中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片（大约 1cmx1 cm ) 于 4℃ 在含 20 mmol/L EDTA 和蛋白酶抑制剂的 PBS 中浸泡过夜。3. 用镊子把表面的上皮从下面相连的组织中拉走。4. 用解剖刀片把上皮切成小块，在解聚缓冲液（每克上皮用 25 ml ) 中于 20℃ 搅拌 2 小时。解聚缓冲液：50 mmol/L Tris-HCl，pH 9.08 mol/L 尿素0.2% β-巯基乙醇5. 制品于 20℃ 以 100000 g 离心 30 分度。6. 用解聚缓冲液稀释上清使蛋白浓度为 0.5 mg/ml，在 4℃ 用组装缓冲液透析过夜。组装缓冲液：10 mmol/L Tris，p......阅读全文
中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片（大约 1cmx1 cm )
中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1% Tr
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝 从组织中分离中间丝 实验材料 细胞
中间丝的分离方法实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝从组织中分离中间丝实验材料细胞 试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂
从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃，用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行
细胞质的中间丝的相关介绍
(intermediate filament)又称中等纤维，直径约为8～11nm，介于细丝与粗丝之间，因而得名。中间丝可分为五种，各由不同蛋白质构成。在成体中绝大部分细胞仅含有一种中间丝，故具有组织特异性，且较稳定。五种中间丝的形态相仿，难于分辨。但用免疫组织化学方法则能将它们区分，从而可进一步
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏，注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中，剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用匀浆缓冲液（1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离 实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒
从豌豆组织分离叶绿体实验
叶绿体分离实验材料叶子组织 试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液
细胞膜的制备方法实验——分离顶层膜、基底膜或中间膜
从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜试剂、试剂盒包被缓冲液PAA裂解缓冲液Nyoodenz仪器、耗材阳离子硅胶微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管实验步骤1. 制备下列溶液：(1) 包被缓冲液（CB）20 mmol/L MES135 mmol/L NaCI0.5
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
分离核仁实验—从人肝脏或胎盘组织中分离核仁
实验材料组织试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L 乙酸镁2.2 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖，含
沙门氏菌毒力因子SopB挟持宿主细胞中间丝促进细菌复制
无肌间刺鱼突变体种质的创制是近年来鱼类遗传育种学研究的热点。异育银鲫以其肉质细嫩鲜美深受消费者青睐，但其体内具有的80多根细小的肌间刺给食用者带来了不少麻烦。近两年来，中国科学院院士、中科院水生生物研究所研究员桂建芳团队经全基因组解析揭示银鲫为双三倍体，即包含有两套三倍体基因组，由此开拓完善了在
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法 试剂、试剂盒 匀浆缓冲液
从组织分离粗制质膜组分的另一实验方法
Neville(1968) 所述的方法对分离鼠肝质膜的效果较好，但对分离其他组织的质膜不一定适用。这里，介绍一种从其他组织制备粗制质膜组分的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Dounce 氏玻璃匀浆器（15-ml)带 A 杵实验步骤设备Doun
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
组织的分离实验
试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下：1. 无菌切取1 cm3组织一块，置入青霉素瓶或小烧杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或弯剪（剪柄较长为好）伸入容器中，反复剪切组
组织的分离实验
机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法 试剂、试剂盒
从培养组织中分离单细胞的方法介绍
从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养，再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上，培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素，以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织，逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈伤组
Nature－Materials吸附分离新概念：中间尺寸分子筛
近日，中山大学化学学院张杰鹏教授团队在Nature Materials发表论文，报道了配位聚合物多孔材料吸附分离研究的新进展，提出并验证了中间尺寸分子筛概念。论文第一作者为周东东博士（2016年毕业于中山大学化学学院，现为中山大学化学学院特聘副研究员），张杰鹏教授为通讯作者。论文合作者包括中山大
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应(一)原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状。(二)细胞松驰素B处理成纤维细胞与染色观察1、在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片，在超净工作台内将一张盖片移入另
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
实验概要掌握考马斯亮蓝R250 染细胞骨架微丝的方法，了解动物细胞骨架的基本形态结构。实验原理真核细胞胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架(cytoskeleton)。根据纤维直径、组成成分和组装结构的不同，分为微管(microtubule, MT)、微丝(microfilament, MF) 和中
追踪哺乳动物组织中糖酵解中间产物的来源
葡萄糖一直被认为是哺乳动物最重要的循环能量前体，通过分解代谢途径——糖酵解，每一分子葡萄糖直接产生2个ATP分子。糖酵解还产生NADH和丙酮酸，可在线粒体中被氧化生成额外的ATP。当线粒体呼吸受损时，丙酮酸被NADH还原为乳酸，而乳酸是细胞分泌的废物。但是，哺乳动物并没有排泄大量的乳酸，一个
电泳分离技术－两边翘起中间凹下形态的形成原因
主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶中。 处理办法:待其充分凝固再作后续实验。
电泳分离技术－两边向下中间鼓起形态的形成原因
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。 处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
组织的分离实验_离心分离法
实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时，可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度，离心5~10 分钟即可。如悬液量大，离心时间可适当延长，但如离心速度过大和时间太长，易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时，可不必进行淋巴细胞分离，可采用全血培养法。在需用