此，切取后的
植物组织化学显微镜标本片制作方法_显微化学方法
实验方法原理植物解剖学中，利用新鲜材料与染色或化学反应方法柜结合，一方面用来确定梢物细胞壁或内含物的化学性质，另一方面用来分辨细胞的结构。显微化学试验可先用徒手切片法将材料切成薄片，一般应稍厚，大约在 20-40µm 之间，如杲太薄，有时因为所要观察的内容物太少，反而不易清楚地显示结果。实验材料植物
物组织化学显微镜标本片制作方法_整体封藏法
实验方法原理将小而扁平的检物材料全部封藏起来，所以用此法制作的玻片标本可显示出植物或植物某部分器官的整体。这种方法适用于微小或扁平的材料，例如丝状或叶状的藻类、菌类蕨类的原叶体抱子襄、纤小的苔鲜植物，以及被于植物的表皮、花粉粒、幼胚等幼小的器官。可以制成临时装片，也可以制成水久制片。实验材料检物材料
铬酸－硝酸离析法
铬酸－硝酸离析法为了观察一个细胞完整的立体形态结构，可以用一些化学药品把细壁中的中层物质（果胶质）溶解，使细胞分离散开，便于观察。离析前先把材料洗净，用刀切成1-2 毫米宽的狭条（如叶片）或切成火柴棍粗细的长约1厘米的小条(如根或茎)。然后把切好的材料放进小玻璃瓶中，加入离析液（加入量约为材料的20
激光扫描共聚焦显微镜在组织化学免疫组织化学中的应用
激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confcal microscope,LSCM）是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段相互渗透的产物。由于其高分辨率，高灵敏度及高放大率等特点，在细胞水平上能作多种功能测量和分析，如荧光定量测量、共聚焦图像分析、三维图像重建、活细胞动力学
脂类组织化学与酶组织化学
脂类(lipid)是构成细胞 结构的成分之一，可分为脂肪(fat)和类脂(1ipoid)两大类。脂肪系指甘油三酯，以脂滴形式存在于细胞质内。类脂是一些与脂肪酸结合可形成酯的物质，包括胆固醇、固醇酯、磷脂和糖脂等。在组织化学上，根据染色性质不同可把脂类分为酸性脂类和中性脂类。酸性脂类包括脂肪酸和磷脂等
免疫金组织化学染色实验——CIGSS－法
实验方法原理彩色免疫金银染色方法（coloured IGSS，CIGSS）是由 Frite 和 Hoenes 等（1986）建立的一种新方法，刘彦仿等1988）在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的 CIGSS 方法。其基本原理是在 IGSS 法的基础上，根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的，即 I
免疫金组织化学染色实验——IGSS－法
实验方法原理免疫金银染色（immunogold silver staining；IGSS）的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用，用对苯二酚还原剂将银离子（Ag+）还原成银原子（Ag），被还原的银原子围绕金颗粒形成一个「银壳」，「银壳」一旦形成本身亦具有催化作用，从而使
亲和免疫组织化学实验——ABC－法
实验方法原理ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法，是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的，其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记，生物素标记的第二抗体与 ABC 复合物
亲和免疫组织化学实验——－CSA法
实验方法原理催化信号放大系统（catalyzed signal amplification system，CSA），也称酿胺信号放大（tyramine signal amplification system，TSA）或称 CARD（catalyzed repoter deposition）。该方法的
亲和免疫组织化学实验——LSAB－法
实验方法原理LSAB 法或称 S-P 法、SABC 法，它是采用生物素标记的第二抗体与结合有 HRP 或 AKP 酶的链霉亲和素（streptavidin）连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质，相对分子质量 60000，不含糖链，等电点 pI 为 6.0～6.5
常用免疫组织化学方法的原理免疫酶标方法
免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，
免疫金组织化学染色实验——双－PAG－法
实验方法原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌 A 蛋白（SPA）金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA 和许多哺乳类动物 IgG 具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原-抗体的结合。简单的 SPA 金标记二步法后，第三步用抗 SPA 与 SPA 金表面分
亲和免疫组织化学实验——改进－CSA法
实验方法原理已有的研究结果证实，CSA 法较 LSAB 法敏感 500～1000 倍，较 EnVision 法敏感 20～100 倍。其对细胞周期素等核内抗原的定位，有独特的优点，定位准确性、敏感性、稳定性要较标准的 CSA 法好，其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近，Hasui K
小鼠脑片免疫组织化学（ABC法）实验
实验方法原理 通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位，还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料 冷冻切片试剂、试剂盒 一
亲和组织化学染色方法之凝集素法
①直接法：将标志物直接结合在凝集素上，使其与组织细胞相应的糖蛋白或糖脂相结合； ②间接法：先将凝集素与组织细胞膜糖基结合，然后再用标记的抗凝集素抗体（即用凝集素免疫动物制备抗凝集素抗体）与结合在细胞上的凝集素反应。间接法还有糖-凝集素-糖法，该方法是利用生物细胞膜的特殊糖基与凝集素结合后，再用
非标记抗体免疫酶组织化学实验——ABPAP－法
实验方法原理ABPAP 法是 PAP 法和 ABC 法的联合应用，使更多的酶分子结合到抗原-抗体复合物上，目的就是增加方法的敏感性。其原理见图 4-11。作者应用了 30 余种特异性一抗、鼠源性和兔源性 PAP 复合物以及 ABC 检测系统，结果 ABPAP 法比单一的 PAP 法要敏感 7～8 倍
石蜡制片法（用于免疫组织化学，HE染色）
石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围，制片手段完备，能将材料切成极薄的片子（可切至2-8微米左右），并能制成连续的片子，这是其它制片法难以达到的，因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料
免疫组织化学染色方法（SP法）
免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于
非标记抗体免疫酶组织化学实验——PAP－法
实验方法原理与酶桥法相似，不同的是酶桥法分四步，而 PAP 法分三步。PAP 法将酶桥法的步骤（3）、步骤（4）合二并为一，用 PAP 复合物替代，故称 PAP 法（图 4-9）。PAP 复合物中的抗 HRP 抗体和第一抗体必须为同一种属动物的 IgG，这样桥抗体才能作为「桥」将 PAP 复合物连接
免疫组织化学
实验概要免疫组化流程实验步骤 第一天：1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min，脱蜡3、水化：100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注：以下步骤切勿让组织处于干燥状态！4
免疫组织化学
· Double Peroxidase (HRP) Immunohistochemical Labeling of Trypsin-Sensitive Antigens (KPL)· Immunohistochemistry (Tyner lab)This is a
什么是“组织化学”
组织化学是指以常用的组织化学技术,对细胞内主要化学成分和活性的粗略(一般性)的研究.概要介绍如下:一,______ 核酸(DNA和RNA)(一)__ 化学特性1.分布: DNA (细胞核内)RNA(核仁10% ;细胞质-核糖体90%)2. 分子结构:戊糖 + 磷酸 + 碱基特点:① 大量的磷酸基团→