分离肝脏质膜的Neville法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是,非医学中心附属机构的研究人员可能很难得到人的胎盘。Doimce 氏玻璃匀浆器(15-ml), 带有 A、B 杵粗布(干酪包布)离心管(250-ml)折射仪(No.13_947;Fisher Scientific 公司或其他品牌)SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管试剂溶液 A蔗糖〔69%(w/w) 和 42.3%(w/w)〕溶液 B(配方,见「试剂的配制'PP.234~240)操作程序此操作程序据 Neville(1968) 的方法改进而成。全部操作在 4℃下进行。1) 取约 6......阅读全文

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

分离肝脏质膜的 Neville 法实验             实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料 切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒 溶液 A 蔗糖溶液 B仪器、耗材 Doimce 氏玻璃匀浆器离心管 折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤 材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是

MTT法实验原理

原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。

化学测序法实验

化学测序的重要性始终表现在:得到寡核苷酸的序列,转录调控信号功能分析(甲基化干涉分析,Carey and Smale 2000), 以及这些信号在活细胞中的鉴定(基因组印记,Church and Gilbert 1984)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D

MTT法实验原理

原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。

化学测序法实验

 试剂、试剂盒 醋酸无水乙醇硫酸二甲酯DMSDMS 缓冲液DMS 终止液EDTA 甲酰胺甲酰胺上样缓冲液肼 肼终止液NaClNaOH-EDTA 溶液哌啶水溶液哌啶甲酸乙酸钠聚丙烯酰胺测序凝胶鲑鱼精 DNA放射标记的目标 DNA 酵母 tRNA仪器、耗材 干冰-乙醇浴切仑科夫(Cerenkov) 记数

MTT法实验步骤

贴壁细胞1、收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2.、5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板

化学测序法实验

            试剂、试剂盒 醋酸 无水乙醇 硫酸二甲酯 DMS DMS 缓冲液 DMS 终止液 EDTA 甲酰胺

吸附法纯化病毒实验_​凝胶吸附法

实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶:这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶,由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物,用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮,置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用

表观分子量的判定实验

实验材料目的蛋白标准分子量蛋白实验步骤1.将目的蛋白和标准分子量蛋白上样到同一块 SDS-PAGE 平板凝胶中,按照方案 1 的步骤进行 SDS-PAGE。在同一块平板凝胶上进行目的蛋白和标准分子量蛋白的电泳,可以消除由于丙烯酰胺浓度和电泳条件不同而产生的差异。可以通过商业途径获得多种标准蛋白试剂盒

粪便直接涂片法实验

仪器、耗材 载玻片实验步骤 1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,涂片厚度以能透过印刷物字迹为准.3、在盘片中发现疑似包囊应加一滴碘液。4、卵的报告方式、有几种报几种5、注意、白细胞、红细胞、嗜酸性粒细胞

Percoll梯度法染色实验

实验材料:染色质试剂、试剂盒:精胺、精咪、Percoll、溶液仪器、耗材:聚碳酸酯离心管实验步骤:1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液,匀浆分离得到的染色质。Perco

Southern-印迹实验——印迹法

Southern印迹法是将DNA片段从电泳凝胶中转移至膜支持物上,使DNA片段固定,因此该膜半永久性地重现出凝胶电泳的带型。实验方法原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的,稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。实验材料DNA试剂、试剂盒HClNaClTrisNaOH

细胞传代实验_消化法

实验方法原理用胰蛋白酶消化细胞,用于贴壁细胞传代培养。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶酒精PBS仪器、耗材超净工作台酒精灯酒精棉球培养箱显微镜吸管离心管离心机实验步骤一、传代前准备 1.  预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 2.  用75%酒精

乙醇发酵实验_发酵法

实验方法原理在无氧条件下,酵母菌利用己糖发酵生成乙醇和CO2的作用,称为乙醇发酵。目前乙醇发酵所采用的微生物主要是酵母菌。生产上所使用的酵母菌原菌一般是固体斜面试管菌种,由于起酵母数量太少,不够生产之需,所以必须将斜面菌种进行若干次的扩大培养,以获得含有足够数量酵母菌的酵母培养物(通常是液体培养物,

蔗糖梯度纯化法实验

实验材料:染色质粗品试剂、试剂盒:聚碳酸酯离心管仪器、耗材:Dounce 匀浆器实验步骤:准备两种 18ml,浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液(聚胺,水相或己二醇法的缓冲液),然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中,用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品

菌种保藏实验_穿刺法

实验方法原理该方法操作简便,是短期保藏菌种的一种有效方法。实验材料细菌酵母菌放线菌霉菌试剂、试剂盒半固体培养基仪器、耗材培养试管穿刺管石蜡膜接种环接种针试管塞实验步骤1.用接种针下端挑取菌种(针必须挺直),自半固体培养基的中心垂直刺入半固体培养中,直至接近试管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺线将针退出

细胞划痕实验——划痕法

细胞划痕实验可应用于:(1)检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力;(2)研究细胞基质和细胞间相互作用对细胞迁移的影响。实验方法原理创伤愈合实验是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”

粪便直接涂片法实验

1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,涂片厚度以能透过印刷物字迹为准.仪器、耗材载玻片实验步骤1、洁净玻片上加等渗盐水1-2d,选择粪便的不正常部位,或选取不同部位粪便直接涂片.2、最好取大玻片,在涂片后应盖以盖片,

甘油梯度法染色实验

实验材料:染色质试剂、试剂盒:甘油、染色质、分离缓冲液溶液仪器、耗材:JS-13 转桶式转头实验步骤:准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度

血糖测定实验——酶法

实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺

自准直法的实验原理

当发光点(物)处在凸透镜的焦平面时,它发出的光线通过透镜后将为一束平行光,若与光轴垂直的平面镜将此平行光反射回去,反射光再次通过透镜后仍会聚于透镜的焦平面上,其会聚点将在发光点相对于光轴的对称位置上。

吸附法纯化病毒实验

实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶:这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶,由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物,用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮,置千 4℃ 4~5

VP实验——Barritt氏法

VP实验可应用于: (1)鉴别产气肠杆菌和大肠埃希菌,(2)表征其他细菌群,包括放线菌。实验方法原理某些菌属能使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,通过 KOH 和空气的作用,使乙酰甲基甲醇(3-羟基丙酮)转变成双乙酰,双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下,生成红色化合物,为 VP 试验阳性。实验材料大肠

粒子筛选实验室法和在线法

1、实验室法粒子色选实验室法有人工挑选法和粒子扫描设备法,以少量粒子试样的实验室分析数据预估实际生产情况。1.1、人工挑选法试验方法:取少量粒子试样,人工肉眼识别挑出带缺陷粒子。但是,人眼观察必然存在误差。人眼误判可能性高,不同人之间误差大,重复性差,人眼不能看到50微米以下的杂质,人眼几乎不能解决

粒子筛选实验室法和在线法

1、实验室法粒子色选实验室法有人工挑选法和粒子扫描设备法,以少量粒子试样的实验室分析数据预估实际生产情况。1.1、人工挑选法试验方法:取少量粒子试样,人工肉眼识别挑出带缺陷粒子。但是,人眼观察必然存在误差。人眼误判可能性高,不同人之间误差大,重复性差,人眼不能看到50微米以下的杂质,人眼几乎不能解决

蛋白定量BCA法-VS-Bradford法实验分析

精-确的蛋白质定量是蛋白质相关实验所必需的,这些实验涉及分子生物学,细胞生物学,生物化学,发育生物学和神经科学的研究课题。依托不同的科学原理,目前已经发展出多种不同的蛋白测定方法,科研工作者广泛使用的方法比如紫外吸收法(UV),双缩脲法,考马斯亮蓝法(Bradford)、Folin-酚试剂法(Low

吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法

实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩,如正粘病毒和副粘病毒,由于红细胞吸附法是特异的,故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞,常用的是鸡红细胞。基本步骤为:① 1%~3% 鸡

实验动物经口给药法——实验动物经口给药法

实验材料小鼠大鼠豚鼠兔猫狗试剂、试剂盒水药液片剂胶囊剂仪器、耗材灌胃器注射器兽用针头鼠笼开口器导尿管镊子经口给药有口服和灌胃两种方法,口服法一般将药物掺入饲料或溶于水中,由动物自由摄取,但为了保证药物的剂量准确性,应使用灌胃法。可供选择的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猫、狗等动物。灌胃法(1)小鼠灌胃