石蜡制片法(用于免疫组织化学,HE染色)
石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围,制片手段完备,能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成连续的片子,这是其它制片法难以达到的,因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料不能应用石蜡切片以外,一般的材料都可以用此法制片,但有制作时间较长,操作过程复杂以及材料易发硬或发脆等缺点。该法多采用旋转式切片机进行切片。石蜡制片操作程序如下: (一)材料的采集与分割采集材料应根据制片的目的和要求而定,材料要有代表性,无病虫害或其它损伤,如要观察病理解剖,则要取病斑、病症部位。采下的材料应立即放在标本箱或湿布包起来带回实验室进行分割固定(如有条件也可在试验地采集后进行分割固定)。为使固定液能迅速的渗透材料,材料要进行分割。分割时动作要迅速,以防材料萎蔫。分割块......阅读全文
石蜡制片法(用于免疫组织化学,HE染色)
石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围,制片手段完备,能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成连续的片子,这是其它制片法难以达到的,因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料
HE染色石蜡切片制作的基本过程
HE染色石蜡切片制作的基本过程:1、取材与固定从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。2、脱水透明一般用由低浓度到高浓度酒精作脱
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸;染色架;保湿盒;晾片盘;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟;2. 脱蜡和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
用于-LCM-的片子的-HE-染色实验
在进行 LCM 之前,切好的组织样品要固定、染色,必需的话还要脱水。对内脏和淋巴结组织作者采用经典的 HE 染色。一旦片子准备好,LCM 应当在 45 min 内进行。所有的试剂、试管以及其他的用于 RNA 提取的材料应当在染色前准备就绪。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉
用于-LCM-的片子的-HE-染色实验
试剂、试剂盒 乙醇曙红Y 梅耶苏木精超纯水二甲苯仪器、耗材 圆锥管镊子破璃染缸实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂100%乙醇70%乙醇曙红Y(Sigma)梅耶苏木精(Sigma)DEPC处理的超纯水(BiotecxLaboratories,储存于4°C)二甲苯(Sigma)2.特殊设备圆锥管,
用于-LCM-的片子的-HE-染色实验
试剂、试剂盒 乙醇 曙红Y 梅耶苏木精 超纯水 二甲苯 仪器、耗材
病理制片技术——组织石蜡切片
组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机
染色体制片
实验概要掌握染色体制片的基本程序。实验步骤1. 取对数生长期细胞一个。2. 将培养基换成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3. 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后
果蝇唾腺染色体制片实验_观察法
实验方法原理果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料果蝇试剂、试剂盒水醋酸洋红仪器、耗材解剖针双筒解
苏木精伊红(HE)染色
染液制备:1. 苏木精染液(1) 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3) 母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前宜过滤,去除氧化膜;2. 伊
苏木精伊红(HE)染色
染液制备:1. 苏木精染液(1) 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3) 母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前
HE染色试剂——伊红配方
1、曙红(水溶性)配方:曙红 (水溶性)2.5 g;蒸馏水500 ml水溶性依红酸化配制:将曙红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%乙醇1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的乙醇 1:1
细胞染色制片方法
1、 取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、 将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止
显微制片染色剂
染色剂3.4 苏丹Ⅲ试液 此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5 钌红试液(临用新制)此液可使粘液染成红色。3.6 间苯三酚试液 此液与浓盐酸合用,可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.7 碘试液(临用现配。应置棕色瓶内保存)此液可使淀粉染成蓝色或紫
染色体制片步骤
1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分
植物染色体制片
实验概要掌握染色体制片方法,并自选材料进行染色体制片;学会染色体核型分析。主要试剂酒精、冰醋酸、甲醇、盐酸、铁矾、苏木精(或洋红、石炭酸品红)、秋水仙碱(或对二氯苯饱和水溶液、8-羟基奎啉、富民隆乳剂)、二甲苯、中性树胶、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要设备显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块、
病理制片技术——常规染色
苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,
常用HE染色试剂配制方法
苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1) Harris苏木素液 配方: labdd.com 苏木精1 g ;无水乙醇10 ml;蒸馏水200 ml;钾明矾20g;HgO 0.5 g
常用HE染色试剂配制方法
苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先将苏木精溶于无水乙醇中,备
什么是巴氏染色?什么是HE染色?
(1)巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。该染色法不但具有显示细胞核结构清晰,分色明显,透明度好,胞浆受色鲜艳等特点,而且所染标本不易脱色,可长久保存。 (2)HE染色(又称苏木精-伊红染色),是组织学最常用的染色方
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物
病理制片技术——常用特殊染色
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡,将液体石蜡分装加塞,用牛皮
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡,将液体石蜡分装加塞,用牛皮
免疫组织化学染色方法(SP法)
免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于
HE和特殊染色技术资料
HE染色苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚
关于HE染色结果的判断介绍
1、实验结果 细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3羟基在末断转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下,与生物素或