组织的分离实验_机械分散法

试剂、试剂盒Hanks仪器、耗材镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1. 无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组织至1 mm3大小为止(成糊状)。2. 用吸管吸取Hanks液把附着在剪刀上的组织小块冲下,并再补加3~5 毫升Hanks液后,用吸管反复轻轻吸吹冲打片刻,低速离心、去上清、余下组织块即可用于培养。3. 剪刀剪切法可能对组织有一定损伤,但操作比较方便。亦可用手术刀反复切割法,把组织块放在凹窝玻璃中,两手各持尖手术刀一把,交错反复切害割至1 mm3为止。手术刀切割法对组织损伤较小,但在空气中暴露时间较长,污染机会大些。以上两方法都适用于组织块培养法。二、机械分散法某些软组织如脑、胚胎以及一些肿瘤组织等,可采用......阅读全文

组织的分离实验_机械分散法

试剂、试剂盒Hanks仪器、耗材镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1.  无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组织至1

机械法分离叶绿体

一、原理研磨叶片得到的匀浆,经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱,分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中,0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降,因此,分离工作尽可能在短时间内完成。二、仪器与用具冰箱;离心机;扭力天平;显微镜;pH计;研钵;量筒;移液管;离心管;脱脂纱布等。分

组织的分离实验_离心分离法

实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用

组织的分离实验_EDTA-消化分离法

实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作

组织的分离实验_胶原酶消化分离法

实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验

组织的分离实验

试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1.  无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组

组织的分离实验

机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法             试剂、试剂盒

利用筛网的机械分离法

方案12.9 利用筛网的机械分离法实验方法原理用力使培养基中的组织通过一系列筛孔尺寸逐渐减小的筛网,直到产生单细胞或小组织块的理想悬液,悬液可直接稀释并培养。仪器、耗材生长培养基                                                            

利用筛网的机械分离法

实验方法原理用力使培养基中的组织通过一系列筛孔尺寸逐渐减小的筛网,直到产生单细胞或小组织块的理想悬液,悬液可直接稀释并培养。仪器、耗材生长培养基镊子筛网皮氏培养皿手术刀一次性塑料注射器培养瓶实验步骤1. 清洗后切割组织(见方案 12. 5 的步骤 1 和步骤 2),将组织切碎为 3~5 mm3 大小

利用筛网的机械分离法

            实验方法原理 用力使培养基中的组织通过一系列筛孔尺寸逐渐减小的筛网,直到产生单细胞或小组织块的理想悬液,悬液可直接稀释并培养。 仪器、耗材

新鲜实体组织样本的制备(机械法)——研磨法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材研磨器尼龙网实

新鲜实体组织样本的制备(机械法)

剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织          

组织的分离实验_胰蛋白酶消化消化分离法

实验方法原理胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织,如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织,对传代细胞也非常好。用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca2+和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含这些离子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用,因此在做细胞传代时,用胰蛋白酶消

新鲜实体组织样本的制备(机械法)——网搓法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 将 100 目

新鲜实体组织样本的制备(机械法)_剪碎法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织酶试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材剪刀尼龙网实

分散机的高速机械

  高速分散机适用范围  搅拌机/分散机系列:涂料分散机,实验室分散机,调速分散机,混合分散机,实验分散机,高速搅拌分散机GFJ系列机械升降高速分散机GFJ系列升降高速分散机是对多种混合液体、固体进行搅拌分散、溶解的高效设备。  高速分散机适用于涂料、染料、油墨、颜料、造纸、化妆品、食品、树脂、胶粘

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

植物DNA提取实验——机械法

植物DNA提取实验用于:(1)获得较纯的真核细胞基因组DNA;(2)后续PCR分析,RFLP分析,基因文库的构建,基因探测等的研究。实验方法原理这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液,使细胞膜破裂。同时将核酸与植物

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离             实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离实验材料叶子组织                                                          试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液                                                          

线粒体分离实验—从组织中分离线粒体

实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的

南瓜茎的机械组织——厚角组织和厚壁组织

机械组织,它使植物有机体及其器官更具坚固性和稳定性,是植物的骨架。一般说机械组织包括厚角组织和厚壁组织(纤维和石细胞),它们多分布在皮层和维管束中。 厚角组织一般分布在茎的棱角处,是生活的细胞,用低倍物镜观察南瓜茎横切面的永久制片,见厚角组织是一束束的细胞,由于它们出现于正在生

中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝

实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮,把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片(大约 1cmx1 cm )

分离核仁实验——高镁法分离核仁

实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

机械升降高速分散机液压升降高速分散机

  液压/机械升降高速分散搅拌机采用无级调速:有电磁调速、变频调速(如用于水性涂料)及防爆变频调速(如用于油性涂料)等多种形式。无级调速功能可以根据不同的工艺阶段需要调整不同的转速,充分满足了各工艺生产过程中不同的工艺要求;液压、机械两种升降形式;分散盘型式:平盘锯齿式、碟式等其它形式;高速分散机通

实验动物组织标本的制备实验_解剖法

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔

分散机的工作特点及高速机械

  工作特点  1.强劲的离心力将物料从径向甩入定、转子之间狭窄精密的间隙中,同时受到离心挤压、液层摩擦、液力撞击等综合作用力,物料被初步分散。  2.分散机高速旋转的转子产生至少15m/s以上的线速度,物料在强烈的液力剪切、液层磨擦、撕裂碰撞等作用下被充分分散破碎,同时通过定子槽高速射出。  3.

组织病理实验_石蜡切片法

实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。实验

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

分离肝脏质膜的 Neville 法实验             实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试