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MSCs分化为矿化的成骨细胞

试剂和材料:完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;BDM(骨分化培养基):CCM包含5mmol/L β-甘油磷酸,50μg/ml抗坏血酸-2-磷酸和1nmol/L地塞米松。过滤除菌;PBSA;胰蛋白酶/EDTA;聚丙烯离心管,15ml和50ml;组织培养皿,6孔,孔面积为9.6cm2;ARS:蒸馏水配制1%ARS,用0.5N氢氧化氨调节pH值到4.1,过滤除菌;福尔马林缓冲液,10%;改良的Neubauer血细胞计数器;实验方法:从单层细胞中收集MSCs;向6孔培养板的每个孔中加入2ml CCM,共有1×104个细胞(适用于人或大鼠)。最终密度约1×103个细胞/cm2;将上排3个孔标记为“成骨”,下排3个孔标记为“阴性”;......阅读全文

MSCs分化为矿化的成骨细胞

试剂和材料:完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;BDM(骨分化培养基):CCM包含5mmo

什么是MSCs?

间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, 简称MSCs),来源于胚胎发育早期的中胚层和外胚层,是一群具有多向分化潜能的多能干细胞,在体内外特定的诱导条件下可以分化成骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种间充质系列细胞或非间充质系列细胞。MSCs存在于身体的

MSCs分化为矿化的成骨细胞(细胞培养1)

MSCs分化为矿化的成骨细胞 试剂和材料:完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;2.DM

大鼠MSCs的获得和扩增实验——收集大鼠骨髓用于MSCs生产

实验材料 大鼠骨髓 试剂、试剂盒 灭菌CCM含0.2μg ml两性霉素B(两性霉素B洗剂)纱布含100U ml青霉素100μg ml链霉素和0.2μg ml两性霉素B的PBSA无镁和钙的Hank’s平衡盐溶液(HBSS) 仪器、耗材 塑料Petri培养皿 15 c

MSCs分化为脂肪细胞

MSCs分化为脂肪细胞试剂和材料:完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;FDM(脂肪分化培养

脐血MSCs的分离

试剂和材料: 1. 培养基;2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;3. PBSA;4. T25;实验方法:1. 为了获得新鲜制备的CB-MNCs,按密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs);2. 用培养基重悬新鲜分离或冻存的MNCs。冻存的MNCs在铺板前要37℃迅速复苏并用培养基洗一遍;3. 将重

MSCs分化为脂肪细胞

试剂和材料:1.完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周;2.FDM(脂肪分化培养基):①FDM:C

大鼠MSCs的获得和扩增实验—大鼠骨髓原代培养用于MSCs生产

实验材料大鼠骨髓试剂、试剂盒灭菌CCM含0.2μg ml两性霉素B(两性霉素B洗剂)非灭菌0.85%台盼蓝盐溶液PBSA仪器、耗材聚丙烯离心管 15 ml或50 ml塑料组织培养Petri培养皿 直径15 cm改良的Neubauer血细胞计数器实验步骤(a)从一根股骨所得的骨髓悬液中取出10μL,与

收集大鼠骨髓用于生产MSCs

试剂和材料: 1.完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经F杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周; 2.纱布; 3.含

用于生产MSCs的大鼠骨髓收集

试剂和材料: 1. 完全培养基(CCM):α-MEM:α-低限量基础培养基,含谷氨酰胺,无核苷酸或脱氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、经FBS杂交瘤纯化,非热灭活、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml。过滤除菌。储存于4℃,不超过2周; 2. 纱布; 3. 含100U